궤양성 대장염에서 자가 조직 Ex Vivo 확장 조절 T 세포

염증성 장질환(IBD) 발병의 주요 원인은 아직 알려지지 않았지만, 초기 사건이 장내 면역 세포의 침윤 및 조직 파괴와 함께 지속적인 면역 반응에서 최고조에 달한다는 것이 널리 받아들여지고 있습니다. IBD 환자의 염증이 생긴 장벽 내에 존재하는 면역 세포 집단은 광범위하게 특성화되고 연구되었습니다(1;6). T 세포에 초점을 맞춘 연구에 따르면 크론병(CD) 환자의 점막은 Th1 세포에 의해 지배되는 반면, 궤양성 대장염(UC) 환자의 경우 비정형 Th2 프로필을 가진 T 도우미 세포가 IL-5 및 IL-2를 과도하게 생산하는 것으로 나타났습니다. IL-4가 아닌 13개는 풍부합니다(7). 또한 Th17 세포는 염증이 생긴 고유판에서 확인할 수 있으며 이러한 세포의 병원성 기전은 아직 완전히 이해되지 않았지만 IBD의 병태생리학에서 중요한 역할을 하는 것으로 생각됩니다(8;9). Treg는 또한 고유층(lamina propria) 내에 존재하며 이들 세포는 위에서 언급한 이펙터 T 세포 집단을 제어합니다. 그것들은 국소 T 세포와 CD103 발현 수지상 세포 및 장 상피 세포 각각의 상호작용을 통해 생성될 수 있습니다(10;11). 또한, Treg 표면의 인테그린 발현(예: α4β7)는 특정 리간드(예: MAdCAM1). 따라서 Treg 세포의 귀소 및 국소 확장은 자기 관용 및 장 항상성 지원에 필수적인 국소 Treg 풀을 생성합니다(12). 또한, Treg 세포는 대장염 및 대장염 관련 암에서 전 염증성 장 면역 반응을 억제하는 것으로 나타났으며(13-16) 장의 Th17 반응을 증가시키는 것으로 생각됩니다(17). 이전 연구에서 이펙터 T 세포의 대규모 국소 확장과 비교하여 IBD 환자에서 점막 Treg 세포의 불충분한 확장이 입증되었으므로 IBD 환자의 Treg 세포 수가 상대적으로 적기 때문에 이러한 세포가 과도한 면역 반응을 제어하지 못하는 이유를 설명할 수 있습니다. (18).

쥐를 대상으로 한 실험적 대장염 연구는 대장암 면역 반응이 점막 Treg 세포의 수를 증가시킴으로써 제어될 수 있음을 보여주었고 IBD에서 Treg 기반 세포 치료의 가능성을 강조했습니다(19). 구체적으로, 미성숙 CD4+ T 세포와 Treg의 공동 전달은 만성 결장염을 예방하고 중증 복합 면역결핍(SCID) 마우스에서 확립된 결장염을 개선합니다(20). 더욱이, 라파마이신의 존재 하에 확장된 CD4+ T 세포는 SCID 마우스의 나이브 CD4+ T 세포 모델에서 대장염의 발생을 예방한다. 중요하게도, 라파마이신 단독의 전신 투여는 결장 염증의 발달을 부분적으로만 예방했습니다(20). 또한, nTreg 세포의 입양 전달 및 생체외 형질전환 성장 인자(TGF)-β-유도 Treg(iTreg)의 입양 전달은 마우스 모델에서 생체 내 대장염 활동을 억제했습니다(13;15;21). 집합적으로, 이러한 데이터는 Treg 세포가 IBD에서 장 염증 치료에 사용될 수 있음을 시사합니다(22).

많은 수의 Treg의 입양 전달을 허용하기 위해 CD25+ Treg 세포는 자가 백혈구성분채집술 제품에서 분리되고 Interleukin-2(IL-2), 라파마이신 및 항-CD3/항 첨가제가 있는 상태에서 21일 동안 시험관 내에서 확장됩니다. -CD28 익스팬더 비드. 확장 21일 후, Treg 약물 제품에서 항-CD3/항-CD28 확장기 비드를 제거합니다. 다음으로 Treg는 추가로 사용할 때까지 1000만 Treg/mL의 분취량으로 동결됩니다(5).

10%의 환자 손실을 포함하여 12명의 환자가 치료를 받고 완전히 평가 가능한 최소 10명의 환자가 이 단일 센터, 공개 라벨, 빠른 용량 증량 연구에 등록됩니다. 자가 체외 확장 CD4+CD25+CD127-/lo Treg 세포는 등록 시 허용되는 병용 요법 하에서 활동성 질환 또는 안정 질환이 있는 궤양성 대장염 환자에게 입양 전달될 것입니다. 최대 허용 용량(MTD)은 특정 용량 수준에서 총 4명의 치료 환자 중 하나 이상의 용량 제한 독성(DLT)을 생성하지 않는 용량으로 정의됩니다.

첫 번째 등록 환자는 0.5 x10e6 Treg/kg 체중의 초기 시작 용량을 받게 됩니다. DLT가 발생하지 않는 경우, 다음 환자에서 다음 용량 수준(1 x 10e6 Treg/kg, 2 x 10e6 Treg/kg, 5 x 10e6/Treg/kg 및 10 x 10e6 Treg/kg 체중)으로 입양 전송이 확대됩니다. . 연속적인 환자는 급성 중증 부작용을 모니터링하기 위해 최소 4주 간격으로 치료를 받게 됩니다. DLT가 기록되면 3명의 추가 환자에게 동일한 용량 수준을 투여합니다. 용량 증량은 4명의 환자 코호트 중 최소 2명의 환자가 DLT를 경험할 때까지 계속됩니다. 4명의 환자 코호트 중 2명의 환자가 DLT를 경험하는 경우, 이전에 허용된 가장 높은 용량 수준으로 용량 감소가 뒤따를 것입니다. 3명의 추가 환자는 이전에 허용된 최고 용량을 투여받게 됩니다. 테스트 용량 수준에서 최소 2명의 환자에게서 DLT가 확인되면 2명 미만의 환자가 DLT를 경험할 때까지 용량 감소가 계속됩니다. 최고 용량 수준에 성공적으로 등록한 후 안전성 평가를 확장하기 위해 5명의 추가 환자가 최고 용량 수준에 등록됩니다. 테스트한 모든 용량 수준에서 DLT가 없거나 2개 미만의 DLT가 발생하면 MTD에 도달하지 않습니다. 이 경우 최대 투여 용량(MAD)이 정의됩니다.