COVID-19 の臨床的進化と抗 SARS-CoV-2 ワクチンの有効性における BCG ワクチンの役割 (SARS-CoV-2)

目的- BCG とプラセボを比較する 2 群の臨床試験を通じて、COVID-19 の重症型に対する BCG ワクチンの役割と、抗 SARS-CoV-2 ワクチンの有効性を改善する役割を評価すること。 具体的には：

1. BCG ワクチンが非特異的免疫応答 (訓練免疫) を刺激できるかどうかを評価する
2. BCG が SARS-CoV-2 感染から保護できるかどうかを検証する
3. BCG が SARS-CoV-2 感染者を病気から保護できるかどうかを評価する
4. BCG が COVID-19 の被験者をその重症型から保護できるかどうかを評価する
5. BCGが抗SARS-CoV-2ワクチンの投与の有効性を支持できるかどうかを評価する
6. 成人のBCG再接種が予期しない副作用を引き起こすかどうかを知る

方法論:

2.1 研究モデル: 二群臨床試験 - 介入 (BCG) 対 プラセボ

2.2 研究対象集団: まだ SARS-CoV-2 に感染していない、または COVID-19 のワクチン接種を受けていないボランティアで、集団と頻繁に接触する必要不可欠なサービス ワーカーになる可能性がある人: 医療施設の労働者、その他の理由で公衆衛生ネットワークのユーザー重病の方、警察官、薬局、スーパー、商店などの従業員

サンプリング：さまざまな募集サイトの適格な集団におけるSARS-CoV-2感染の実際の有病率は不明であるため、50％の有病率が考慮され（最大のサンプルサイズを提供します）、BCG後の有病率は減少すると推定されましたその有効性が実証される場合、少なくとも10％。 したがって、385人の被験者のサンプルが見つかりました。 損失を考慮して、最低 400 人の参加者が募集され、各グループに少なくとも 200 人が参加します。

2.3.包含基準:

• SARS-Cov-2 に感染したことがない - 迅速検査 (即時) および血清学検査 (後で確認) による臨床歴および抗 SARS-CoV-2 免疫グロブリン IgM/IgG 抗体の欠如
• COVID-19 の予防接種を受けていない
• 18歳以上であること

2.4. 除外基準: • BCG の予防接種を受けてから 6 か月以内

・過去にBCGワクチンを2回以上接種したことがある

• BCGの古典的な禁忌 - 妊娠、授乳、急性熱性疾患、成分の1つに対する重度のアレルギー、先月の他の生ワクチンによる予防接種（麻疹、黄熱病、帯状疱疹）、あらゆる原因による免疫抑制（先天性、病気） 、コルチコステロイドまたは免疫抑制剤の使用)
• 結核にかかった、または結核患者と接触したことがある
• -現在の急性疾患の兆候があるか、15日未満の深刻な病気にかかった
• ワクチン接種部位（右三角筋）に皮膚病変を呈する
• 製品に対する重度のアレルギー反応の病歴：蕁麻疹、声門浮腫、血管性浮腫、呼吸不全、気管支痙攣
• 重篤な自己免疫疾患の病歴：全身性エリテマトーデス、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、溶血性貧血、強直性脊椎炎、天疱瘡など
• 何らかの理由による免疫不全：先天性、病気、コルチコステロイドまたは免疫抑制剤の使用
• 重度の COVID-19 のリスク併存疾患の提示: コントロール不良の高血圧、代償不全心疾患 (慢性、先天性または虚血性)、肺疾患 (慢性肺炎、コントロール不良の喘息、慢性間質性肺炎など)、進行性慢性腎疾患（透析の使用）、移植（固形臓器または骨髄の）、コントロール不良の糖尿病

2.5。 参加者の募集 ボランティアは、ブラジルの 3 つの異なる州 - ミナス ジェライス州 (ジュイス デ フォラ市)、アマゾナス州 (マナウス市)、パラ州 (ベレン市) で募集されます。 彼らのアプローチは、年齢別の抗 COVID-19 ワクチン接種の地域のダイナミクスを考慮して、各募集サイトの実行可能性とロジスティクスに基づいています。 選択基準を満たし、研究への参加を受け入れる人は、インフォームド コンセント フォーム (ICF) に署名する必要があります。 抽選により、参加者はグループ 1 または 2 に割り当てられ、プラセボ (BCG 溶媒) または BCG ワクチンを受け取ります。

