Klinické výsledky hemodialýzy v Brazílii (COHEBRA): prospektivní kohortová studie (COHEBRA)

Hodnocení HRV. Měření HRV bylo provedeno pomocí elektrokardiografického zařízení (Wincardio@, Micromed). Registr byl pořízen 20 minut před, ve druhé hodině a bezprostředně po HD sezení uprostřed týdne. Pacienti byli během záznamu v poloze na zádech a normálně dýchali. U pacientů s nestabilním vzorem dechu byl záznam HRV odložen. Elektrokardiografický přístroj přenesl záznam intervalu R-R do digitální paměti, která byla následně analyzována v časové a frekvenční oblasti HRV pomocí softwaru CardioSeries@ 2.4. V časové oblasti byly získány RMSSD a SDNN. Při analýze frekvenční domény byl tachogram interpolován ve frekvenci 4 Hz a rozdělen do období po 256 bodech s 50% překrytím. Tyto signály byly podrobeny spektrální analýze rychlou Fourierovou transformací, aby se získala celková síla spektra. Pásmo LF, představující sympatickou modulaci, bylo mezi 0,02 a 0,15 Hz. HF pásmo, připisované parasympatické modulaci, bylo mezi 0,15 a 0,40 Hz.

Typizace genu ACE. Byly odebrány vzorky krve a centrifugovány. Peleta leukocytového supernatantu byla extrahována a skladována. ACE polymorfismus byl typován pomocí PCR pro genotypy DD, ID a II. Pro amplifikaci DNA použil následující specifické primery: sense 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3= a antisense 5= GATGTGGCCATCACATTCGTAGA-3=. Prostřednictvím těchto primerů bylo možné detekovat deleci a inzerci alely. Pro všechny vzorky s DD genotypem byla provedena potvrzovací PCR, aby se zvýšila specificita genotypizace pomocí páru specifických primerů pro inzerce, tj. zesilovače alely I. Tyto primery byly následující: sense 5=-TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC-3= a antisense 5=-TCGCCAGCCCTACCATGCCCATAA-3=. Teplotní protokol byl naprogramován v termocykleru počínaje při 95 °C po dobu 5 minut a poté 40 cyklů denaturace při 95 °C po dobu 45 s, žíhání při 54 °C po dobu 1 minuty a extenze při 72 °C po dobu 30 s. poté po 5 minutách při 72 °C pro dokončení nedokončených řetězců.

Hodnocení stavu hydratace. Stav hydratace pacienta byl hodnocen před a po (do 20 minut) studované HD relaci pomocí Body Composition Monitor (Fresenius), který využívá multifrekvenční bioimpedanční spektroskopii ke stanovení elektrických odporů celkové tělesné vody a extracelulární vody. Elektrody byly připevněny na ruce a nohy naproti cévnímu přístupu, s pacientem v poloze na zádech, a měření bylo provedeno a uloženo v digitálním formátu a analyzováno pomocí nástroje Fluid Management Tool. Výsledky byly poskytnuty jako přehydratace (v litrech), která představuje přebytek vody nad referenční hodnoty podle pohlaví a věku pacienta.

Svalová tloušťka a intenzita echa pomocí ultrazvuku Pacienti byli hodnoceni po jedné dialýze uprostřed týdne. Nejprve dostali pokyn, aby stáli s nohama a ~20 cm od sebe. Délka pravého stehna byla měřena od spina iliaca superior k proximální hranici čéšky. Pravý a levý obvod byl hodnocen ve středu stehen. Ve stejné úrovni na přední straně stehen byla kůže označena voděodolným perem. Tloušťka kvadricepsu byla měřena sondou přes tyto body, kolmo k dlouhé ose končetiny (snímek v řezu) a zachycena po správné vizualizaci povrchu kosti. Obrázek byl uložen na pevném disku zařízení pro každou ze dvou stránek.

Snímky byly později analyzovány pomocí softwaru ImageJ (National Institute of Health, USA, verze 1.37) pro tloušťku svalu i intenzitu echa (EI). Tloušťka byla měřena jako kolmá vzdálenost mezi bodem těsně nad vrcholem povrchu stehenní kosti a bodem těsně pod povrchovou fascií rectus femoris získanou pomocí stejného softwaru s funkcí délky. Měření byla zaznamenána v milimetrech a následně převedena na centimetry.

Analýza EI byla provedena po výběru oblasti záznamu, která zahrnuje co nejvíce svalů a přitom se vyhýbá okolní fascii. EI byla poté vypočtena z vybrané oblasti pomocí analýzy ve stupních šedi pomocí standardní funkce histogramu a vyjádřena v hodnotách mezi 0 a 255 (0 = černá; 255 = bílá) (Radaelli et al., 2013; Wilhelm et al., 2014 ).

Funkční kapacita - šestiminutový test chůze Funkční kapacita byla měřena pomocí testu 6minutové chůze (6MWT). Tento test je testem submaximálního úsilí, cenově dostupným a snadno proveditelným, navíc dobře zavedený jako zástupce funkční kapacity u křehkých subjektů. Test 6minutové chůze ukazuje dobrou korelaci s maximální mírou příjmu kyslíku. Výsledek 6MWT v metrech byl vynásoben 100 a vydělen předpokládanou vzdáleností pro věk. Výsledek (procento předpokládané vzdálenosti ušlé podle věku) byl použit v analýze.

Hodnocení svalové síly Hodnocení svalové síly bylo provedeno pomocí statického testu síly nohou pomocí dynamometru Crown® (Oswaldo Filizola Industry, São Paulo, Brazílie). Měření bylo opakováno po 1 minutovém intervalu. Při analýze byl použit průměr obou měření.