Dopełniacz Haplotypy czynnika H i palenie w zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem (CFH&AMD)

PROJEKT BADAŃ I METODY A) Projekt badania To badanie ma na celu określenie, czy palenie zwiększa aktywację dopełniacza i czy istnieją specyficzne genotypy AMD, które są szczególnie wrażliwe na ten podwyższony poziom składników dopełniacza w surowicy.

B) Wybór pacjentów i kontroli Osoby badane i osoby kontrolne dopasowane wiekowo (w ciągu 5 lat) będą rekrutowane zgodnie z protokołem zatwierdzonym przez Johnson and DeBakey VA Medical Centers oraz Medical University of South Carolina (MUSC) Human Investigation Review Board .

Kryteria przyjęcia

• Osoby z wyraźnym rozpoznaniem AMD i co najmniej 20/40 widokiem dna oka.
• Osoby kontrolne z <5 małymi twardymi druzami i co najmniej 20/40 widokiem dna oka.
• Wszyscy uczestnicy będą mieli możliwość oddania próbki krwi, wykazania braku kryteriów wykluczenia wymienionych poniżej, wyrażenia własnej zgody lub posiadania przedstawiciela prawnego, który będzie mógł wyrazić zgodę w ich imieniu, będą w stanie ukończyć wszystkie aspekty badań i będą ogólnie w stanie dobry stan zdrowia w opinii lekarza prowadzącego badanie.

Kryteria wyłączenia

• Osoby, które nie mogą wyrazić zgody i nie mają przedstawiciela ustawowego, których najlepsza skorygowana ostrość wzroku dla obu oczu jest gorsza niż 20/40, które przyjmują lek powodujący retinopatię, nie mogą współpracować w celu wykonania badań i zgłaszają się z zmętnieniem błony środkowej, którzy wykazują choroby, które fenotypowo pokrywają się z AMD, takie jak druzy lub zaburzenia barwnikowe nabłonka barwnikowego siatkówki; lub dostarczyć niewystarczających dowodów do zdiagnozowania AMD.
• Osoby, u których występują dystrofie plamki żółtej, toksoplazmoza, histoplazmoza, krótkowzroczność zwyrodnieniowa, centralna chorioretinopatia surowicza lub jakakolwiek choroba lub leczenie zmniejszające zdolność rozpoznawania druz, takie jak fotokoagulacja laserowa, przebyta operacja odwarstwienia siatkówki, zapalenie tylnego odcinka błony naczyniowej oka i uraz.

Oszacowanie wielkości i siły próby W sumie zostanie zrekrutowanych 150 osób badanych i 150 osób kontrolnych. Wielkość próby została określona poprzez statystyczną symulację wyników badania przy użyciu następujących założeń: poziom alfa 0,05; dwustronne testowanie hipotez; oraz oczekiwany rozkład wśród genotypów czynnika H CC, CT i TT wynoszący odpowiednio 8,1%, 52% i 39,9% [1 i przy założeniu, że ~35% badanych to obecnie palacze. Ta wielkość próbki zapewniłaby 85% mocy do wykrycia znaczącego palenia przez interakcję genotypu, co jest głównym celem tego badania.

Rekrutacja Zostaną zrekrutowane przypadki i dopasowane wiekowo (w ciągu 5 lat) osoby kontrolne. Rekrutacja odbywać się będzie na dwa sposoby: 1) zostaną wezwani lub zrekrutowani po postawieniu diagnozy w gabinecie lekarskim. Po podpisaniu zgody osoby te zostaną również poproszone o podanie informacji o swoim statusie palenia tytoniu oraz zostanie pobrana próbka krwi (dwie probówki o pojemności 3 ml).

C) Miary wyników Częstość występowania AMD zostanie określona podczas poprzedniej wizyty klinicznej na podstawie zdjęć dna oka i zaakceptowanych definicji AMD. Dodatkowe pomiary wyników, które pomogą scharakteryzować ciężkość choroby AMD, mogą obejmować test pola widzenia, OCT i angiogramy fluoresceinowe.

