Wyniki kliniczne hemodializy w Brazylii (COHEBRA): prospektywne badanie kohortowe (COHEBRA)

Ocena HRV. Pomiar HRV przeprowadzono za pomocą aparatu elektrokardiograficznego (Wincardio@, Micromed). Rejestr został uzyskany na 20 minut przed, w drugiej godzinie i bezpośrednio po sesji HD w środku tygodnia. Pacjenci byli w pozycji leżącej i oddychali normalnie podczas rejestracji. Pacjenci z niestabilnymi wzorcami oddechu mieli odroczony zapis HRV. Urządzenie elektrokardiograficzne przesłało zapis odstępu RR do pamięci cyfrowej, który następnie analizowano w dziedzinie czasu i częstotliwości HRV za pomocą oprogramowania CardioSeries@ 2.4. W domenie czasu uzyskano wartości RMSSD i SDNN. W analizie w dziedzinie częstotliwości tachogram był interpolowany z częstotliwością 4 Hz i podzielony na okresy po 256 punktów z 50% nakładaniem się. Sygnały te poddano analizie spektralnej za pomocą szybkiej transformacji Fouriera w celu uzyskania całkowitej mocy widma. Pasmo LF reprezentujące modulację współczulną mieściło się w zakresie od 0,02 do 0,15 Hz. Pasmo HF, przypisywane modulacji przywspółczulnej, wynosiło od 0,15 do 0,40 Hz.

Typowanie genu ACE. Pobrano próbki krwi i odwirowano. Osad supernatantu leukocytów ekstrahowano i przechowywano. Polimorfizm ACE typowano metodą PCR dla genotypów DD, ID i II. Zastosowano następujące specyficzne startery do amplifikacji DNA: sensowny 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3= i antysensowny 5= GATGTGGCCATCACATTCGTAGA-3=. Dzięki tym starterom możliwe było wykrycie delecji i insercji alleli. Dla wszystkich próbek z genotypem DD przeprowadzono potwierdzający PCR w celu zwiększenia specyficzności genotypowania przy użyciu pary specyficznych starterów do insercji, tj. wzmacniacza allelu I. Te startery były następujące: sensowny 5=-TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC-3= i antysensowny 5=-TCGCCAGCCCTACCATGCCCATAA-3=. Protokół temperaturowy zaprogramowano w termocyklerze rozpoczynając od 95°C przez 5 min, a następnie 40 cykli denaturacji w 95°C przez 45 s, hybrydyzacji w 54°C przez 1 min i wydłużania w 72°C przez 30 s każdy i następnie przez 5 minut w 72°C, aby zakończyć niedokończone łańcuchy.

Ocena stanu nawodnienia. Stan nawodnienia pacjenta oceniano przed i po (do 20 min) badanej sesji HD za pomocą monitora składu ciała (Fresenius), który wykorzystuje wieloczęstotliwościową spektroskopię bioimpedancyjną do określenia oporów elektrycznych całej wody ustrojowej i wody pozakomórkowej. Elektrody przymocowano do dłoni i stóp naprzeciw dostępu naczyniowego, gdy pacjent leżał na plecach, a pomiar wykonano i zapisano w formacie cyfrowym oraz przeanalizowano za pomocą narzędzia do zarządzania płynami. Wyniki podano jako przewodnienie (w litrach), które reprezentuje nadmiar wody powyżej poziomów referencyjnych w zależności od płci i wieku pacjenta.

Grubość mięśni i intensywność echa w badaniu ultrasonograficznym Pacjenci byli oceniani po jednej sesji dializy w środku tygodnia. Początkowo poinstruowano ich, aby stali z nogami oddalonymi od siebie o około 20 cm. Długość prawego uda mierzono od kolca biodrowego górnego do bliższego brzegu rzepki. Obwody prawego i lewego mierzono w połowie uda. Na tym samym poziomie na przedniej powierzchni ud zaznaczono skórę wodoodpornym pisakiem. Grubość mięśnia czworogłowego mierzono sondą nad tymi punktami, prostopadle do osi długiej kończyny (zdjęcie przekroju) i rejestrowano po odpowiednim uwidocznieniu powierzchni kości. Obraz był przechowywany na dysku twardym urządzenia dla każdej z dwóch lokalizacji.

Obrazy zostały później przeanalizowane przy użyciu oprogramowania ImageJ (National Institute of Health, USA, wersja 1.37) zarówno pod kątem grubości mięśni, jak i intensywności echa (EI). Grubość mierzono jako prostopadłą odległość między punktem tuż nad wierzchołkiem powierzchni kości udowej a punktem tuż poniżej powięzi powierzchownej mięśnia prostego uda, uzyskaną przy użyciu tego samego oprogramowania z funkcją długości. Pomiary rejestrowano w milimetrach i później przeliczano na centymetry.

Analizę EI przeprowadzono po wybraniu rekordowego regionu, który obejmuje jak najwięcej mięśni, unikając otaczającej powięzi. Następnie EI obliczono z wybranego regionu za pomocą analizy w skali szarości przy użyciu standardowej funkcji histogramu i wyrażono w wartościach od 0 do 255 (0 = czarny; 255 = biały) (Radaelli i in., 2013; Wilhelm i in., 2014 ).

Wydolność funkcjonalna - 6-minutowy test marszu Wydolność funkcjonalną mierzono za pomocą 6-minutowego testu marszu (6MWT). Ten test jest testem submaksymalnego wysiłku, niedrogim i łatwym do wykonania, a ponadto jest dobrze znany jako reprezentatywny dla wydolności funkcjonalnej osób słabych. Test 6-minutowego marszu wykazuje dobrą korelację z pomiarem maksymalnego poboru tlenu. Wynik 6MWT w metrach pomnożono przez 100 i podzielono przez przewidywany dla wieku dystans. Wynik (procent przewidywanej przebytej odległości według wieku) wykorzystano w analizie.

Ocena siły mięśniowej Ocena siły mięśniowej została przeprowadzona za pomocą statycznego testu siły nóg, przy użyciu dynamometru firmy Crown® (Oswaldo Filizola Industry, São Paulo, Brazylia). Pomiar powtórzono po 1-minutowej przerwie. W analizie wykorzystano średnią z dwóch pomiarów.