Täydennä tekijä H:n haplotyyppejä ja tupakointia ikään liittyvässä silmänpohjan rappeumassa (CFH&AMD)

TUTKIMUKSEN SUUNNITTELU JA MENETELMÄT A) Tutkimuksen suunnittelu Tämän tutkimuksen tarkoituksena on määrittää, lisääkö tupakointi komplementin aktivaatiota ja onko olemassa spesifisiä AMD-genotyyppejä, jotka ovat erityisen herkkiä tälle seerumin komplementtikomponenttien kohonneelle tasolle.

B) Koehenkilöiden ja kontrollien valinta Tapauskohteet ja ikään sopivat (5 vuoden sisällä) kontrollihenkilöt rekrytoidaan Johnson and DeBakey VA Medical Centerin sekä Etelä-Carolinan lääketieteellisen yliopiston (MUSC) Human Investigation Review Boardin hyväksymän protokollan mukaisesti. .

Sisällyttämiskriteerit

• Koehenkilöt, joilla on selkeä AMD-diagnoosi ja vähintään 20/40-kuva silmänpohjasta.
• Kontrollikoehenkilöt, joilla on <5 pientä kovaa drusenia ja vähintään 20/40 näkymä silmänpohjasta.
• Kaikilla koehenkilöillä on kyky antaa verinäyte, osoittaa alla lueteltujen poissulkemiskriteerien puuttuminen, antaa oma suostumuksensa tai heillä on oltava laillinen edustaja, joka antaa suostumuksensa heille, pystyy suorittamaan kaikki testauksen osa-alueet ja olemaan yleisesti hyvä lääketieteellinen terveys tutkimuslääkärin mielestä.

Poissulkemiskriteerit

• Henkilöt, jotka eivät pysty antamaan suostumusta ja joilla ei ole laillista edustajaa, joiden paras korjattu näöntarkkuus molemmissa silmissä on huonompi kuin 20/40, jotka käyttävät lääkettä, jonka tiedetään aiheuttavan retinopatiaa, eivät pysty tekemään yhteistyötä testauksen loppuunsaattamiseksi ja jotka esiintyvät joilla on väliaineen sameus, joilla on sairauksia, jotka ovat fenotyyppisesti päällekkäisiä AMD:n kanssa, kuten druseni tai verkkokalvon pigmenttiepiteelin pigmenttihäiriö; tai anna riittämättömiä todisteita AMD:n diagnosoimiseksi.
• Henkilöt, joilla on makuladystrofia, toksoplasmoosi, histoplasmoosi, rappeuttava likinäköisyys, keskusseroinen korioretinopatia tai mikä tahansa sairaus tai hoito, joka heikentäisi kykyä tunnistaa drusen, kuten laserfotokoagulaatio, aikaisempi verkkokalvon irrotusleikkaus, posteriorinen uveiitti ja trauma.

Näytteen koon ja tehon arviointi Yhteensä 150 tapauskohdetta ja 150 kontrollikohdetta rekrytoidaan. Otoskoko määritettiin simuloimalla tilastollisesti tutkimustuloksia käyttämällä seuraavia oletuksia: alfa-taso 0,05; 2-puolinen hypoteesien testaus; ja odotettu jakautuminen CC-, CT- ja TT-tekijä H-genotyyppien välillä on 8,1 %, 52 % ja 39,9 %, [1 ja olettaen, että ~35 % koehenkilöistä on tällä hetkellä tupakoivia. Tämä otoskoko antaisi 85 %:n tehon havaita merkittävä tupakointi genotyyppivuorovaikutuksen perusteella, joka on tämän tutkimuksen pääpaino.

Rekrytointi Tapaus ja ikään sopivat (5 vuoden sisällä) vertailukohteet rekrytoidaan. Rekrytointi tapahtuu kahdella tavalla: 1) heidät kutsutaan tai rekrytoidaan diagnoosin jälkeen lääkärin vastaanotolla. Allekirjoitetun suostumuksen jälkeen näitä koehenkilöitä pyydetään myös antamaan tietoja tupakoinnin tilastaan, ja niistä otetaan verinäyte (kaksi 3 ml:n putkea).

C) Tulosmittaukset AMD:n ilmaantuvuus on määritetty edeltävällä kliinisellä käynnillä silmänpohjakuvien ja hyväksyttyjen AMD-määritelmien perusteella. Muita tulosmittauksia, jotka auttavat karakterisoimaan AMD-taudin vakavuutta, voivat olla näkökenttätesti, OCT ja fluoreseiiniangiogrammit.

