Haplotipos del factor H del complemento y tabaquismo en la degeneración macular relacionada con la edad (CFH&AMD)

DISEÑO Y MÉTODOS DE LA INVESTIGACIÓN A) Diseño del estudio Este estudio está diseñado para determinar si fumar aumenta la activación del complemento y si hay genotipos específicos de AMD que son particularmente sensibles a este nivel elevado de componentes séricos del complemento.

B) Selección de sujetos y controles Los sujetos de los casos y los sujetos de control de la misma edad (dentro de los 5 años) se reclutarán según un protocolo aprobado por los Centros Médicos Johnson y DeBakey VA y la Junta de Revisión de Investigaciones Humanas de la Universidad Médica de Carolina del Sur (MUSC). .

Criterios de inclusión

• Sujetos de casos con un diagnóstico claro de AMD y al menos una vista de 20/40 del fondo de ojo.
• Sujetos de control con <5 pequeñas drusas duras y al menos una vista de 20/40 del fondo.
• Todos los sujetos tendrán la capacidad de proporcionar una muestra de sangre, demostrar la ausencia de los criterios de exclusión enumerados a continuación, dar su propio consentimiento o tener un representante legal disponible para dar su consentimiento, capaz de completar todos los aspectos de la prueba y estar en general buena salud médica en la opinión del médico del estudio.

Criterio de exclusión

• Individuos que no pueden dar su consentimiento y que carecen de un representante legal, cuya mejor agudeza visual corregida para ambos ojos es peor de 20/40, que están tomando un medicamento que se sabe que causa retinopatía, que no pueden cooperar para completar la prueba y que se presentan con opacidad media, que presentan enfermedades que se superponen fenotípicamente con la DMAE, como drusas o alteraciones pigmentarias del epitelio pigmentario de la retina; o proporcionar evidencia insuficiente para diagnosticar AMD.
• Individuos que se presenten con distrofias maculares, toxoplasmosis, histoplasmosis, miopía degenerativa, coriorretinopatía serosa central, o cualquier enfermedad o tratamiento que disminuya la capacidad de reconocer drusas como fotocoagulación con láser, cirugía previa de desprendimiento de retina, uveítis posterior y trauma.

Tamaño de la muestra y estimación del poder Se reclutará un total de 150 sujetos de casos y 150 sujetos de control. El tamaño de la muestra se determinó simulando estadísticamente los hallazgos del estudio utilizando los siguientes supuestos: un nivel alfa de 0,05; prueba de hipótesis bilateral; y una distribución esperada entre los genotipos del factor H CC, CT y TT de 8,1 %, 52 % y 39,9 %, respectivamente, [1 y suponiendo que ~35 % de los sujetos sean fumadores actuales. Este tamaño de muestra proporcionaría un poder del 85 % para detectar una interacción significativa entre el tabaquismo y el genotipo, el objetivo principal de este estudio.

Reclutamiento Se reclutarán sujetos de control de casos y emparejados por edad (dentro de los 5 años). El reclutamiento se realizará de dos formas: 1) serán llamados o reclutados después del diagnóstico en el consultorio médico. Tras el consentimiento firmado, a estos sujetos también se les pedirá que proporcionen información sobre su estado de fumador y se recolectará una muestra de sangre (dos tubos de 3 ml).

C) Medidas de resultado La incidencia de AMD se habrá determinado en la visita clínica anterior según las fotografías del fondo de ojo y las definiciones de AMD aceptadas. Las mediciones de resultados adicionales que ayudarán a caracterizar la gravedad de la enfermedad de AMD podrían incluir la prueba del campo visual, la OCT y los angiogramas con fluoresceína.