2.6. 参加者の参加とフォローアップ 2.6.a -- 重症型 COVID-19 に対する BCG の評価:

被験者は、SARS-CoV-2感染の存在と進化を評価するために、D0（包含および介入の日）、D60、D120、およびD180、ならびに症状発症の任意の日に連絡されます。 標準化されたアンケートが開発され、タブレットはREDCapソフトウェアでプログラムされ、訪問ごとにインタビューを実施して、人口統計データ、過去および現在の病気、予防接種歴、リスク活動、およびCOVID-19を示唆する症状を調査します。 参加者は、疑わしい症状が現れたらすぐにチームに知らせるように指示されます。 予定された各訪問で、参加者は以下の目的で静脈採血も行います。

- D0 で - すべての被験者における迅速検査による IgM/IgG 抗体の検索および血清学的検査 (酵素免疫測定法 ELISA) による IgG および炎症誘発性サイトカインの検索 腫瘍壊死因子 α (TNF-α)、インターフェロン γ (IFN-γ) 、インターロイキン（IL）1β、IL-4、IL-6、およびIL-10は、各グループの50人の参加者でした。

- D60 で - すべての参加者の ELISA による抗 SARS-CoV-2 IgG の検索とペアサイトカイン検索 (D0 でそれを行った参加者)。

• D120 および D180 について - ELISA による抗 SARS-CoV-2 IgG の検索。
• 症状がある場合 - 地域の医療ネットワークにおける SARS-CoV-2 感染の診断確認を導き、臨床的進展を監視するための毎日のフォローアップ。 さらに、患者は毎日の症状の表に記入し、次回の予定された訪問時に収集されます。 入院の場合は、カルテから臨床経過のデータを取得します。

2.6.b -- ワクチンの抗 SARS-CoV-2 有効性を改善する BCG の能力の評価:

参加者がcovid-19の予防接種を受けた瞬間から、訪問は次のように予防接種のスケジュールに合わせて調整されます。

- VD - ワクチンの初回接種時

- P1 - 初回投与から 20 日後

- P2 - 2回目の投与から少なくとも30日後 これらすべての機会に、抗SARS-CoV-2中和抗体がすべての参加者でテストされます。

2.7. 介入 BCGまたはプラセボグループへの組み入れは抽選で行われ、その知識は主な研究者と介入を行う専門家に限定されます。 実験室でのテストを実施する参加者と技術者は、それを知りません。

- BCG グループ - インド血清研究所の BCG ワクチン (生弱毒化マイコバクテリウム ボビス (バチルス カルメット-ゲラン)) 右三角筋の遠位挿入部に 0.1 ml の皮内投与。

BCGの副作用としては、その部位の圧痛、腫れ、発赤した丘疹があり、直径1cmほどの液状潰瘍となり、2、3ヶ月でほぼ必ず同じ大きさの傷跡が残ります。 その他の可能性のある副作用は、頭痛、倦怠感、発熱、1cmを超える潰瘍、治癒の遅延（最大6か月）、リンパ節の拡大です。 まれな深刻な合併症は、ワクチンの皮下沈着による投与の誤りによる局所または腋窩リンパ節の膿瘍です。 そのため、BCG は厳格な訓練を受けた専門家によって管理されます。 免疫無防備状態の個人に臓器損傷を引き起こすワクチン菌の拡散への言及もあります (除外基準)。 重度の反応を示した被験者は、適切なフォローアップと治療を受けます。

-プラセボ群-BCGワクチン溶媒0.1mlの皮内適用。

2.8。 感染の検出 現在の SARS-Cov-2 感染は、IgM/IgG 抗体を検出するための迅速な検査 (除外基準として D0 のみ) と、訪問ごとに IgG 抗体を検出するための血清学によって識別されます。 フォローアップ中の IgG の陽性により、調査員はフォローアップ中の訪問の間に感染した参加者を特定します。

