Komplementfaktor-H-Haplotypen und Rauchen bei altersbedingter Makuladegeneration (CFH&AMD)

FORSCHUNGSDESIGN UND METHODEN A) Studiendesign Diese Studie soll ermitteln, ob Rauchen die Komplementaktivierung erhöht und ob es bestimmte AMD-Genotypen gibt, die besonders empfindlich auf diesen erhöhten Spiegel an Serumkomplementkomponenten reagieren.

B) Auswahl der Probanden und Kontrollen Fallprobanden und altersentsprechende (innerhalb von 5 Jahren) Kontrollprobanden werden nach einem Protokoll rekrutiert, das von den Johnson and DeBakey VA Medical Centers und dem Human Investigation Review Board der Medical University of South Carolina (MUSC) genehmigt wurde .

Einschlusskriterien

• Patienten mit eindeutiger AMD-Diagnose und mindestens 20/40-Ansicht des Fundus.
• Kontrollpersonen mit <5 kleinen harten Drusen und einer mindestens 20/40-Ansicht des Fundus.
• Alle Probanden haben die Möglichkeit, eine Blutprobe abzugeben, das Fehlen der unten aufgeführten Ausschlusskriterien nachzuweisen, ihre eigene Einwilligung zu erteilen oder einen gesetzlichen Vertreter zur Verfügung zu haben, der ihnen die Einwilligung erteilt, alle Aspekte des Tests abzuschließen und im Allgemeinen zu bleiben guter medizinischer Gesundheitszustand nach Meinung des Studienarztes.

Ausschlusskriterien

• Personen, die keine Einwilligung erteilen können und keinen gesetzlichen Vertreter haben, deren bestkorrigierte Sehschärfe für beide Augen schlechter als 20/40 ist, die ein Medikament einnehmen, von dem bekannt ist, dass es Retinopathie verursacht, die nicht in der Lage sind, an der Durchführung der Tests mitzuwirken, und die sich selbst vorstellen mit Medientrübung, die Krankheiten aufweisen, die phänotypisch mit AMD überlappen, wie Drusen oder Pigmentstörungen des retinalen Pigmentepithels; oder unzureichende Beweise für die Diagnose einer AMD liefern.
• Personen, die an Makuladystrophien, Toxoplasmose, Histoplasmose, degenerativer Myopie, zentraler seröser Chorioretinopathie oder einer anderen Krankheit oder Behandlung leiden, die die Fähigkeit zur Drusenerkennung beeinträchtigen würde, wie z. B. Laserphotokoagulation, frühere Netzhautablösungsoperationen, hintere Uveitis und Trauma.

Stichprobengröße und Leistungsschätzung Insgesamt werden 150 Fallprobanden und 150 Kontrollprobanden rekrutiert. Die Stichprobengröße wurde durch statistische Simulation der Studienergebnisse unter Verwendung der folgenden Annahmen bestimmt: ein Alpha-Wert von 0,05; 2-seitiges Hypothesentesten; und eine erwartete Verteilung über die CC-, CT- und TT-Faktor-H-Genotypen von 8,1 %, 52 % bzw. 39,9 % [1 und unter der Annahme, dass ~35 % der Probanden derzeit Raucher sind. Diese Stichprobengröße würde eine Aussagekraft von 85 % für die Erkennung eines signifikanten Rauchens durch Genotyp-Interaktion bieten, dem Hauptschwerpunkt dieser Studie.

Rekrutierungsfall und altersentsprechende (innerhalb von 5 Jahren) Kontrollpersonen werden rekrutiert. Die Rekrutierung erfolgt auf zwei Arten: 1) Sie werden nach der Diagnose in der Arztpraxis angerufen oder rekrutiert. Nach der unterzeichneten Einwilligung werden diese Probanden auch gebeten, Angaben zu ihrem Raucherstatus zu machen, und es wird eine Blutprobe (zwei 3-ml-Röhrchen) entnommen.

C) Ergebnismaße: Die Inzidenz von AMD wurde beim vorherigen klinischen Besuch anhand von Fundusfotos und akzeptierten AMD-Definitionen bestimmt. Zu weiteren Ergebnismessungen, die dabei helfen, den Schweregrad der AMD-Erkrankung zu charakterisieren, könnten der Gesichtsfeldtest, OCT und Fluorescein-Angiogramme gehören.

