Cellules T régulatrices expansées ex vivo autologues dans la rectocolite hémorragique

Bien que la cause principale du développement des maladies inflammatoires de l'intestin (MII) reste inconnue, il est largement admis que les événements initiaux aboutissent à des réponses immunitaires persistantes avec infiltration de cellules immunitaires et destruction des tissus dans l'intestin. Les populations de cellules immunitaires présentes dans la paroi intestinale enflammée des patients atteints de MICI ont été largement caractérisées et étudiées (1; 6). Des études portant sur les cellules T ont démontré que la muqueuse des patients atteints de la maladie de Crohn (MC) est dominée par les cellules Th1, tandis que chez les patients atteints de rectocolite hémorragique (CU), les cellules T auxiliaires avec un profil Th2 atypique produisent excessivement de l'IL-5 et de l'IL- 13 mais pas IL-4, sont abondants (7). De plus, les cellules Th17 peuvent être identifiées dans la lamina propria enflammée et on pense que ces cellules jouent un rôle important dans la physiopathologie des MICI, bien que les mécanismes pathogènes de ces cellules ne soient pas encore entièrement compris (8; 9). Les Treg sont également présents dans la lamina propria et ces cellules contrôlent les populations de lymphocytes T effecteurs mentionnées ci-dessus. Ils peuvent être générés par l'interaction de lymphocytes T locaux avec des cellules dendritiques exprimant CD103 et des cellules épithéliales intestinales, respectivement (10; 11). De plus, l'expression des intégrines sur la surface Treg (par ex. α4β7) facilite la migration muqueuse grâce à leur interaction avec des ligands spécifiques (par ex. MAdCAM1). En tant que tel, le homing et l'expansion locale des cellules Treg créent un pool local de Treg qui est essentiel pour l'auto-tolérance et le soutien de l'homéostasie intestinale (12). De plus, il a été démontré que les cellules Treg suppriment les réponses immunitaires intestinales pro-inflammatoires dans la colite et le cancer associé à la colite (13-16) et on pense qu'elles augmentent les réponses Th17 intestinales (17). Comme des études antérieures ont démontré une expansion insuffisante des cellules Treg muqueuses chez les patients atteints de MICI par rapport à l'expansion locale massive des lymphocytes T effecteurs, il est probable que le nombre relativement faible de cellules Treg chez les patients atteints de MII explique pourquoi ces cellules ne parviennent pas à contrôler les réponses immunitaires excessives. (18).

Des études expérimentales sur la colite chez la souris ont démontré que les réponses immunitaires colitogènes peuvent être contrôlées en augmentant le nombre de cellules Treg muqueuses et mettent en évidence le potentiel de la thérapie cellulaire à base de Treg dans les MICI (19). Plus précisément, le co-transfert de lymphocytes T CD4 + naïfs avec des Treg prévient à la fois la colite chronique et améliore la colite établie chez les souris à immunodéficience combinée sévère (SCID) (20). De plus, les lymphocytes T CD4+ expansés ex vivo en présence de rapamycine préviennent le développement de la colite dans un modèle de lymphocytes T CD4+ naïf chez la souris SCID. Il est important de noter que l'administration systémique de rapamycine seule n'a empêché que partiellement le développement d'une inflammation du côlon (20). De plus, le transfert adoptif de cellules nTreg ainsi que le transfert adoptif de Treg induit par le facteur de croissance transformant (TGF)-β (iTreg) ex vivo ont supprimé l'activité de la colite in vivo dans des modèles murins (13; 15; 21). Collectivement, ces données suggèrent que les cellules Treg pourraient être utilisées pour le traitement de l'inflammation intestinale dans les MII (22).

Pour permettre un transfert adoptif d'un grand nombre de Treg, des cellules Treg CD25+ sont isolées d'un produit de leucaphérèse autologue et expansées in vitro pendant 21 jours en présence des additifs Interleukine-2 (IL-2), rapamycine et anti-CD3/anti -Perles d'expansion CD28. Après 21 jours d'expansion, les billes d'expansion anti-CD3/anti-CD28 sont retirées du produit médicamenteux Treg. Ensuite, les Treg sont congelés en aliquotes de 10 millions de Treg/mL jusqu'à leur utilisation ultérieure (5).

Douze patients, dont 10 % de patients perdus, soit au moins dix patients traités et entièrement évaluables, seront recrutés dans cette étude monocentrique, ouverte et accélérée à dose progressive. Les cellules autologues expansées ex vivo CD4+CD25+CD127-/lo Treg seront transférées de manière adoptive chez les patients atteints de colite ulcéreuse avec une maladie active ou une maladie stable sous le traitement concomitant autorisé au moment de l'inscription. La dose maximale tolérée (MTD) est définie comme la dose qui ne produit pas plus d'une toxicité limitant la dose (DLT) parmi un total de quatre patients traités au niveau de dose particulier.

Le premier patient inscrit recevra la dose initiale de départ de 0,5 x 10e6 Treg/kg de poids corporel. Le transfert adoptif est augmenté au niveau de dose suivant (1 x 10e6 Treg/kg, 2 x 10e6 Treg/kg, 5 x 10e6/Treg/kg et 10 x 10e6 Treg/kg de poids corporel), chez un patient suivant, si aucun DLT ne se produit . Les patients consécutifs seront traités à au moins quatre semaines d'intervalle pour surveiller les événements indésirables graves aigus. Si un DLT est noté, trois patients supplémentaires recevront le même niveau de dose. L'escalade de dose se poursuit jusqu'à ce qu'au moins deux patients parmi une cohorte de quatre patients subissent un DLT. Si deux patients parmi une cohorte de quatre patients subissent une DLT, une diminution de la dose jusqu'au niveau de dose le plus élevé précédemment toléré suivra. Trois patients supplémentaires recevront la dose la plus élevée précédemment tolérée. Si un DLT est noté chez au moins deux patients au niveau de dose testé, la diminution de la dose se poursuivra jusqu'à ce que moins de deux patients aient subi un DLT. Après un recrutement réussi au niveau de dose le plus élevé, cinq patients supplémentaires seront recrutés au niveau de dose le plus élevé pour étendre l'évaluation de la sécurité. S'il n'y a pas de DLT ou moins de deux DLT à tous les niveaux de dose testés, la MTD n'est pas atteinte. Dans ce cas, une dose maximale administrée (MAD) est définie.