Klinische Ergebnisse der Hämodialyse in Brasilien (COHEBRA): eine prospektive Kohortenstudie (COHEBRA)

Auswertung der HRV. Die HRV-Messung wurde mit einem Elektrokardiographiegerät (Wincardio@, Micromed) durchgeführt. Das Register wurde 20 Minuten vor, in der zweiten Stunde und unmittelbar nach einer HD-Sitzung unter der Woche erfasst. Die Patienten befanden sich während der Aufzeichnung in Rückenlage und atmeten normal. Bei Patienten mit instabilen Atemmustern wurde die HRV-Aufzeichnung verschoben. Das Elektrokardiographiegerät übermittelte die R-R-Intervallaufzeichnung an einen digitalen Speicher, der anschließend im Zeit- und Frequenzbereich der HRV mit der Software CardioSeries@ 2.4 analysiert wurde. Im Zeitbereich wurden RMSSD und SDNN erfasst. Bei der Frequenzbereichsanalyse wurde ein Tachogramm mit einer Frequenz von 4 Hertz interpoliert und in Perioden von 256 Punkten mit 50 % Überlappung unterteilt. Diese Signale wurden einer Spektralanalyse durch schnelle Fourier-Transformation unterzogen, um die Gesamtleistung des Spektrums zu erhalten. Das LF-Band, das die sympathische Modulation darstellt, lag zwischen 0,02 und 0,15 Hz. Das HF-Band, das der parasympathischen Modulation zugeschrieben wird, lag zwischen 0,15 und 0,40 Hz.

ACE-Gentypisierung. Es wurden Blutproben entnommen und zentrifugiert. Das Leukozytenüberstandspellet wurde extrahiert und gelagert. Der ACE-Polymorphismus wurde durch PCR für die Genotypen DD, ID und II typisiert. Es wurden die folgenden spezifischen Primer für die DNA-Amplifikation verwendet: sense 5=-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3= und antisense 5= GATGTGGCCATCACATTCGTAGA- 3=. Durch diese Primer war es möglich, Allel-Deletion und -Insertion zu erkennen. Für alle Proben mit dem DD-Genotyp wurde eine bestätigende PCR durchgeführt, um die Spezifität der Genotypisierung unter Verwendung eines Paars spezifischer Primer für Insertionen, d. h. eines Allel-I-Verstärkers, zu erhöhen. Diese Primer waren wie folgt: Sense 5=-TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC-3= und Antisense 5=-TCGCCAGCCCTACCATGCCCATAA-3=. Das Temperaturprotokoll wurde im Thermocycler programmiert, beginnend bei 95 °C für 5 Minuten und dann 40 Denaturierungszyklen bei 95 °C für 45 Sekunden, Annealing bei 54 °C für 1 Minute und Verlängerung bei 72 °C für jeweils 30 Sekunden dann bei 5 Minuten bei 72°C, um unvollständige Ketten zu beenden.

Beurteilung des Flüssigkeitsstatus. Der Flüssigkeitsstatus des Patienten wurde vor und nach (bis zu 20 Minuten) der untersuchten HD-Sitzung mithilfe eines Körperzusammensetzungsmonitors (Fresenius) bewertet, der Multifrequenz-Bioimpedanzspektroskopie verwendet, um die elektrischen Widerstände des gesamten Körperwassers und des extrazellulären Wassers zu bestimmen. Elektroden wurden an Händen und Füßen gegenüber dem Gefäßzugang angebracht, wobei sich der Patient in Rückenlage befand. Die Messung wurde durchgeführt, in einem digitalen Format gespeichert und mit dem Fluid Management Tool analysiert. Die Ergebnisse wurden als Überwässerung (in Litern) angegeben, die den Wasserüberschuss über den Referenzwerten entsprechend dem Geschlecht und Alter des Patienten darstellt.

Muskeldicke und Echointensität mittels Ultraschall. Die Patienten wurden nach einer Dialysesitzung unter der Woche untersucht. Zunächst wurden sie angewiesen, mit den Beinen und einem Abstand von ca. 20 cm zu stehen. Die Länge des rechten Oberschenkels wurde von der Spina iliaca superior bis zum proximalen Rand der Patella gemessen. Der rechte und linke Umfang wurde in der Mitte der Oberschenkel gemessen. Auf der Vorderseite der Oberschenkel wurde auf gleicher Höhe die Haut mit einem wasserfesten Stift markiert. Die Quadrizepsdicke wurde mit der Sonde über diesen Punkten senkrecht zur Längsachse der Extremität gemessen (Querschnittsbild) und nach ordnungsgemäßer Visualisierung der Knochenoberfläche erfasst. Das Bild wurde für jeden der beiden Standorte auf der Festplatte des Geräts gespeichert.

Die Bilder wurden später mit der Software ImageJ (National Institute of Health, USA, Version 1.37) sowohl auf Muskeldicke als auch auf Echointensität (EI) analysiert. Die Dicke wurde als senkrechter Abstand zwischen dem Punkt direkt über der Spitze der Femuroberfläche und dem Punkt direkt unter der oberflächlichen Faszie des Rectus femoris gemessen, der mit derselben Software mit der Längenfunktion ermittelt wurde. Die Maße wurden in Millimetern erfasst und anschließend in Zentimeter umgerechnet.

Die EI-Analyse wurde nach der Auswahl einer Aufnahmeregion durchgeführt, die möglichst viele Muskeln umfasst und gleichzeitig umgebende Faszien vermeidet. Der EI wurde dann aus der ausgewählten Region mit Graustufenanalyse unter Verwendung der Standardhistogrammfunktion berechnet und in Werten zwischen 0 und 255 (0 = schwarz; 255 = weiß) ausgedrückt (Radaelli et al., 2013; Wilhelm et al., 2014). ).

Funktionelle Kapazität – Sechs-Minuten-Gehtest Die Funktionsfähigkeit wurde mithilfe des 6-Minuten-Gehtests (6MWT) gemessen. Bei diesem Test handelt es sich um einen Test mit submaximaler Anstrengung, der kostengünstig und einfach durchzuführen ist und sich darüber hinaus als repräsentativ für die Funktionsfähigkeit gebrechlicher Probanden etabliert hat. Der 6-Minuten-Gehtest zeigt eine gute Korrelation mit der Messung der maximalen Sauerstoffaufnahme. Das Ergebnis der 6MWT in Metern wurde mit 100 multipliziert und durch die vorhergesagte Distanz für das Alter dividiert. Das Ergebnis (Prozentsatz der vorhergesagten zurückgelegten Strecke nach Alter) wurde in der Analyse verwendet.

Beurteilung der Muskelkraft Die Beurteilung der Muskelkraft erfolgte mithilfe des statischen Krafttests der Beine unter Verwendung eines Crown®-Dynamometers (Oswaldo Filizola Industry, São Paulo, Brasilien). Die Messung wurde im Abstand von 1 Minute wiederholt. Für die Analyse wurde der Mittelwert der beiden Messungen verwendet.