D) Datenanalysen

• Die als normalisierte Serumspiegel der Komplementfaktoren Ba, C3d und fD und fH zusammengestellten Daten werden zunächst mit univariaten Statistiken ausgewertet, um sicherzustellen, dass die Qualität der Daten für weitere Analysen ausreichend ist. Der Zusammenhang zwischen den einzelnen gemessenen Parametern (d. h. den Serumspiegeln der Komplementfaktoren), der AMD-Diagnose, dem Genotyp und dem Rauchen wird auf stratifizierte bivariate Weise unter Verwendung von Student-t-Tests oder Wilcoxon-Rangsummentests, je nach Bedarf, bewertet, und es werden Standardmaßbewertungen verwendet um auf Normalität, Schiefe usw. zu prüfen.
• Multivariate Analysen werden mithilfe allgemeiner linearer gemischter Modelle durchgeführt [5]. Die Modelle umfassen zufällige Subjekteffekte, um die Abhängigkeit zwischen wiederholten Messungen von Probanden zu berücksichtigen. Dieser Modelltyp ist ideal, wenn mehrere Messungen an Probanden durchgeführt werden, beispielsweise wenn Labormessungen in dreifacher Ausfertigung durchgeführt werden. Die interessierenden abhängigen Variablen sind die Messungen des Komplementniveaus (logarithmisch transformiert, falls erforderlich), während unabhängige Variablen den AMD-Status (Fall/Kontrolle), den Faktor-H-Genotyp (CC, CT, TT) und das Rauchen (aktuell, früher, nie) umfassen ) und ein Interaktionsterm, der den Faktor-H-Genotyp und den Raucherstatus umfasst. Mithilfe des Interaktionsterms können wir feststellen, ob der Einfluss des Faktor-H-Genotyps und des Rauchens auf die Serumkomplementspiegel linear (additiv) oder nichtlinear (z. B. multiplikativ) ist. Das Modell wird auch Anpassungen für Alter, Geschlecht und Rasse umfassen, die sich alle auf Komplementfaktoren auswirken können. Daher werden alle Unterschiede zwischen Haplotypen um Auswirkungen angepasst (korrigiert), die auf Alter, Geschlecht oder Rasse zurückzuführen sein können. Verschiedene Korrelationsstrukturen werden auf die zufälligen Subjekteffekte untersucht, und die Forscher werden das Informationskriterium von Akaike verwenden, um das am besten geeignete Modell auszuwählen. Sekundäre Analysen umfassen den Ausschluss von Niemalsrauchern, um die Art des Zusammenhangs (falls vorhanden) zwischen Packungs-/Jahresgeschichten zu beurteilen. Faktor-H-Genotypen. und ihre Komplementstufen. Eine zusätzliche Analyse (unter Verwendung einer bedingten logistischen Regression) wird durchgeführt, um festzustellen, ob Rauchen mit dem Faktor-H-Genotyp eines Probanden im Hinblick auf das AMD-Risiko interagiert. Auch dieses Modell wird an Alter, Geschlecht und Rasse angepasst und die Ergebnisse werden als Quotenverhältnisse im Zusammenhang mit dem AMD-Risiko ausgedrückt.

E) Mögliche Risiken

• Die Probanden haben eine umfassende Augenuntersuchung erhalten, die nicht Teil dieser Studie war. Die potenziellen Risiken können nicht beschrieben werden.
• Venenpunktion für Vollblut. Die Risiken einer Venenpunktion bestehen in Schmerzen oder Blutergüssen an der Venenpunktionsstelle; Ohnmacht oder Schwindel; oder eine Infektion an der Einstichstelle. Bei keinem dieser Verluste handelt es sich um dauerhafte oder erhebliche Verluste. Das klinische Personal ist für den Umgang mit diesen Komplikationen geschult.
• Persönliche Angaben. Die Weitergabe persönlicher Informationen (Blutproben, persönliche Vorgeschichte, genetische Informationen usw.) ist nicht ohne Risiko. Forschung zur Identifizierung von Genen, die eine Krankheit oder ein Merkmal verursachen oder dazu beitragen, ist eine immer wichtigere Methode, um zu versuchen, die Rolle von Genen bei menschlichen Krankheiten zu verstehen. Den Teilnehmern wurde ein Einverständnisformular ausgehändigt, weil die Forscher des Johnson and DeBakey VA Medical Centers die Blutprobe der Teilnehmer in ein Forschungsprojekt einbeziehen oder weil sie solche biologischen Proben für zukünftige Forschungen aufbewahren möchten.

Es gibt einige Dinge, die Teilnehmer wissen sollten, bevor sie einer Blutuntersuchung oder -aufbewahrung zustimmen.

• Blutproben werden unter einer alphanumerischen Kennung gespeichert, die schließlich mit den Teilnehmern verknüpft werden könnte.
• Neben dem Namen können auch andere Informationen über die Teilnehmer mit Blutproben in Zusammenhang stehen.
• Genetische Informationen über die Teilnehmer gelten häufig für Familienmitglieder.
• Die Teilnehmer haben das Recht, die Untersuchung oder Aufbewahrung ihres Blutes für zukünftige Forschungsstudien zu verweigern.
• Das Gesetz von South Carolina schreibt vor, dass genetische Informationen, die aus Tests oder dieser Forschung gewonnen werden, vertraulich behandelt werden.
• Genetische Forschung wirft schwierige Fragen hinsichtlich der Information von Teilnehmern und anderen Probanden über etwaige Ergebnisse oder zukünftige Ergebnisse auf.
• Wenn die Teilnehmer über eine mögliche genetische Störung besorgt sind, entscheiden sich der Teilnehmer und sein Arzt möglicherweise für einen gezielten Test darauf. Dies würde zusätzliche Blut- oder Gewebeproben erfordern und wäre nicht Teil dieses Forschungsprojekts.
• Das Vorhandensein eines genetischen Markers für eine Krankheit bedeutet nicht unbedingt, dass die Teilnehmer diese Krankheit entwickeln werden.

Unbekannte Risiken. Die Forscher werden die Teilnehmer informieren, wenn sie etwas erfahren, das ihre Meinung über die Teilnahme an dieser Studie ändern könnte.