2.9。 臨床的進展 - 症状のある感染者の臨床状態は、次のように定義されます。

• 軽度の状態 (インフルエンザ症候群-SG) - 咳や喉の痛み、嗅覚や味覚の喪失を伴う発熱、および次の症状の少なくとも 1 つ: 頭痛、筋肉痛、または関節痛。 あまり一般的ではない症状としては、体の痛み、鼻づまり、下痢、腹痛、発疹、指やつま先の変色、結膜炎などがあります。
• 中等度の状態 - わずかな努力での疲労またはわずかな呼吸困難、および/または 4 日間の発病後の基礎症状の強度の増加、および/または 4 日間の発病後の基礎症状の数の増加、および/または症状の持続一週間以上。
• 重篤な状態 (重症急性呼吸器症候群) - 呼吸器系の欠損に関連する SG (呼吸困難、チアノーゼ、酸素飽和度 <95%、頻呼吸、肺胞ガス中の酸素分圧/吸気酸素分圧 (PaO2/FiO2) <300)および/または肺浸潤が 24 ～ 48 時間で 50% を超える場合)、心血管系の障害 (低血圧、脈拍の弱さ)、または精神状態の変化。
• 重大な状態 - 呼吸不全、敗血症性ショックおよび/または多臓器不全、発話または運動の喪失。

2.10. 体液性応答プロファイルの評価 D0 で、選択基準として、抗 SARS-CoV-2 IgG/IgM 抗体 (TR COVID-19 IgM/IgG "BioManguinhos-Fiocruz") を 100% の特異性で検出するための迅速なテストIgM および IgG と、IgM では 85.7% (4 ～ 7 日) および 90% (> 8 日) の感度、IgG では 92.8% (4 ～ 7 日) および 90% (>8 日) の感度。 また、D0 およびすべての来院日に、症状がある場合は、捕捉抗原として Spike タンパク質の S1 サブドメインを使用した市販の酵素免疫測定法 (組換え ELISA - 「Euroimmun Brasil Medicina Diagnostica」) によって IgG が検出されます。訪問の間に発生した感染を検出します (セロコンバージョン)。

抗 SARS-CoV-2 ワクチンの有効性を評価するために、抗 SARS-CoV-2 中和抗体は、定性的および半定量的 (UI/ml の力価) の結果。 この調査は、ワクチンの 1 回目の接種から 20 日後、2 回目の接種から少なくとも 1 か月後に行われます。

2.11. サイトカイン分析 - 炎症性サイトカイン IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α (R&D Systems) および IFN-γ (「サンキン」) を D0 および D60 で測定して有効性を評価します。非特異的免疫応答の刺激におけるBCGの。

2.12. 倫理的な問題 - このプロジェクトは、人間を対象とした研究における倫理に関する国家委員会 (CONEP) によって承認されました。 参加を希望するボランティアは、インフォームド コンセント フォームに署名しました。 独立したデータおよび安全性監視委員会 (IDSMC) は、研究が倫理的に非暴力的であり、データが信頼できるものであることを確認するために研究を監視し、必要に応じて研究の変更または中止を推奨する場合があります。 Research Electronic Data Capture-REDCap ソフトウェアを介して、データ管理者はいつでも研究の進行状況に関する情報を提供します。 試験の結果は、参加者に提供されます。 BCGに対する激しい反応は、研究チームから適切なケアを受け、24時間以内にCONEPとIDSMCに通知されます. 参加者は、COVID-19 ワクチンが入手可能になった時点で接種を受けることが推奨されます。

2.14. 結果の統計分析 - 社会科学向け統計パッケージ (IBM SPSS v.22) および Stata (v.14.0) プログラムを通じて、結果はグループ間で比較分析され、失敗として定義されます。 分析は、カプラン・マイヤー法を使用して、治療目的の集団（総募集人）およびプロトコルごとの集団（完全なフォローアップ付き）に対して実行されます。 比率は 95% 信頼区間で計算され、Chi2 とフィッシャーの正確確率検定によって比較されます。 生存曲線は、ログランク検定によって比較されます。 ロジスティック回帰は、血清学的反応性などのバイナリ従属変数を説明できる一連の独立変数を識別します。