D) Analizy danych

• Dane zebrane jako znormalizowane poziomy aktywności czynników dopełniacza Ba, C3d i fD oraz fH w surowicy zostaną wstępnie ocenione za pomocą statystyk jednowymiarowych, aby upewnić się, że jakość danych jest odpowiednia do dalszych analiz. Związek między każdym mierzonym parametrem (tj. poziomami czynników dopełniacza w surowicy), rozpoznaniem AMD, genotypem i paleniem tytoniu zostanie oceniony w warstwowy sposób dwuwymiarowy przy użyciu odpowiednio testu t-Studenta lub testu sumy rang Wilcoxona, a także zastosowane zostaną standardowe oceny miar aby sprawdzić normalność, przekrzywienie itp.
• Analizy wielowymiarowe będą prowadzone z wykorzystaniem ogólnych liniowych modeli mieszanych [5]. Modele będą obejmować losowe efekty podmiotowe, aby uwzględnić zależność między powtarzanymi pomiarami podmiotów. Ten typ modelu jest idealny, gdy istnieje wiele pomiarów na obiektach, na przykład gdy pomiary laboratoryjne są wykonywane w trzech powtórzeniach. Interesującymi zmiennymi zależnymi będą pomiary poziomu dopełniacza (w razie potrzeby przekształcone w log), podczas gdy zmienne niezależne będą obejmować status AMD (przypadek/kontrola), genotyp czynnika H (CC, CT, TT), palenie (obecne, dawne, nigdy ) oraz termin interakcji obejmujący genotyp czynnika H i status palenia. Termin interakcji pomoże nam określić, czy wpływ genotypu czynnika H i palenia na poziomy dopełniacza w surowicy jest liniowy (addytywny), czy nieliniowy (np. multiplikatywny). Model będzie również zawierał korekty ze względu na wiek, płeć i rasę, które mogą wpływać na czynniki uzupełniające. Zatem wszelkie różnice między haplotypami zostaną skorygowane (skorygowane) pod kątem efektów, które można przypisać wiekowi, płci lub rasie. Różne struktury korelacji zostaną zbadane pod kątem losowych efektów podmiotu, a badacze wykorzystają kryterium informacyjne Akaike, aby wybrać najbardziej odpowiedni model. Analizy wtórne obejmą wykluczenie osób nigdy nie palących, aby ocenić charakter związku (jeśli istnieje) między historiami paczek/lat. genotypy czynnika H. i ich poziomy dopełniacza. Zostanie przeprowadzona dodatkowa analiza (przy użyciu warunkowej regresji logistycznej) w celu ustalenia, czy palenie wchodzi w interakcję z genotypem czynnika H osobnika w odniesieniu do ryzyka wystąpienia AMD. Ponownie, ten model zostanie dostosowany do wieku, płci i rasy, a wyniki zostaną wyrażone jako iloraz szans związanych z ryzykiem wystąpienia AMD.

E) Potencjalne zagrożenia

• Pacjenci zostaną poddani kompleksowemu badaniu oczu, które nie było częścią tego badania. Potencjalnych zagrożeń nie da się opisać.
• Nakłucie żyły dla krwi pełnej. Ryzyko nakłucia żyły to ból lub zasinienie w miejscu wkłucia; omdlenie lub zawroty głowy; lub infekcja w miejscu wkłucia igły. Żadne z nich nie są trwałymi ani znaczącymi stratami. Personel kliniczny jest przeszkolony w radzeniu sobie z tymi powikłaniami.
• Informacje osobiste. Udostępnianie danych osobowych (próbki krwi, historia osobista, informacje genetyczne itp.) nie jest pozbawione ryzyka. Badania mające na celu identyfikację genów, które powodują lub przyczyniają się do choroby lub cechy, są coraz ważniejszym sposobem zrozumienia roli genów w chorobach człowieka. Uczestnicy otrzymali formularz zgody, ponieważ badacze z Johnson and DeBakey VA Medical Centers chcą włączyć próbkę krwi uczestników do projektu badawczego lub ponieważ chcą zachować takie próbki biologiczne do przyszłych badań.

Jest kilka rzeczy, o których uczestnicy powinni wiedzieć, zanim pozwolą na zbadanie lub ocalenie krwi.

• Próbki krwi będą przechowywane pod alfanumerycznym identyfikatorem, który ostatecznie może zostać powiązany z uczestnikami.
• Oprócz imienia i nazwiska z próbkami krwi mogą być powiązane inne informacje o uczestnikach.
• Informacje genetyczne o uczestnikach często dotyczą członków rodziny.
• Uczestnicy mają prawo odmówić zgody na badanie lub zachowanie ich krwi do przyszłych badań naukowych.
• Prawo stanu Karolina Południowa nakazuje zachowanie poufności informacji genetycznych uzyskanych z jakichkolwiek testów lub z tych badań.
• Badania genetyczne rodzą trudne pytania dotyczące informowania uczestników i innych osób o jakichkolwiek wynikach lub przyszłych wynikach.
• Jeśli uczestnicy obawiają się potencjalnego zaburzenia genetycznego, uczestnik i jego lekarz mogą zdecydować się na wykonanie specjalnego testu. Wymagałoby to dodatkowych próbek krwi lub tkanek i nie byłoby częścią tego projektu badawczego.
• Obecność markera genetycznego choroby nie musi oznaczać, że u uczestników rozwinie się ta choroba.

Nieznane zagrożenia. Naukowcy poinformują uczestników, jeśli dowiedzą się czegoś, co może zmienić zdanie na temat udziału w tym badaniu.