Autológ ex vivo kiterjesztett szabályozó T-sejtek fekélyes vastagbélgyulladásban

Míg a gyulladásos bélbetegség (IBD) kialakulásának elsődleges oka továbbra is ismeretlen, széles körben elfogadott, hogy a kezdeti események tartós immunválaszokban csúcsosodnak ki, immunsejtek beszivárgásával és szövetpusztulással a bélben. Az IBD-s betegek gyulladt bélfalában jelenlévő immunsejt-populációkat alaposan jellemezték és tanulmányozták (1;6). A T-sejtekre fókuszáló vizsgálatok kimutatták, hogy a Crohn-betegségben (CD) szenvedő betegek nyálkahártyáján a Th1 sejtek dominálnak, míg a colitis ulcerosa (UC) betegeknél atípusos Th2 profilú T helper sejtek, amelyek túlzottan termelnek IL-5-öt és IL- 13, de nem IL-4, bőségesek (7). Továbbá Th17 sejtek azonosíthatók a gyulladt lamina propriában, és úgy gondolják, hogy ezek a sejtek fontos szerepet játszanak az IBD patofiziológiájában, bár e sejtek patogén mechanizmusai még nem teljesen ismertek (8; 9). A treg a lamina propriában is jelen van, és ezek a sejtek szabályozzák a fent említett effektor T-sejt-populációkat. Lokális T-sejtek CD103-at expresszáló dendritikus sejtekkel, illetve bélhámsejtekkel való kölcsönhatása révén állíthatók elő (10;11). Ezenkívül az integrinek expressziója a Treg felületén (pl. α4β7) elősegíti a nyálkahártya migrációját specifikus ligandumokkal (pl. MAdCAM1). Mint ilyen, a Treg-sejtek elhelyezése és helyi terjeszkedése egy helyi Treg-készletet hoz létre, amely elengedhetetlen az öntoleranciához és a bél homeosztázisának támogatásához (12). Ezenkívül a Treg-sejtekről kimutatták, hogy elnyomják a gyulladást okozó bélrendszeri immunválaszt vastagbélgyulladásban és vastagbélgyulladással összefüggő rákban (13-16), és úgy gondolják, hogy fokozzák a bélrendszeri Th17-válaszokat (17). Mivel a korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a nyálkahártya Treg-sejtek nem eléggé terjeszkednek IBD-ben szenvedő betegekben az effektor T-sejtek masszív lokális expanziójához képest, valószínű, hogy az IBD-betegeknél a Treg-sejtek viszonylag alacsony száma magyarázza, hogy ezek a sejtek miért nem képesek szabályozni a túlzott immunválaszokat. (18).

Az egereken végzett kísérletes vastagbélgyulladás-vizsgálatok kimutatták, hogy a kolitogén immunválaszok szabályozhatók a nyálkahártya Treg-sejtek számának növelésével, és rávilágítanak a Treg-alapú sejtterápia lehetőségeire IBD-ben (19). Pontosabban, a naiv CD4+ T-sejtek Treg-gel történő együttes átvitele megelőzi a krónikus vastagbélgyulladást és enyhíti a kialakult vastagbélgyulladást súlyos kombinált immunhiányos (SCID) egerekben (20). Ezenkívül a rapamicin jelenlétében ex vivo szaporított CD4+ T-sejtek megakadályozzák a vastagbélgyulladás kialakulását naiv CD4+ T-sejt-modellben SCID egerekben. Fontos, hogy a rapamicin szisztémás alkalmazása önmagában csak részben akadályozta meg a vastagbélgyulladás kialakulását (20). Ezen túlmenően, az nTreg sejtek adoptív átvitele, valamint az ex vivo transzformáló növekedési faktor (TGF)-β által kiváltott Treg (iTreg) adoptív átvitele egérmodellekben in vivo elnyomta a vastagbélgyulladás aktivitását (13;15;21). Ezek az adatok együttesen azt sugallják, hogy a Treg-sejtek felhasználhatók IBD-ben fellépő bélgyulladás kezelésére (22).

A nagyszámú Treg adoptív átvitelének lehetővé tétele érdekében a CD25+ Treg sejteket autológ leukaferézis termékből izolálják, és 21 napon keresztül in vitro szaporítják az interleukin-2 (IL-2), rapamicin és anti-CD3/anti adalékok jelenlétében. -CD28 expander gyöngyök. 21 napos expanzió után az anti-CD3/anti-CD28 expander gyöngyöket eltávolítjuk a Treg gyógyszertermékből. Ezután a Treg-eket 10 millió Treg/ml-es aliquot részekben lefagyasztják a további felhasználásig (5).

Tizenkét beteget vonnak be ebbe az egyközpontú, nyílt elrendezésű, gyorsított dóziseszkalációs vizsgálatba, köztük 10%-os betegveszteséggel, ami legalább tíz kezelt és teljes mértékben értékelhető beteget eredményez. Az autológ ex vivo kiterjesztett CD4+CD25+CD127-/lo Treg-sejtek adoptív módon kerülnek átadásra aktív betegségben szenvedő vagy stabil betegségben szenvedő, fekélyes vastagbélgyulladásban szenvedő betegeknél, a beiratkozáskor engedélyezett egyidejű terápia mellett. A maximális tolerált dózis (MTD) az a dózis, amely nem okoz egynél több dóziskorlátozó toxicitást (DLT) összesen négy kezelt betegnél az adott dózisszint mellett.

Az első beiratkozott beteg a kezdeti kezdő adagot 0,5 x 10e6 Treg/ttkg. Az örökbefogadást a következő dózisszintre emelik (1 x 10e6 Treg/kg, 2 x 10e6 Treg/kg, 5 x 10e6/Treg/kg és 10 x 10e6 Treg/ttkg), ha nem történik DLT. . Az egymást követő betegeket legalább négy hét különbséggel kezelik, hogy figyelemmel kísérjék az akut súlyos nemkívánatos eseményeket. Ha DLT-t észlelnek, három további beteg ugyanazt a dózisszintet kapja. A dózisemelés addig folytatódik, amíg a négy betegből álló csoportból legalább két beteg DLT-t nem tapasztal. Ha a négy betegből álló csoportból két beteg DLT-t tapasztal, akkor a dózis a korábban tolerált legmagasabb dózisszintre csökken. További három beteg a korábban tolerált legmagasabb adagot kapja. Ha a vizsgált dózisszinten legalább két betegnél DLT-t észlelnek, a dózis csökkentése mindaddig folytatódik, amíg kevesebb mint két beteg tapasztal DLT-t. A legmagasabb dózisszinten végzett sikeres felvételt követően további öt beteget vesznek fel a legmagasabb dózisszinten a biztonságossági értékelés kiterjesztése érdekében. Ha egyetlen vizsgált dózisszinten sem tapasztalható DLT, vagy kettőnél kevesebb DLT, akkor az MTD nem érhető el. Ebben az esetben a maximális adagolt dózist (MAD) határozzák meg.