Гаплотипы фактора комплемента Н и курение при возрастной дегенерации желтого пятна (CFH&AMD)

ДИЗАЙН И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ A) Дизайн исследования Это исследование предназначено для определения того, увеличивает ли курение активацию комплемента и существуют ли определенные генотипы AMD, которые особенно чувствительны к этому повышенному уровню компонентов комплемента в сыворотке.

B) Отбор субъектов и контролей Субъекты исследования и контрольные субъекты того же возраста (в пределах 5 лет) будут набраны в соответствии с протоколом, одобренным Медицинскими центрами Джонсона и Дебейки, штат Вирджиния, и Советом по исследованию человека Медицинского университета Южной Каролины (MUSC). .

Критерии включения

• Субъекты с четким диагнозом ВМД и обзором глазного дна не менее 20/40.
• Контрольные субъекты с <5 маленькими твердыми друзами и обзором глазного дна не менее 20/40.
• Все субъекты будут иметь возможность предоставить образец крови, продемонстрировать отсутствие критериев исключения, перечисленных ниже, предоставить свое собственное согласие или иметь законного представителя, который может предоставить согласие для них, способный завершить все аспекты тестирования и быть в целом хорошее здоровье, по мнению врача-исследователя.

Критерий исключения

• Лица, которые не могут дать согласие и у которых нет законного представителя, чья острота зрения с максимальной коррекцией для обоих глаз ниже 20/40, которые принимают лекарство, известное как вызывающее ретинопатию, не могут сотрудничать для завершения тестирования и которые явились с помутнением среды, у которых проявляются заболевания, которые фенотипически совпадают с AMD, такие как друзы или пигментные нарушения пигментного эпителия сетчатки; или предоставить недостаточные доказательства для диагностики ВМД.
• Лица с макулярной дистрофией, токсоплазмозом, гистоплазмозом, дегенеративной миопией, центральной серозной хориоретинопатией или любым заболеванием или лечением, которое может снизить способность распознавать друзы, например, лазерная фотокоагуляция, предшествующая операция по отслойке сетчатки, задний увеит и травма.

Размер выборки и оценка мощности Всего будет набрано 150 испытуемых и 150 испытуемых в контрольной группе. Размер выборки был определен путем статистического моделирования результатов исследования с использованием следующих допущений: альфа-уровень 0,05; двусторонняя проверка гипотез; и ожидаемое распределение по генотипам фактора H CC, CT и TT 8,1%, 52% и 39,9% соответственно [1 и при условии, что ~ 35% субъектов являются текущими курильщиками. Этот размер выборки обеспечит 85%-ю мощность для выявления значительного курения по взаимодействию генотипов, что является основным направлением этого исследования.

Набираются случай и контрольные субъекты того же возраста (в пределах 5 лет). Набор будет проходить двумя способами: 1) их вызовут или наберут после постановки диагноза в кабинете врача. После подписания согласия этих субъектов также попросят предоставить информацию об их статусе курения, и будет взят образец крови (две пробирки по 3 мл).

C) Критерии исхода. Заболеваемость ВМД будет определена во время предыдущего клинического визита на основании фотографий глазного дна и принятых определений ВМД. Дополнительные измерения результатов, которые помогут охарактеризовать тяжесть заболевания ВМД, могут включать тест поля зрения, ОКТ и флуоресцентные ангиограммы.

