感染症と原因不明の不妊症

主な目的 このプロジェクトの主な課題は、原因不明の原発性不妊症の予後マーカーとしての NK 細胞の潜在的な役割を定義することです。 この目的を達成するために、100 人の原因不明の不妊女性のコホートで前向き研究を行います。 末梢血および子宮内膜 NK 細胞の免疫表現型を調べ、それらの活性化状態を分析します。 一方、ヘルペスウイルス感染の存在は、末梢血で評価され、NK分析の結果と相関します。 これらのデータは、不妊症の女性の状態における NK 細胞の役割を明らかにし、NK 細胞状態の補助因子としてのヘルペス ウイルス感染の意味を評価します。 これらのデータは、原因不明の不妊症の予測マーカーとして NK 細胞分析を使用する原理の証拠を提供します。

副次的な目的 副次的な目的は、不妊症における NK 細胞の状態に基づくメカニズムを評価することです。 HLA-G および HLA-E の発現はヘルペスウイルス感染によって免疫逃避メカニズムとして変更され (9)、これらの抗原は正しい胚着床に関与しているため (14)、末梢血中のこれらの分子のレベルを分析し、子宮内環境。 一方、HLA-G および HLA-E の遺伝子多型を解析します。 これらの結果は、pNKおよびeNK細胞でのヘルペスウイルス感染、KIR、LILRB、およびNKG2A受容体の発現の存在と相関します。 これらのデータは、不妊女性における NK 細胞の活性化とヘルペス ウイルス感染の制御における HLA-G と HLA-E の発現と遺伝的背景の意味を明らかにします。

これらの目的の達成は、6 つのワークパッケージ/目的 (WP) で得られます。

1. 不妊女性の特性評価 (WP1) (1-20 か月) 100 人の原因不明の不妊女性と 30 人の対照女性を募集します。 これらの女性は臨床的に評価され、臨床データベースが確立されます。 各女性から、末梢血サンプル、子宮内膜生検、子宮紅潮を採取します。
2. NK 細胞免疫表現型 (WP2) (1 ～ 20 か月) 末梢血および子宮内膜由来の NK 細胞は、サブタイプの割合 (CD56、CD16、CD9、CD49a)、および KIR、LILRB-1 および -2 の発現について分析されます。 CD94/NKG2A 受容体は、HLA-G および HLA-E 分子と相互作用して阻害シグナルを生成することが知られています。
3. Th1、Th2、Th17、LIF (WP3)。 (1-20 月) Th1、Th2、Th17 および LIF レベルは、活性化状態を評価するために、血漿および子宮洗浄サンプルで分析されます。 結果はNK細胞数と相関します。
4. ヘルペスウイルス感染症 (WP4) (12-24mth) ヘルペスウイルス DNA (HSV-1、HSV-2、EBV、CMV、HHV-6、HHV-7、VZV および HHV-8) の存在は、末梢血および子宮洗浄で分析されます。
5. HLA-G (WP5) (12-24mth) HLA-G 分子は、膜 (HLA-G1) および可溶性 (HLA-G5、mRNA 選択的スプライシングから; sHLA-G1、膜脱落から) 分子の両方として発現します。 膜および可溶性HLA-Gの発現は、末梢血および子宮内膜で評価されます。 HLA-G 発現は、14 塩基対 (rs66554220) の挿入/欠失 (ins/del) の多型によって制御され、14bp の欠失が mRNA を安定化させ、より高いレベルの HLA-G を生成します (15)。 女性の rs66554220 多型について遺伝子型を決定し、不妊状態における HLA-G 発現レベルへの影響を評価します。
6. HLA-E (WP6) (12-24mth) HLA-E 分子は、膜分子と可溶性分子の両方として発現します。 膜および可溶性HLA-Eの発現は、末梢血および子宮内膜で評価されます。 HLA-E の 2 つの非同義対立遺伝子、HLA-ER (E*0101) および HLA-EG (E*0103) (16) が同定されており、EG タンパク質の HLA-E 発現は ER より高かった。 不妊症への影響を評価するために、HLA-E 多型について女性の遺伝子型を決定します。