ブラジルにおける血液透析の臨床結果 (COHEBRA): 前向きコホート研究 (COHEBRA)

HRVの評価。 ＨＲＶ測定は、心電図装置（Ｗｉｎｃａｒｄｉｏ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｍｅｄ）を使用して実施した。 レジストリは、週半ばの HD セッションの 20 分前、2 時間目、および直後に取得されました。 記録中、患者は仰臥位で通常の呼吸をしていました。 呼吸パターンが不安定な患者は、HRV 記録が延期されました。 心電図装置は R-R 間隔記録をデジタル ストレージに送信し、その後 CardioSeries@ 2.4 ソフトウェアを通じて HRV の時間領域と周波数領域で分析されました。 時間領域では、RMSSDとSDNNが取得されました。 周波数領域解析では、タコグラムが 4 ヘルツの周波数で補間され、50% の重複を持つ 256 ポイントの期間に分割されました。 これらの信号は高速フーリエ変換によるスペクトル解析に供され、スペクトルの総パワーが得られました。 交感神経の変調を表す LF 帯域は 0.02 ～ 0.15 Hz でした。 副交感神経の調節に起因する HF 帯域は 0.15 ～ 0.40 Hz でした。

ACE遺伝子タイピング。 血液サンプルを採取し、遠心分離しました。 白血球上清ペレットを抽出して保存した。 ACE 多型は、DD、ID、および II 遺伝子型について PCR によって分類されました。 DNA 増幅には次の特異的プライマーを使用しました: センス 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3= およびアンチセンス 5= GATGTGGCCATCACATTCGTAGA-3=。 これらのプライマーにより、対立遺伝子の欠失と挿入を検出することができました。 遺伝子型特定の特異性を高めるために、挿入用の特異的プライマーのペア、つまり対立遺伝子 I アンプを使用して、DD 遺伝子型を持つすべてのサンプルに対して確認的 PCR を実行しました。 これらのプライマーは以下の通りであった：センス５＝−ＴＧＧＧＡＣＣＡＣＡＧＣＧＣＣＣＧＣＣＡＣＴＡＣ−３＝およびアンチセンス５＝−ＴＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＣＣＡＴＧＣＣＣＡＴＡＡ−３＝。 温度プロトコールはサーモサイクラーで95℃で5分間開始し、その後95℃で45秒間の変性、54℃で1分間のアニーリング、72℃で各30秒間の伸長を40サイクルプログラムしました。次に、72℃で 5 分間加熱して、未完了のチェーンを終了します。

水分補給状態の評価。 患者の水分補給状態は、体組成モニター (Fresenius) を使用して研究された HD セッションの前後 (最大 20 分) に評価されました。このモニターは、多周波生体インピーダンス分光法を使用して全身の水分と細胞外水分の電気抵抗を測定します。 患者を仰臥位にし、血管アクセスの反対側の手と足に電極を取り付け、測定を行ってデジタル形式で保存し、体液管理ツールで分析しました。 結果は水分過剰（リットル）として提供され、患者の性別と年齢に応じた基準レベルを超える過剰な水分を表します。

超音波による筋肉の厚さとエコー強度 週半ばの 1 回の透析セッション後に患者を評価しました。 彼らは最初、足を約20cm離して立つように指示されました。 右大腿部の長さは、上腸骨棘から膝蓋骨近位縁まで測定されました。 左右の周囲径は大腿部の中間点で評価しました。 大腿部の前面の同じレベルで、皮膚に耐水性ペンでマークを付けました。 大腿四頭筋の厚さは、手足の長軸に垂直なこれらの点 (断面画像) 上でプローブを使用して測定され、骨表面を適切に視覚化した後に取得されました。 画像は 2 つのサイトのそれぞれのデバイスのハードディスクに保存されました。

画像は、筋肉の厚さとエコー強度 (EI) の両方について、ソフトウェア ImageJ (米国国立衛生研究所、バージョン 1.37) を使用して後で分析されました。 厚さは、長さ関数を備えた同じソフトウェアを使用して得られた、大腿骨表面の頂点のすぐ上の点と大腿直筋の表層筋膜のすぐ下の点の間の垂直距離として測定されました。 測定値はミリメートルで記録され、事後的にセンチメートルに変換されました。

EI解析は周囲の筋膜を避け、可能な限り多くの筋肉を含む記録領域を選択した上で実施した。 次に、EI は、標準ヒストグラム関数を使用したグレースケール分析で選択された領域から計算され、0 ～ 255 (0 = 黒、255 = 白) の値で表されました (Radaelli et al., 2013; Wilhelm et al., 2014) ）。

機能的能力 - 6 分間歩行テスト 機能的能力は、6 分間歩行テスト (6MWT) を使用して測定されました。 この検査は最大未満の努力で行う検査であり、手頃な価格で簡単に実施できるほか、虚弱被験者の機能的能力を表すものとして十分に確立されています。 6 分間の歩行テストは、最大酸素摂取量の測定値と良好な相関関係を示しています。 メートル単位の 6MWT の結果に 100 を掛けて、築年数の予測距離で割りました。 その結果（年齢別の予測歩行距離の割合）を分析に使用しました。

筋力評価 筋力の評価は、Crown® (Oswaldo Filizola Industry、ブラジル、サンパウロ) ダイナモメーターを使用した脚の静的筋力テストを使用して実行されました。 1 分間の間隔を置いて測定を繰り返しました。 2 つの測定値の平均を分析に使用しました。