びまん性低悪性度グリオーマにおける腫瘍不均一性の病巣 (FDLGG)
IDH1変異型びまん性低悪性度神経膠腫における腫瘍不均一性の病巣は、神経膠腫増殖の負の調節因子として作用するホスホエタノールアミン酵素ETNPPLのSTAT3活性化およびダウンレギュレーションを明らかにする
バックグラウンド：
びまん性低悪性度グリオーマ (DLGG) は、成長の遅い脳および脊髄の原発性がんです。 それらは、それらの進化のために患者にとって致命的な結果をもたらす臓器で発生している腫瘍の最大15％を占めています。 より悪性の腫瘍に向かうこの変化の理由は、まだ明確にされていません。 以前、モンペリエ大学病院の神経腫瘍学の研究チームは、DLGG を発症した患者の 20 ～ 30% 内に腫瘍の不均一性の病巣を発見し、その結果を発表しました。 研究者らは、これらの病巣は、びまん性低悪性度神経膠腫から神経膠芽腫への転移の初期の始まり、高度に悪性の細胞を伴う腫瘍、および患者の平均余命が 2 年であることを示していると想定しました。
方法:
治験責任医師は、登録時に手術歴も神経腫瘍治療歴もない成人患者を選択しました。 彼らは、DLGG の 70% に見られる Isocitrate Dehydrogenase 1 の略である IDH1 という名前の代謝酵素の特定の変異を示しました。 患者は、腫瘍の不均一性の病巣を示したためにも選択されました。 彼らの同意を得た後、研究者は、免疫組織化学によって、DLGG と病巣の間の調節解除された経路を研究しました。 研究者らはまた、腫瘍細胞の生命と代謝を発現する分子である RNA を抽出し、それらを比較して、DLGG と病巣の間でどの遺伝子が異なって発現されているかを調べました。 すべての RNA は、さらに処理する前に品質管理のためにテストされました。 その後、研究者は、倫理、承認、施設のガイドラインを順守している 8 人の患者を調査しました。 目的の遺伝子は、その機能を評価するために in vitro で研究されました。 研究者らは、ほとんど記述されていないホスホエタノールアミンの異化作用の酵素を発見し、それに対する新しい抗増殖性腫瘍の役割を発見しました。
•考察: 研究者らは最初に、病巣が p-STAT3+ 細胞のパーセンテージが高いことを示しました。これは、これらの細胞における STAT3 経路の活性化を示しています。 リン酸化された STAT3 は細胞核に移行して、増殖、アポトーシス、血管新生に関与する多くの遺伝子を調節します。 そのため、STATタンパク質、特にSTAT3のリン酸化は、細胞周期の進行を促進し、血管新生を刺激し、腫瘍免疫監視を損なうことにより、GBMを含む多くの癌の病因に関与しています。
研究者らは、ETNPPL RNA およびタンパク質が病巣細胞で減少し、神経膠芽腫では存在しないことを発見しました。 これは、ETNPLL 発現が病巣および神経膠芽腫で発現が高い STAT3 および MKI67 と逆相関することを示す神経膠腫データベース分析と一致しています。 さらに、Kaplan-Meier 分析は、ETNPPL の発現が低い患者の全生存率が低いことを示しています。これらの観察結果は、この酵素が神経膠腫細胞の増殖に対抗する可能性があることを示唆しています。 研究者らは、3 つの神経膠芽腫細胞培養で ETNPPL を過剰発現させることにより、この仮説を実証しました。 2 つは ETNPPL 過剰発現に対して感受性があり、Gli4 細胞では影響が検出されなかったものの、増殖が減少しました。 これらの神経膠芽腫由来の培養物には、さまざまな種類の変異があります。
調査の概要
状態
条件
詳細な説明
IDH1 変異神経膠腫は、高悪性度神経膠腫に進行する成長の遅い脳腫瘍です。 この進行を引き起こす初期の分子イベントは明確に定義されていません。 以前の研究では、これらの腫瘍の 20% がすでに変換病巣を持っていることが明らかになりました。 これらの病巣は、悪性の進行をよりよく理解する機会を提供します。 研究者は、免疫組織化学とハイスループット RNA プロファイリングを使用して病巣細胞を特徴付けました。 これらは、JAK/STAT シグナル伝達の活性化を明らかにするより高い p-STAT3 染色を示します。 それらは、Hippo/Yap 経路 (AMOT、CCDC80、LIX1)、Wnt シグナル伝達 (CPE、DAAM2、GPR37、SFRP2)、EGFR シグナル伝達 (EPS15、MLC1)、細胞骨格および細胞間コミュニケーション (EZR、GJA1) に関与する遺伝子をダウンレギュレートします。 SKA3、動原体関連タンパク質。 さらに、病巣細胞は、脂質代謝エタノールアミンリン酸ホスホリアーゼ (ETNPPL/AGXT2L1) のレベルの低下を示します。 この酵素は、膜合成に関与するホスホエタノールアミンの異化作用に関与しています。 研究者らは、神経膠腫細胞およびヒト脳の星状細胞で ETNPPL タンパク質を検出しました。 その核局在は、この酵素の追加の役割を示唆しています。 ETNPPL の発現は神経膠腫のグレードと逆相関しており、研究者らは神経膠芽腫に ETNPPL タンパク質がないことを発見しました。