D) Análisis de datos

• Los datos recopilados como niveles séricos normalizados de los factores del complemento Ba, C3d y los niveles de actividad fD y fH se evaluarán inicialmente con estadísticas univariadas para garantizar que la calidad de los datos sea adecuada para análisis posteriores. La asociación entre cada parámetro medido (es decir, los niveles séricos de los factores del complemento), el diagnóstico de AMD, el genotipo y el tabaquismo se evaluarán de forma bivariada estratificada mediante pruebas t de Student o pruebas de suma de rangos de Wilcoxon, según corresponda, y se utilizarán evaluaciones de medidas estándar. para comprobar la normalidad, sesgo, etc.
• Los análisis multivariados se llevarán a cabo mediante el uso de modelos mixtos lineales generales [5]. Los modelos incluirán efectos de sujetos aleatorios para dar cuenta de la dependencia entre mediciones repetidas de sujetos. Este tipo de modelo es ideal cuando hay múltiples mediciones en sujetos, como cuando las mediciones de laboratorio se realizan por triplicado. Las variables dependientes de interés serán las mediciones del nivel del complemento (transformadas logarítmicamente, si es necesario), mientras que las variables independientes incluirán el estado de AMD (caso/control), el genotipo del factor H (CC, CT, TT), el tabaquismo (actual, anterior, nunca). ), y un término de interacción que implica el genotipo del factor H y el estado de fumador. El término de interacción nos ayudará a determinar si el impacto del genotipo del factor H y el tabaquismo en los niveles de complemento sérico es lineal (aditivo) o no lineal (p. ej., multiplicativo). El modelo también incluirá ajustes por edad, sexo y raza, que pueden afectar los factores del complemento. Por lo tanto, cualquier diferencia entre los haplotipos se ajustará (corregirá) por los efectos que pueden atribuirse a la edad, el género o la raza. Se examinarán diferentes estructuras de correlación para los efectos de sujetos aleatorios, y los investigadores utilizarán el criterio de información de Akaike para seleccionar el modelo más apropiado. Los análisis secundarios incluirán la exclusión de los que nunca han fumado, para evaluar la naturaleza de la asociación (si la hay) entre las historias de paquete/año. genotipos del factor H. y sus niveles de complemento. Se realizará un análisis adicional (usando regresión logística condicional) para determinar si fumar interactúa con el genotipo del factor H de un sujeto con respecto al riesgo de AMD. Nuevamente, este modelo se ajustará por edad, género y raza, y los resultados se expresarán como razones de probabilidad asociadas con el riesgo de AMD.

E) Riesgos potenciales

• Los sujetos habrán recibido un examen ocular completo que no formaba parte de este estudio. Los riesgos potenciales no se pueden describir.
• Venopunción para sangre entera. Los riesgos de la venopunción son dolor o moretones en el sitio de la venopunción; desmayos o mareos; o infección en el sitio del pinchazo de la aguja. Ninguno de estos son pérdidas permanentes o sustanciales. El personal clínico está capacitado para tratar estas complicaciones.
• Informacion personal. Compartir información personal (muestras de sangre, historial personal, información genética, etc.) no está exento de riesgos. La investigación para identificar los genes que causan o contribuyen a una enfermedad o rasgo es una forma cada vez más importante de tratar de comprender el papel de los genes en las enfermedades humanas. Los participantes recibieron un formulario de consentimiento porque los investigadores de los Centros Médicos Johnson y DeBakey VA desean incluir la muestra de sangre de los participantes en un proyecto de investigación, o porque desean guardar dichos especímenes biológicos para futuras investigaciones.

Hay varias cosas que los participantes deben saber antes de permitir que se estudie o guarde la sangre.

• Las muestras de sangre se almacenarán bajo un identificador alfanumérico que eventualmente podría vincularse a los participantes.
• Además del nombre, otra información sobre los participantes podría estar relacionada con las muestras de sangre.
• La información genética sobre los participantes a menudo se aplicará a los miembros de la familia.
• Los participantes tienen derecho a negarse a permitir que se estudie o guarde su sangre para futuros estudios de investigación.
• La ley de Carolina del Sur exige que la información genética, obtenida de cualquier prueba o de esta investigación, se mantenga confidencial.
• La investigación genética plantea preguntas difíciles acerca de informar a los participantes y otros sujetos de cualquier resultado o de resultados futuros.
• Si los participantes están preocupados por un posible trastorno genético, el participante y su médico pueden optar por realizar pruebas específicas para detectarlo. Esto requeriría muestras de sangre o tejido adicionales y no sería parte de este proyecto de investigación.
• La presencia de un marcador genético para una enfermedad no significa necesariamente que los participantes desarrollarán esa enfermedad.

Riesgos desconocidos. Los investigadores informarán a los participantes si se enteran de algo que pueda hacer que cambien de opinión acerca de participar en este estudio.