Hemodialyysin kliiniset tulokset Brasiliassa (COHEBRA): tuleva kohorttitutkimus (COHEBRA)

HRV:n arviointi. HRV-mittaus suoritettiin käyttämällä elektrokardiografista laitetta (Wincardio@, Micromed). Rekisteri hankittiin 20 minuuttia ennen HD-istuntoa, toisella tunnilla ja heti sen jälkeen. Potilaat olivat selällään ja hengittivät normaalisti tallennuksen aikana. Potilaiden, joilla oli epävakaa hengitys, HRV-mittaus lykättiin. Elektrokardiografinen laite välitti R-R-välitietueen digitaaliseen tallennustilaan, joka analysoitiin myöhemmin HRV:n aika- ja taajuusalueilta CardioSeries@ 2.4 -ohjelmiston avulla. Aika-alueella hankittiin RMSSD ja SDNN. Taajuusalueen analyysissä takogrammi interpoloitiin 4 hertsin taajuudella ja jaettiin 256 pisteen jaksoiksi 50 % päällekkäisyydellä. Nämä signaalit alistettiin spektrianalyysiin nopealla Fourier-muunnolla spektrin kokonaistehon saamiseksi. LF-kaista, joka edustaa sympaattista modulaatiota, oli välillä 0,02 - 0,15 Hz. Parasympaattisesta modulaatiosta johtuva HF-kaista oli välillä 0,15 - 0,40 Hz.

ACE-geenin tyypitys. Verinäytteet otettiin ja sentrifugoitiin. Leukosyyttisupernatanttipelletti uutettiin ja varastoitiin. ACE-polymorfismi tyypitettiin PCR:llä DD-, ID- ja II-genotyypeille. Siinä käytettiin seuraavia spesifisiä alukkeita DNA:n monistamiseen: sense 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCTCT-3= ja antisense 5= GATGTGGCCATCACATTCGTAGA-3=. Näiden alukkeiden avulla oli mahdollista havaita alleelin deleetio ja insertio. Kaikille näytteille, joilla oli DD-genotyyppi, tehtiin vahvistava PCR genotyypin spesifisyyden lisäämiseksi käyttämällä paria spesifisiä alukkeita insertioita varten, ts. alleeli I -vahvistin. Nämä alukkeet olivat seuraavat: sense 5=-TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC-3= ja antisense 5=-TCGCCAGCCCTACCATGCCCATAA-3=. Lämpötilaprotokolla ohjelmoitiin lämpösyklilaitteessa alkaen 95 °C:ssa 5 minuutin ajan ja sitten 40 denaturaatiosykliä 95 °C:ssa 45 sekunnin ajan, lämpökäsittelyä 54 °C:ssa 1 minuutin ajan ja pidentämistä 72 °C:ssa 30 sekunnin ajan. sitten 5 minuuttia 72 °C:ssa keskeneräisten ketjujen viimeistelemiseksi.

Nesteytystilan arviointi. Potilaan nesteytystila arvioitiin ennen ja jälkeen (enintään 20 min) tutkittua HD-istuntoa käyttäen Body Composition Monitor -laitetta (Fresenius), joka käyttää monitaajuista bioimpedanssispektroskopiaa kehon kokonaisveden ja solunulkoisen veden sähkövastuksen määrittämiseen. Elektrodit kiinnitettiin käsiin ja jalkoihin verisuonten pääsyä vastapäätä potilaan ollessa makuuasennossa, ja mittaus tehtiin ja tallennettiin digitaaliseen muotoon ja analysoitiin Fluid Management Tool -työkalulla. Tulokset annettiin ylihydraationa (litroina), joka edustaa ylimääräistä vettä potilaan sukupuolen ja iän mukaan.

Lihasten paksuus ja kaiun intensiteetti ultraäänellä Potilaat arvioitiin yhden keskiviikon dialyysikerran jälkeen. Aluksi heitä käskettiin seisomaan jalat ja ~20 cm toisistaan. Oikean reiden pituus mitattiin suoliluun ylärangan yläpuolelta polvilumpion proksimaaliseen reunaan. Oikean ja vasemman puolen ympärysmitat arvioitiin reisien keskipisteestä. Samalle tasolle reisien etupuolella iho merkittiin vedenkestävällä kynällä. Nelipäisen reisilihaksen paksuus mitattiin koettimella näiden pisteiden yli kohtisuorassa raajan pitkää akselia vastaan ​​(poikkileikkauskuva) ja otettiin kiinni luun pinnan asianmukaisen visualisoinnin jälkeen. Kuva tallennettiin laitteen kiintolevylle kummallekin sivustolle.

Kuvat analysoitiin myöhemmin ImageJ-ohjelmistolla (National Institute of Health, USA, versio 1.37) sekä lihaksen paksuuden että kaiun intensiteetin (EI) suhteen. Paksuus mitattiin kohtisuorana etäisyydenä juuri reisiluun pinnan huipun yläpuolella olevan pisteen ja juuri suoran femoriksen pinnallisen faskian alapuolella olevan pisteen välillä, joka saatiin käyttämällä samaa ohjelmistoa pituusfunktiolla. Mittaukset rekisteröitiin millimetreinä ja muunnettiin jälkikäteen senttimetreiksi.

EI-analyysi suoritettiin sen jälkeen, kun oli valittu ennätysalue, joka sisältää mahdollisimman paljon lihaksia, samalla kun vältettiin ympäröivää fasciaa. EI laskettiin sitten valitulta alueelta harmaasävyanalyysillä käyttäen standardia histogrammifunktiota ja ilmaistiin arvoina välillä 0 - 255 (0 = musta; 255 = valkoinen) (Radaelli ym., 2013; Wilhelm et al., 2014) ).

Toiminnallinen kapasiteetti - kuuden minuutin kävelytesti Toiminnallinen kapasiteetti mitattiin 6 minuutin kävelytestillä (6MWT). Tämä testi on submaksimaalisen rasituksen testi, edullinen ja helppo suorittaa, sen lisäksi, että se edustaa hyvin heikkojen koehenkilöiden toimintakykyä. 6 minuutin kävelytesti osoittaa hyvän korrelaation maksimaalisen hapenottokyvyn kanssa. Tulos 6MWT metreinä kerrottiin 100:lla ja jaettiin iän ennustetulla matkalla. Tulosta (prosenttiosuus ennustetusta kävelymatkasta iän mukaan) käytettiin analysoinnissa.

Lihasvoiman arviointi Lihasvoiman arviointi suoritettiin jalkojen staattisen voiman testillä käyttäen Crown® (Oswaldo Filizola Industry, São Paulo, Brasilia) dynamometriä. Mittaus toistettiin 1 minuutin välein. Analyysissä käytettiin näiden kahden mittauksen keskiarvoa.