ETNPPL の過剰発現は神経膠腫幹細胞の増殖を減少させ、この酵素が神経膠腫形成に対抗することを示します。 まとめると、これらの結果は、膜脂質代謝と STAT3 経路の複合変化が IDH1 変異神経膠腫の悪性進行を促進することを示唆しています。
ヘマトキシリンおよびエオシン染色によって評価された、直径が少なくとも 4 mm の病巣を持つ腫瘍が選択されました。 RNAseを含まない条件で、Tissue Micro Array装置からの2ミリメートルのパンチを使用して、FFPE腫瘍ブロックで4つのドリル（腫瘍の病巣に2つ、腫瘍の他の部分に2つ）を実行しました。 パンチの後、切片のヘマトキシリンおよびエオシン染色によって、腫瘍領域の適切な選択をチェックした。 Qiagen RNeasy FFPEキットを使用して全RNAを抽出し、Nanodrop 1000（Thermo Fisher）で定量化し、Bioanalyzer 2100を使用してRNA完全性数（RIN）を決定しました。 RIN は平均 2.5 でしたが、Affymetrix 技術部門によると、DNA チップ上での標識およびハイブリダイゼーションにはまだ適していました。 Affymetrix WT Pico Kit で増幅および標識した後、cDNA を Human Gene 2.1 ST チップにハイブリダイズさせました。 Affymetrix Expression Console ソフトウェア (GC-RMA アルゴリズム) を使用してデータを正規化し、Affymetrix Transcriptome Analysis Console (3.1.0.5) ソフトウェアを使用して RNA プロファイルを作成しました。 差次的に発現する遺伝子は、1.1以上の線形倍率変化および0.05以下のp値に基づいて選択されました(n=8腫瘍)。 私たちの研究結果を裏付けるデータは、機能ゲノミクス データ Gene Expression Omnibus で公開されています。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
研究場所
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Montpellier、フランス、34295
- Uh Montpellier
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
研究登録の資格を得るには、個人は次の基準をすべて満たす必要があります。
- 18 歳から 70 歳までの年齢。
- IDH1変異のびまん性低悪性度神経膠腫に苦しんでいます。
- -研究に参加する前に術前または腫瘍治療はありません。
- 署名済みのインフォームド コンセント フォーム。
除外基準:
- 被験者は読み書きができません
- グレード3または4のグリオーマ
- IDH1-WT 状態の腫瘍
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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腫瘍細胞数の統計的に有意な増加
時間枠：1日
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腫瘍細胞数の統計的に有意な増加
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1日
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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この腫瘍発生の予測マーカーを決定する
時間枠：1日
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この腫瘍発生の予測マーカーを決定する
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1日
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協力者と研究者
捜査官
- スタディディレクター：VALERIE RIGAUX, MD, PhD、University Hospital, Montpellier
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
追加の関連 MeSH 用語
その他の研究ID番号
- RECHMPL19_0469
個々の参加者データ (IPD) の計画
個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?
IPD プランの説明
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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