潰瘍性大腸炎における自家エクスビボ拡張制御性T細胞

炎症性腸疾患 (IBD) の発症の主な原因は不明のままですが、最初のイベントが免疫細胞の浸潤と腸内の組織破壊を伴う持続的な免疫応答で最高潮に達することが広く受け入れられています。 IBD 患者の炎症を起こした腸壁内に存在する免疫細胞集団は、広範囲に特徴付けられ、研究されてきました (1;6)。 T 細胞に焦点を当てた研究は、クローン病 (CD) 患者の粘膜が Th1 細胞によって支配されているのに対し、潰瘍性大腸炎 (UC) 患者では、IL-5 および IL-5 を過剰に産生する非定型 Th2 プロファイルを持つヘルパー T 細胞を示しています。 IL-4 ではなく 13 が豊富です (7)。 さらに、Th17 細胞は炎症を起こした固有層で同定することができ、これらの細胞は IBD の病態生理学において重要な役割を果たすと考えられていますが、これらの細胞の病原メカニズムはまだ完全には理解されていません (8;9)。 Treg は固有層内にも存在し、これらの細胞は上記のエフェクター T 細胞集団を制御します。 それらは、局所 T 細胞と CD103 発現樹状細胞および腸上皮細胞との相互作用によってそれぞれ生成されます (10;11)。 さらに、Treg 表面でのインテグリンの発現 (例えば、 α4β7) は、特定のリガンド (例: MAdCAM1)。 そのため、Treg 細胞のホーミングと局所的な拡大により、自己寛容と腸の恒常性のサポートに不可欠な局所的な Treg プールが作成されます (12)。 さらに、Treg 細胞は、大腸炎および大腸炎関連癌における炎症性腸管免疫応答を抑制することが示されており (13-16)、腸の Th17 応答を増強すると考えられています (17)。 以前の研究では、エフェクター T 細胞の大規模な局所的増殖と比較して、IBD 患者の粘膜 Treg 細胞の増殖が不十分であることが示されているため、IBD 患者の Treg 細胞の数が比較的少ないことが、これらの細胞が過剰な免疫応答を制御できない理由を説明している可能性があります。 (18)。

マウスでの実験的大腸炎研究は、粘膜 Treg 細胞の数を増やすことによって大腸炎誘発性免疫応答を制御できることを実証し、IBD における Treg ベースの細胞療法の可能性を強調しています (19)。 具体的には、ナイーブ CD4+ T 細胞と Treg の同時移入は、重度の複合免疫不全 (SCID) マウスで慢性大腸炎を予防し、確立された大腸炎を改善します (20)。 さらに、ラパマイシンの存在下でex vivoで増殖したCD4+ T細胞は、SCIDマウスのナイーブCD4+ T細胞モデルで大腸炎の発症を防ぎます。 重要なことに、ラパマイシン単独の全身投与は、結腸炎症の発生を部分的にしか防がなかった(20)。 さらに、nTreg 細胞の養子移入と ex vivo トランスフォーミング増殖因子 (TGF)-β 誘導 Treg (iTreg) の養子移入は、マウスモデルにおいて in vivo で大腸炎活動を抑制した (13;15;21)。 まとめると、これらのデータは、Treg 細胞が IBD における腸の炎症の治療に使用できることを示唆しています (22)。

多数の Treg の養子移入を可能にするために、CD25+ Treg 細胞を自家白血球搬出物から分離し、インターロイキン-2 (IL-2)、ラパマイシンおよび抗 CD3/抗添加剤の存在下で 21 日間 in vitro で増殖させます-CD28 エキスパンダー ビーズ。 21 日間の増殖後、抗 CD3/抗 CD28 エキスパンダー ビーズを Treg 製剤から取り出します。 次に、Treg はさらに使用するまで 1000 万個の Treg/mL のアリコートで凍結されます (5)。

10% の患者損失を含む 12 人の患者が、少なくとも 10 人の治療を受け、完全に評価可能な患者が得られる、この単一施設、非盲検、迅速な用量漸増試験に登録されます。 自家 ex vivo 増殖 CD4+CD25+CD127-/lo Treg 細胞は、登録時に許可された併用療法の下で、活動性疾患または安定疾患を有する潰瘍性大腸炎患者に養子移入されます。 最大耐量 (MTD) は、特定の用量レベルで合計 4 人の治療を受けた患者の間で複数の用量制限毒性 (DLT) を生じない用量として定義されます。

最初に登録された患者は、0.5 x10e6 Treg/kg 体重の初期開始用量を受け取ります。 養子移入は、DLT が発生しない場合、次の患者で次の用量レベル (1 x 10e6 Treg/kg、2 x 10e6 Treg/kg、5 x 10e6/Treg/kg および 10 x 10e6 Treg/kg 体重) にエスカレートされます。 . 連続した患者は、急性の重篤な有害事象を監視するために、少なくとも4週間間隔で治療されます。 DLT が認められた場合、さらに 3 人の患者が同じ用量レベルで投与されます。 用量漸増は、4 人の患者のコホートのうち少なくとも 2 人の患者が DLT を経験するまで続けます。 4 人の患者のコホートのうち 2 人の患者が DLT を経験した場合、以前に許容された最高の用量レベルまで用量を段階的に下げます。 追加の 3 人の患者は、以前に許容された最高用量を投与されます。 試験した用量レベルで少なくとも 2 人の患者で DLT が認められた場合、DLT を経験した患者が 2 人未満になるまで、用量の漸減を続けます。 最高用量レベルでの登録が成功した後、さらに5人の患者が最高用量レベルで登録され、安全性評価が拡張されます。 テストされたすべての用量レベルで DLT が発生しないか、または DLT が 2 回未満の場合、MTD には達していません。 この場合、最大投与量 (MAD) が定義されます。