Г) Анализ данных

• Данные, собранные в виде нормированных сывороточных уровней факторов комплемента Ba, C3d и уровней активности fD и fH, будут первоначально оцениваться с помощью одномерной статистики, чтобы гарантировать, что качество данных является адекватным для дальнейшего анализа. Связь между каждым измеряемым параметром (т. е. уровнями факторов комплемента в сыворотке), диагнозом ВМД, генотипом и курением будет оцениваться стратифицированным двумерным способом с использованием t-критерия Стьюдента или критерия суммы рангов Уилкоксона, в зависимости от ситуации, и будут использоваться стандартные оценки показателей. проверить на нормальность, перекос и т.д.
• Многофакторный анализ будет проводиться с использованием общих линейных смешанных моделей [5]. Модели будут включать случайные субъектные эффекты для учета зависимости между повторными измерениями субъектов. Этот тип модели идеален, когда на объектах проводится несколько измерений, например, когда лабораторные измерения выполняются в трех экземплярах. Представляющими интерес зависимыми переменными будут измерения уровня комплемента (логарифмически преобразованные, если необходимо), в то время как независимые переменные будут включать статус ВМД (случай/контроль), генотип фактора H (CC, CT, TT), курение (в настоящее время, в прошлом, никогда). ), и термин взаимодействия, включающий генотип фактора H и статус курения. Термин взаимодействия поможет нам определить, является ли влияние генотипа фактора H и курения на уровни комплемента в сыворотке линейным (аддитивным) или нелинейным (например, мультипликативным). Модель также будет включать поправки на возраст, пол и расу, которые могут влиять на факторы комплемента. Таким образом, любые различия между гаплотипами будут скорректированы (исправлены) с учетом эффектов, которые могут быть связаны с возрастом, полом или расой. Различные структуры корреляции будут изучены на предмет случайных эффектов субъекта, и исследователи будут использовать информационный критерий Акаике для выбора наиболее подходящей модели. Вторичный анализ будет включать в себя исключение никогда не куривших, чтобы оценить характер связи (если таковая имеется) между историями стаи/года. генотипы фактора Н. и уровни их комплемента. Будет проведен дополнительный анализ (с использованием условной логистической регрессии), чтобы определить, взаимодействует ли курение с генотипом фактора H субъекта в отношении риска AMD. Опять же, эта модель будет скорректирована с учетом возраста, пола и расы, а результаты будут выражены в виде отношения шансов, связанных с риском ВМД.

Д) Потенциальные риски

• Субъектам будет проведено комплексное обследование глаз, которое не входило в данное исследование. Потенциальные риски не могут быть описаны.
• Венепункция цельной крови. Рисками венепункции являются боль или кровоподтеки в месте венепункции; обморок или головокружение; или инфекция в месте укола иглой. Ни одна из этих потерь не является постоянной или существенной. Клинический персонал обучен справляться с этими осложнениями.
• Персональная информация. Обмен личной информацией (образцы крови, личная история, генетическая информация и т. д.) сопряжен с риском. Исследования по выявлению генов, которые вызывают или способствуют развитию заболевания или признака, становятся все более важным способом попытаться понять роль генов в заболевании человека. Участникам была выдана форма согласия, потому что исследователи Медицинских центров Джонсона и Дебейки, штат Вирджиния, хотят включить образец крови участников в исследовательский проект или потому, что они хотят сохранить такие биологические образцы для будущих исследований.

Есть несколько вещей, которые участники должны знать, прежде чем разрешить исследование или сохранение крови.

• Образцы крови будут храниться под буквенно-цифровым идентификатором, который в конечном итоге может быть связан с участниками.
• Помимо имени, с образцами крови может быть связана и другая информация об участниках.
• Генетическая информация об участниках часто применяется к членам семьи.
• Участники имеют право отказаться от исследования или сохранения своей крови для будущих научных исследований.
• Закон Южной Каролины требует, чтобы генетическая информация, полученная в результате любых анализов или исследований, оставалась конфиденциальной.
• Генетические исследования поднимают сложные вопросы об информировании участников и других испытуемых о любых результатах или о будущих результатах.
• Если участники обеспокоены потенциальным генетическим заболеванием, участник и его врач могут выбрать специальное тестирование на него. Это потребует дополнительных образцов крови или тканей и не будет частью этого исследовательского проекта.
• Наличие генетического маркера заболевания не обязательно означает, что у участников разовьется это заболевание.

Неизвестные риски. Исследователи сообщат участникам, если они узнают что-либо, что может изменить их мнение об участии в этом исследовании.