D) Tietojen analyysit

• Komplementtitekijöiden Ba-, C3d- ja fD- sekä fH-aktiivisuustasojen normalisoituina seerumitasoina kootut tiedot arvioidaan aluksi yksimuuttujatilastoilla sen varmistamiseksi, että tietojen laatu on riittävä jatkoanalyysejä varten. Kunkin mitatun parametrin (eli komplementtitekijöiden seerumipitoisuuksien), AMD-diagnoosin, genotyypin ja tupakoinnin välinen yhteys arvioidaan ositettuna kaksimuuttujaan käyttämällä Studentin t-testejä tai Wilcoxonin rank-summatestejä tapauksen mukaan, ja käytetään vakiomittausarvioita. tarkistaaksesi normaaliuden, vinoutumisen jne.
• Monimuuttujaanalyysejä tehdään käyttämällä yleisiä lineaarisia sekamalleja [5]. Mallit sisältävät satunnaisia ​​kohteen vaikutuksia huomioimaan riippuvuuden koehenkilöiden toistuvien mittausten välillä. Tämäntyyppinen malli on ihanteellinen, kun kohteilla on useita mittauksia, kuten kun laboratoriomittaukset suoritetaan kolmena kappaleena. Kiinnostavia riippuvaisia ​​muuttujia ovat komplementin tason mittaukset (logarit muunnettu tarvittaessa), kun taas riippumattomia muuttujia ovat AMD-status (tapaus/kontrolli), H-tekijän genotyyppi (CC, CT, TT), tupakointi (nykyinen, entinen, ei koskaan). ) ja vuorovaikutustermi, joka sisältää tekijän H genotyypin ja tupakoinnin. Vuorovaikutustermi auttaa meitä määrittämään, onko H-tekijän genotyypin ja tupakoinnin vaikutus seerumin komplementtitasoihin lineaarinen (additiivinen) vai ei-lineaarinen (esim. kerrannaisvaikutus). Malli sisältää myös iän, sukupuolen ja rodun mukautuksia, jotka voivat kaikki vaikuttaa komplementtitekijöihin. Siten kaikki erot haplotyyppien välillä mukautetaan (korjataan) vaikutusten mukaan, jotka voidaan johtua iästä, sukupuolesta tai rodusta. Erilaisia ​​korrelaatiorakenteita tutkitaan satunnaisten subjektivaikutusten varalta, ja tutkijat valitsevat sopivimman mallin Akaiken informaatiokriteerin avulla. Toissijaisiin analyyseihin sisältyy tupakoimattomien poissulkeminen, jotta voidaan arvioida pakkaus/vuosihistorian välisen yhteyden luonne (jos sellaista on). H-tekijän genotyypit. ja niiden komplementtitasot. Lisäanalyysi (käyttämällä ehdollista logistista regressiota) suoritetaan sen määrittämiseksi, onko tupakointi vuorovaikutuksessa kohteen H-tekijän genotyypin kanssa suhteessa AMD-riskiin. Jälleen tätä mallia mukautetaan iän, sukupuolen ja rodun mukaan, ja tulokset ilmaistaan ​​AMD-riskiin liittyvinä kertoimina.

E) Mahdolliset riskit

• Koehenkilöt ovat saaneet kattavan silmätutkimuksen, joka ei ollut osa tätä tutkimusta. Mahdollisia riskejä ei voi kuvailla.
• Suonenpunktio kokoverille. Suonenpunktion riskit ovat kipu tai mustelmat laskimopunktiokohdassa; pyörtyminen tai huimaus; tai infektio neulanpistokohdassa. Mikään näistä ei ole pysyviä tai merkittäviä menetyksiä. Kliininen henkilökunta on koulutettu käsittelemään näitä komplikaatioita.
• Henkilökohtaisia ​​tietoja. Henkilötietojen (verinäytteet, henkilöhistoria, geneettiset tiedot jne.) jakaminen ei ole riskitöntä. Tutkimus geenien tunnistamiseksi, jotka aiheuttavat tai edistävät sairautta tai ominaisuutta, on yhä tärkeämpi tapa yrittää ymmärtää geenien roolia ihmisen sairauksissa. Osallistujille annettiin suostumuslomake, koska Johnson ja DeBakey VA Medical Centerin tutkijat haluavat sisällyttää osallistujien verinäytteen tutkimusprojektiin tai koska he haluavat tallentaa tällaiset biologiset näytteet tulevaa tutkimusta varten.

Osallistujien tulee tietää useita asioita, ennen kuin he sallivat veren tutkimisen tai pelastamisen.

• Verinäytteet tallennetaan aakkosnumeerisen tunnisteen alle, joka voidaan lopulta linkittää osallistujiin.
• Verinäytteisiin voi liittyä nimen lisäksi muita osallistujia koskevia tietoja.
• Geneettinen tieto osallistujista koskee usein perheenjäseniä.
• Osallistujilla on oikeus kieltäytyä antamasta vertaansa tutkia tai tallentaa tulevia tutkimustutkimuksia varten.
• Etelä-Carolinan laki määrää, että kaikista testeistä tai tästä tutkimuksesta saatu geneettinen tieto on pidettävä luottamuksellisina.
• Geenitutkimus herättää vaikeita kysymyksiä siitä, miten osallistujille ja muille koehenkilöille tiedotetaan tuloksista tai tulevista tuloksista.
• Jos osallistujat ovat huolissaan mahdollisesta geneettisestä häiriöstä, osallistuja ja hänen lääkärinsä voivat päättää testata sitä erityisesti. Tämä vaatisi lisää veri- tai kudosnäytteitä, eikä se olisi osa tätä tutkimusprojektia.
• Sairauden geneettisen markkerin läsnäolo ei välttämättä tarkoita, että osallistujat kehittäisivät kyseisen taudin.

Tuntemattomat riskit. Tutkijat kertovat osallistujille, jos he saavat tietää jotain, mikä saattaisi muuttaa mieltään osallistuessaan tähän tutkimukseen.