Komplementer faktor H-haplotyper og rygning ved aldersrelateret makuladegeneration (CFH&AMD)

FORSKNINGSDESIGN OG METODER A) Undersøgelsesdesign Denne undersøgelse er designet til at bestemme, om rygning øger komplementaktiveringen, og om der er specifikke AMD-genotyper, der er særligt følsomme over for dette forhøjede niveau af serumkomplementkomponenter.

B) Udvælgelse af forsøgspersoner og kontroller Case-personer og aldersmatchede (inden for 5 år) kontrolpersoner vil blive rekrutteret i henhold til en protokol godkendt af Johnson og DeBakey VA Medical Centers og Medical University of South Carolina (MUSC) Human Investigation Review Board .

Inklusionskriterier

• Casepersoner med en klar diagnose af AMD og mindst 20/40 syn på fundus.
• Kontrolpersoner med <5 små hårde drusen og mindst 20/40 udsyn til fundus.
• Alle forsøgspersoner vil have mulighed for at give en blodprøve, demonstrere fraværet af eksklusionskriterier anført nedenfor, give deres eget samtykke eller have en juridisk repræsentant til rådighed til at give samtykke til dem, i stand til at fuldføre alle aspekter af testning og være i generelt god medicinsk sundhed efter undersøgelseslægens mening.

Eksklusionskriterier

• Personer, der ikke er i stand til at give samtykke, og som mangler en juridisk repræsentant, hvis bedst korrigerede synsstyrke for begge øjne er dårligere end 20/40, som tager en medicin, der vides at forårsage retinopati, ude af stand til at samarbejde om at gennemføre testning, og som præsenterer sig selv med medieopacitet, som udviser sygdomme, der fænotypisk overlapper med AMD, såsom drusen eller pigmentforstyrrelser i retinalt pigmentepitel; eller give utilstrækkelig dokumentation til at diagnosticere AMD.
• Personer, der præsenterer sig selv med makulære dystrofier, toxoplasmose, histoplasmose, degenerativ nærsynethed, central serøs chorioretinopati eller enhver sygdom eller behandling, der ville formindske evnen til at genkende drusen, såsom laserfotokoagulation, tidligere nethindeløsningskirurgi, posterior uveitis og traumer.

Prøvestørrelse og magtestimering I alt 150 case-personer og 150 kontrolpersoner vil blive rekrutteret. Prøvestørrelsen blev bestemt ved statistisk at simulere undersøgelsesresultaterne under anvendelse af følgende antagelser: et alfa-niveau på 0,05; 2-sidet hypotesetestning; og en forventet fordeling på tværs af CC-, CT- og TT faktor H-genotyperne på henholdsvis 8,1 %, 52 % og 39,9 % [1 og forudsat at ~35 % af forsøgspersonerne er nuværende rygere. Denne prøvestørrelse ville give 85 % kraft til at detektere en betydelig rygning ved genotype-interaktion, hovedfokus for denne undersøgelse.

Rekruttering Case og aldersmatchede (inden for 5 år) kontrolpersoner vil blive rekrutteret. Rekruttering vil foregå på to måder: 1) de vil blive ringet op eller rekrutteret efter diagnosen på lægekontoret. Efter underskrevet samtykke vil disse forsøgspersoner også blive bedt om at give oplysninger om deres rygestatus, og en blodprøve (to 3 ml rør) vil blive indsamlet.

C) Resultatmål Forekomsten af ​​AMD vil være blevet bestemt i det forudgående kliniske besøg baseret på Fundus-fotografier og accepterede AMD-definitioner. Yderligere resultatmålinger, der vil hjælpe med at karakterisere sværhedsgraden af ​​AMD-sygdom, kan omfatte synsfelttesten, OCT og fluorescein-angiogrammer.

