Células T reguladoras expandidas ex vivo autólogas en colitis ulcerosa

Si bien se desconoce la causa principal del desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal (EII), se acepta ampliamente que los eventos iniciales culminan en respuestas inmunitarias persistentes con infiltración de células inmunitarias y destrucción de tejido en el intestino. Las poblaciones de células inmunitarias presentes en la pared intestinal inflamada de los pacientes con EII se han caracterizado y estudiado ampliamente (1;6). Los estudios centrados en las células T han demostrado que la mucosa de los pacientes con enfermedad de Crohn (EC) está dominada por células Th1, mientras que en pacientes con colitis ulcerosa (CU) las células T colaboradoras con un perfil Th2 atípico, que producen en exceso IL-5 e IL- 13 pero no IL-4, son abundantes (7). Además, las células Th17 pueden identificarse en la lámina propia inflamada y se cree que estas células desempeñan un papel importante en la fisiopatología de la EII, aunque los mecanismos patogénicos de estas células aún no se conocen por completo (8;9). Treg también están presentes dentro de la lámina propia y estas células controlan las poblaciones de células T efectoras mencionadas anteriormente. Pueden generarse a través de la interacción de células T locales con células dendríticas que expresan CD103 y células epiteliales intestinales, respectivamente (10;11). Además, la expresión de integrinas en la superficie Treg (p. α4β7) facilita la migración de la mucosa a través de su interacción con ligandos específicos (p. MAdCAM1). Como tal, el alojamiento y la expansión local de las células Treg crean un grupo Treg local que es esencial para la autotolerancia y el soporte de la homeostasis intestinal (12). Además, se ha demostrado que las células Treg suprimen las respuestas inmunitarias intestinales proinflamatorias en la colitis y el cáncer asociado a la colitis (13-16) y se cree que aumentan las respuestas Th17 intestinales (17). Como estudios previos han demostrado una expansión insuficiente de las células Treg de la mucosa en pacientes con EII en comparación con la expansión local masiva de células T efectoras, es probable que el número relativamente bajo de células Treg en pacientes con EII explique por qué estas células no logran controlar las respuestas inmunitarias excesivas. (18).

Los estudios experimentales de colitis en ratones han demostrado que las respuestas inmunitarias colitogénicas pueden controlarse aumentando el número de células Treg de la mucosa y resaltan el potencial de la terapia celular basada en Treg en la EII (19). Específicamente, la cotransferencia de células T CD4+ vírgenes con Treg previene la colitis crónica y mejora la colitis establecida en ratones con inmunodeficiencia combinada severa (SCID) (20). Además, las células T CD4+ expandidas ex vivo en presencia de rapamicina previenen el desarrollo de colitis en un modelo de células T CD4+ ingenuas en ratones SCID. Es importante destacar que la administración sistémica de rapamicina sola solo evitó parcialmente el desarrollo de la inflamación del colon (20). Además, la transferencia adoptiva de células nTreg, así como la transferencia adoptiva de Treg inducida por factor de crecimiento transformante (TGF)-β ex vivo (iTreg) suprimió la actividad de colitis in vivo en modelos de ratón (13; 15; 21). En conjunto, estos datos sugieren que las células Treg podrían usarse para el tratamiento de la inflamación intestinal en la EII (22).

Para permitir una transferencia adoptiva de grandes cantidades de Treg, las células Treg CD25+ se aíslan de un producto de leucoféresis autóloga y se expanden in vitro durante 21 días en presencia de los aditivos Interleukin-2 (IL-2), rapamicina y anti-CD3/anti -Perlas de expansión CD28. Después de 21 días de expansión, las perlas expansoras anti-CD3/anti-CD28 se eliminan del producto farmacológico Treg. A continuación, las Treg se congelan en alícuotas de 10 millones de Treg/mL hasta su uso posterior (5).

Doce pacientes, incluido el 10 % de pérdida de pacientes, lo que da como resultado al menos diez pacientes tratados y totalmente evaluables, se inscribirán en este estudio de aumento de dosis acelerado, de etiqueta abierta y de un solo centro. Las células Treg CD4+CD25+CD127-/lo expandidas ex vivo autólogas se transferirán de forma adoptiva en pacientes con colitis ulcerosa con enfermedad activa o enfermedad estable bajo la terapia concomitante permitida en el momento de la inscripción. La dosis máxima tolerada (MTD) se define como la dosis que no produce más de una toxicidad limitante de la dosis (DLT) entre un total de cuatro pacientes tratados en el nivel de dosis particular.

El primer paciente inscrito recibirá la dosis inicial inicial de 0,5 x10e6 Treg/kg de peso corporal. La transferencia adoptiva se escala al siguiente nivel de dosis (1 x 10e6 Treg/kg, 2 x 10e6 Treg/kg, 5 x 10e6/Treg/kg y 10 x 10e6 Treg/kg de peso corporal), en el siguiente paciente, si no se produce DLT . Los pacientes consecutivos serán tratados con al menos cuatro semanas de diferencia para monitorear los eventos adversos severos agudos. Si se observa una DLT, tres pacientes adicionales recibirán el mismo nivel de dosis. El aumento de la dosis continúa hasta que al menos dos pacientes de una cohorte de cuatro pacientes experimenten una DLT. Si dos pacientes de una cohorte de cuatro pacientes experimentan una DLT, se reducirá la dosis al nivel de dosis más alto previamente tolerado. Tres pacientes adicionales recibirán la dosis más alta previamente tolerada. Si se observa una DLT en al menos dos pacientes con el nivel de dosis probado, la reducción de la dosis continuará hasta que menos de dos pacientes hayan experimentado una DLT. Después de la inscripción exitosa en el nivel de dosis más alto, cinco pacientes adicionales se inscribirán en el nivel de dosis más alto para ampliar la evaluación de seguridad. Si no se experimentan DLT o menos de dos DLT en todos los niveles de dosis probados, no se alcanza la MTD. En este caso, se define una dosis máxima administrada (MAD).