ALアミロイドーシス患者の再発の予測因子としての最小残存疾患

このプロトコルは、Q-PCR、NGS、および標準的な臨床評価の時に毎年得られる骨髄細胞を使用した質量分析による血漿タンパク質分析による MRD の証拠について、CR または VGPR を達成した AL アミロイドーシス患者を評価します。

診断からの骨髄吸引サンプルを使用して、各患者の疾患のベースラインプロファイルを作成します。 このサンプルにより、研究者は、患者が CR または VGPR を達成した後に実施される Q-PCR による MRD テストに必要なプライマー プローブ セットを作成できます。 ベースラインの骨髄生検サンプルは、同意時に採取するか、患者が研究目的で骨髄細胞を保管することに以前に同意している場合は、保管庫から採取することができます。 追加の 15 mL の吸引液は、臨床目的で新たに診断された患者に対して日常的に行われている診断骨髄生検から採取されます。 毎年の骨髄吸引物は、患者が反応するまで研究目的で採取されません。 患者はプロトコルにとどまりますが、MRD検査のための年次骨髄採取が開始される時点で、一次治療に対するCRまたはVGPRを達成した後にのみMRD検査を開始します。 患者が一次治療の CR または VGPR に達しない場合、診断からのベースラインの骨髄吸引物は破棄されます。

この研究で骨髄を使用することを選択した患者は、この研究専用の同意書に署名します。 同意の時点で、非腫瘍細胞の WGS 用に末梢血の 3 つの緑色のトップ チューブが取得されます。 この研究には、それ以上の血液サンプルは必要ありません。 CR または VGPR を達成した後、患者は 1 年間隔で標準治療として完全にステージングされます。 骨髄におけるMRDの存在をテストするためのサンプルは、治療への反応後最大3年間、臨床再病期分類のこれらの時点で取得されます。 この研究のための血液と骨髄の両方のサンプルは、すぐに現場の検査室に運ばれ、検査前に短時間保管されます。 これにより、研究サンプルが日常の臨床ケアに干渉しないことが保証されます。

MRDの存在をテストするために、Q-PCR、WGS、および質量分析による血漿タンパク質分析の3つの手法が使用されます。 Q-PCR と WGS はどちらも、骨髄吸引サンプルからのゲノム DNA を使用します。 Q-PCR 用のプライマー プローブ セットを作成するには、ベースラインからの骨髄サンプルを使用して、各患者の疾患を引き起こす遺伝的に固有の LC 遺伝子を認識できる個別化されたプライマー プローブ セットを作成します。 WGS を実行するために、ライブラリーの作成とマルチプレックス次世代シーケンシングのためにゲノム DNA がコアジェネティクスラボに提供されます。 血漿タンパク質分析を実施するために、現場の実験室で各被験者の末梢血および骨髄吸引サンプルの一部から血漿が分離されます。 各被験者の匿名化された LC 遺伝子配列とそれらの匿名化された血漿サンプルは、その後、各被験者の犯人 LC 遺伝子に関連する断片的なタンパク質配列を探すために、質量分析のためにメモリアル スローン ケタリングがんセンター (MSKCC) に送られます。

CRまたはVGPRに達した後、最大3年間の年次評価で、標準治療の臨床手順中に収集された骨髄の研究サンプルからのゲノムDNAを使用して、それぞれのMRDの存在をテストすることにより、反応の維持を確認します。上記の3つの方法（Q-PCR、WGS、および血漿タンパク質分析）のうち。 この研究の目的で収集された骨髄材料は分析後に保存されず、プライマープローブセットの設計はすべてタフツ医療センター内で行われます。 分析中に完全に消費されなかった骨髄サンプルは破棄されます。

これら 3 つの方法を使用して、このプロトコルは、1 つの方法が他の方法よりも優れているかどうか、および 3 つの方法が互いに相関する結果を生成するかどうかを判断します。 MRD 検査への参加を中止する決定は、患者と医師が個別に行います。 標準的な血液検査および尿検査により、3 年間に疾患の再発または血液学的進行が認められた患者は、MRD の検査を受けなくなります。