D) Dataanalyser

• Data samlet som normaliserede serumniveauer af komplementfaktorer Ba, C3d og fD og fH aktivitetsniveauer vil indledningsvis blive evalueret med univariat statistik for at sikre, at kvaliteten af ​​dataene er tilstrækkelig til yderligere analyser. Sammenhængen mellem hver målt parameter (dvs. serumniveauer af komplementfaktorer), AMD-diagnose, genotype og rygning vil blive vurderet på en stratificeret bivariat måde ved hjælp af Student t-tests eller Wilcoxon rangsum-tests, alt efter hvad der er relevant, og standardmålevurderinger vil blive brugt for at tjekke for normalitet, skævheder osv.
• Multivariate analyser vil blive udført ved brug af generelle lineære blandede modeller [5]. Modellerne vil inkludere tilfældige emneeffekter for at tage højde for afhængighed blandt gentagne målinger af forsøgspersoner. Denne type model er ideel, når der er flere målinger på emner, såsom når laboratoriemålinger udføres i tre eksemplarer. De afhængige variabler af interesse vil være komplementniveaumålingerne (log transformeret, hvis det er nødvendigt), mens uafhængige variabler vil omfatte AMD-status (tilfælde/kontrol), faktor H genotype (CC, CT, TT), rygning (nuværende, tidligere, aldrig ), og et interaktionsudtryk, der involverer faktor H genotype og rygestatus. Interaktionsbegrebet vil hjælpe os med at bestemme, om virkningen af ​​faktor H-genotype og rygning på serumkomplementniveauer er lineær (additiv) eller ikke-lineær (f.eks. multiplikativ). Modellen vil også omfatte justeringer for alder, køn og race, som alle kan påvirke komplementfaktorer. Således vil enhver forskel mellem haplotyper blive justeret (korrigeret) for effekter, der kan tilskrives alder, køn eller race. Forskellige korrelationsstrukturer vil blive undersøgt for de tilfældige emneeffekter, og efterforskerne vil bruge Akaikes informationskriterium til at vælge den mest passende model. Sekundære analyser vil involvere udelukkelse af aldrig-rygere for at vurdere karakteren af ​​sammenhængen (hvis nogen) mellem pakke-/årshistorier. faktor H genotyper. og deres komplementniveauer. En yderligere analyse (ved hjælp af betinget logistisk regression) vil blive udført for at bestemme, om rygning interagerer med et individs faktor H-genotype med hensyn til risikoen for AMD. Igen vil denne model blive justeret for alder, køn og race, og resultaterne vil blive udtrykt som odds ratioer forbundet med risikoen for AMD.

E) Potentielle risici

• Forsøgspersonerne vil have modtaget en omfattende øjenundersøgelse, som ikke var en del af denne undersøgelse. De potentielle risici kan ikke beskrives.
• Venepunktur til fuldblod. Risikoen ved venepunktur er smerter eller blå mærker på stedet for venepunktur; besvimelse eller svimmelhed; eller infektion på stedet for nålestikket. Ingen af ​​disse er permanente eller væsentlige tab. Klinisk personale er uddannet til at håndtere disse komplikationer.
• Personlig information. Deling af personlige oplysninger (blodprøver, personlig historie, genetiske oplysninger osv.) er ikke uden risiko. Forskning for at identificere gener, der forårsager eller bidrager til en sygdom eller egenskab, er en stadig vigtigere måde at forsøge at forstå genernes rolle i menneskelig sygdom. Deltagerne fik en samtykkeerklæring, fordi forskere fra Johnson og DeBakey VA Medical Centers ønsker at inkludere deltagernes blodprøve i et forskningsprojekt, eller fordi de ønsker at gemme sådanne biologiske prøver til fremtidig forskning.

Der er flere ting, deltagerne bør vide, før de tillader, at blodet bliver studeret eller gemt.

• Blodprøver vil blive opbevaret under en alfanumerisk identifikator, som i sidste ende kan knyttes til deltagerne.
• Ud over navn kan andre oplysninger om deltagere være forbundet med blodprøver.
• Genetiske oplysninger om deltagernes vil ofte gælde familiemedlemmer.
• Deltagerne har ret til at nægte at lade deres blod blive undersøgt eller gemt til fremtidige forskningsstudier.
• Loven i South Carolina påbyder, at genetisk information, indhentet fra enhver test eller fra denne forskning, skal holdes fortrolig.
• Genetisk forskning rejser vanskelige spørgsmål om at informere deltagere og andre emner om eventuelle resultater eller om fremtidige resultater.
• Hvis deltagerne er bekymrede over en potentiel genetisk lidelse, kan deltageren og deres læge vælge at teste specifikt for det. Dette ville kræve yderligere blod- eller vævsprøver og ville ikke være en del af dette forskningsprojekt.
• Tilstedeværelsen af ​​en genetisk markør for en sygdom betyder ikke nødvendigvis, at deltagerne vil udvikle den sygdom.

Ukendte risici. Forskerne vil lade deltagerne vide, hvis de får at vide om noget, der kunne ændre mening om at deltage i denne undersøgelse.