Клинические результаты гемодиализа в Бразилии (COHEBRA): проспективное когортное исследование (COHEBRA)

Оценка ВСР. Измерение ВСР проводили с помощью электрокардиографического устройства (Wincardio@, Micromed). Реестр был получен за 20 минут до, во второй час и сразу после сеанса HD в середине недели. Во время записи пациенты находились в положении лежа на спине и дышали нормально. Пациентам с неустойчивым паттерном дыхания регистрацию ВСР откладывали. Электрокардиограф передал запись интервала R-R в цифровую память, которая впоследствии была проанализирована во временной и частотной областях ВСР с помощью программного обеспечения CardioSeries@ 2.4. Во временной области были получены RMSSD и SDNN. При частотном анализе тахограмма была интерполирована на частоте 4 Гц и разделена на периоды по 256 точек с 50% перекрытием. Эти сигналы были подвергнуты спектральному анализу с помощью быстрого преобразования Фурье для получения полной мощности спектра. Полоса НЧ, представляющая симпатическую модуляцию, находилась в диапазоне от 0,02 до 0,15 Гц. Диапазон ВЧ, связанный с парасимпатической модуляцией, находился в пределах от 0,15 до 0,40 Гц.

Типирование гена ACE. Пробы крови брали и центрифугировали. Осадок супернатанта лейкоцитов экстрагировали и хранили. Полиморфизм ACE типировали методом ПЦР для генотипов DD, ID и II. Для амплификации ДНК использовались следующие специфические праймеры: смысловой 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3= и антисмысловой 5=GATGTGGCCATCACATTCGTAGA-3=. С помощью этих праймеров можно было обнаружить делецию и вставку аллеля. Для всех образцов с генотипом DD была проведена подтверждающая ПЦР для повышения специфичности генотипирования с использованием пары специфических праймеров для вставок – амплификатора аллеля I. Эти праймеры были следующими: смысловой 5=-TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC-3= и антисмысловой 5=-TCGCCAGCCCTACCATGCCCATAA-3=. Температурный протокол был запрограммирован в термоциклере, начиная с 95°С в течение 5 мин, затем 40 циклов денатурации при 95°С в течение 45 с, отжига при 54°С в течение 1 мин и удлинения при 72°С в течение 30 с каждый и затем через 5 мин при 72°С доработать незавершенные цепи.

Оценка состояния гидратации. Статус гидратации пациента оценивали до и после (до 20 мин) изучаемого сеанса ГД с помощью монитора состава тела (Fresenius), использующего многочастотную биоимпедансную спектроскопию для определения электрических сопротивлений общей воды организма и внеклеточной воды. Электроды были прикреплены к руке и ноге напротив сосудистого доступа, пациент находился в положении лежа на спине, а измерение было выполнено и сохранено в цифровом формате и проанализировано с помощью Fluid Management Tool. Результаты были представлены в виде гипергидратации (в литрах), которая представляет собой избыток воды над контрольными уровнями в зависимости от пола и возраста пациента.

Толщина мышц и интенсивность эха по данным УЗИ. Пациенты оценивались после одного сеанса диализа в середине недели. Сначала им было приказано встать, расставив ноги примерно на 20 см друг от друга. Длину правого бедра измеряли от верхней подвздошной ости до проксимального края надколенника. Окружности правой и левой стороны оценивались по средней точке бедер. На этом же уровне на передней поверхности бедер водостойкой ручкой была отмечена кожа. Толщина квадрицепса измерялась датчиком в этих точках, перпендикулярно длинной оси конечности (изображение в поперечном сечении), и записывалась после надлежащей визуализации поверхности кости. Изображение сохранялось на жестком диске устройства для каждого из двух сайтов.

Изображения были проанализированы позже с использованием программного обеспечения ImageJ (Национальный институт здравоохранения, США, версия 1.37) как для толщины мышц, так и для интенсивности эха (EI). Толщина измерялась как перпендикулярное расстояние между точкой чуть выше вершины поверхности бедренной кости и точкой чуть ниже поверхностной фасции прямой мышцы бедра, полученное с использованием того же программного обеспечения с функцией длины. Измерения регистрировались в миллиметрах и затем конвертировались в сантиметры.

Анализ EI был выполнен после выбора области записи, которая включает как можно больше мышц, избегая окружающей фасции. Затем был рассчитан EI для выбранной области с помощью анализа в градациях серого с использованием стандартной функции гистограммы и выражен в значениях от 0 до 255 (0 = черный; 255 = белый) (Radaelli et al., 2013; Wilhelm et al., 2014). ).

Функциональная способность - тест шестиминутной ходьбы. Функциональную способность измеряли с помощью теста шестиминутной ходьбы (6MWT). Этот тест представляет собой тест субмаксимальных усилий, доступный и простой в выполнении, в дополнение к тому, что он хорошо зарекомендовал себя как показатель функциональных возможностей у ослабленных субъектов. Тест 6-минутной ходьбы показывает хорошую корреляцию с показателем максимального потребления кислорода. Результат 6MWT в метрах был умножен на 100 и разделен на предсказанное расстояние для возраста. Результат (процент прогнозируемого расстояния, пройденного по возрасту) использовался в анализе.

Оценка мышечной силы Оценка мышечной силы проводилась с помощью теста статической силы ног с использованием динамометра Crown® (Oswaldo Filizola Industry, Сан-Паулу, Бразилия). Измерение повторяли через 1-минутный интервал. В анализе использовалось среднее значение двух измерений.