BCG-vaccinens rolle i den kliniske udvikling af COVID-19 og i effektiviteten af ​​anti-SARS-CoV-2-vacciner (SARS-CoV-2)

MÅL- At evaluere rollen af ​​BCG-vaccinen mod den alvorlige form for COVID-19 og i at forbedre effektiviteten af ​​anti-SARS-CoV-2-vacciner gennem et to-arms klinisk forsøg, der sammenligner BCG versus placebo. Specifikt:

1. Vurder, om BCG-vaccine er i stand til at stimulere det uspecifikke immunrespons (trænet immunitet)
2. Kontroller, om BCG er i stand til at beskytte mod SARS-CoV-2-infektion
3. Vurder, om BCG er i stand til at beskytte inficerede med SARS-CoV-2 mod sygdom
4. Vurder, om BCG er i stand til at beskytte personer med COVID-19 mod dens alvorlige form
5. Vurder, om BCG kan fremme effektiviteten af ​​doser af anti-SARS-CoV-2-vacciner
6. At vide, om revaccination af voksne med BCG forårsager uventede bivirkninger

METODOLOGI:

2.1 UNDERSØGELSESMODEL: To-armet klinisk forsøg - intervention (BCG) versus placebo

2.2 UNDERSØGELSESPOPULATION: Frivillige, der endnu ikke er smittet med SARS-CoV-2 eller vaccineret mod COVID-19, og som kan være væsentlige servicemedarbejdere med hyppig kontakt med befolkningen: arbejdere på sundhedsposter, brugere af det offentlige sundhedsnetværk på grund af andre ikke- alvorlige sygdomme, politibetjente, ansatte på apoteker, supermarkeder, butikker m.fl

Prøveudtagning: Da den reelle forekomst af SARS-CoV-2-infektion i den berettigede population af de forskellige rekrutteringssteder er ukendt, blev en prævalens på 50 % taget i betragtning (det giver den største stikprøvestørrelse) og anslået, at post-BCG-prævalensen ville falde mindst 10 %, hvis effektiviteten skal påvises. Således blev det fundet en stikprøve på 385 forsøgspersoner. I betragtning af tab vil der blive rekrutteret minimum 400 deltagere, med mindst 200 i hver gruppe.

2.3. INKLUSIONSKRITERIER:

• Aldrig blevet inficeret med SARS-Cov-2 - klinisk historie og fravær af anti-SARS-CoV-2 immunglobuliner IgM/IgG antistoffer ved hurtig test (øjeblikkelig) og serologisk test (senere bekræftelse)
• Ikke at være vaccineret mod COVID-19
• Vær mindst 18 år gammel

2.4. EXKLUSIONSKRITERIER: • Er blevet vaccineret med BCG for mindre end 6 måneder siden

• Er blevet vaccineret med BCG mere end én gang tidligere

• Vis alle klassiske kontraindikationer for BCG - graviditet, amning, akut febersygdom, alvorlig allergi over for en af ​​komponenterne, vaccination med andre levende vacciner inden for den sidste måned (mæslinger, gul feber, herpes zoster), immunsuppression af enhver årsag (medfødt, sygdom) , brug af kortikosteroider eller immunsuppressiva)
• Har haft tuberkulose eller kontaktet en med tuberkulose
• Viser tegn på enhver aktuel akut sygdom eller har haft en alvorlig sygdom i mindre end 15 dage
• Præsenter en hudlæsion på vaccinepåføringsstedet (højre deltoidmuskel)
• Anamnese med alvorlige allergiske reaktioner over for ethvert produkt: nældefeber, glottisødem, angioødem, respirationssvigt, bronkospasme
• Anamnese med alvorlige autoimmune sygdomme: systemisk lupus erythematosus, Crohns sygdom, colitis ulcerosa, multipel sklerose, hæmolytisk anæmi, ankyloserende spondylitis, pemfigus og andre
• Immunkompromittering af enhver grund: medfødt, sygdom, brug af kortikosteroider eller immunsuppressiva
• Udviser en risikokomorbiditet for svær COVID-19: dårligt kontrolleret hypertension, dekompenseret hjertesygdom (kronisk, medfødt eller iskæmisk), lungesygdom (kronisk pneumopati, dårligt kontrolleret astma, kronisk interstitiel pneumopati, andre ...), sygdom fremskreden kronisk nyresygdom (brug af dialyse), transplantation (af faste organer eller knoglemarv), ukontrolleret diabetes

2.5. REKRUTTERING AF DELTAGERE De frivillige vil blive rekrutteret i tre forskellige brasilianske stater - Minas Gerais (Juiz de Fora by), Amazonas (Manaus by) og Pará (Belém by). Deres tilgang vil være baseret på levedygtigheden og logistikken for hvert rekrutteringssted under hensyntagen til den lokale dynamik af anti-COVID-19-vaccination efter alder. De, der opfylder inklusionskriterierne og accepterer at deltage i undersøgelsen, skal underskrive Informed Consent Form (ICF). Ved lodtrækning vil deltageren blive allokeret til gruppe 1 eller 2 for at modtage placebo (BCG solvent) eller BCG-vaccine.

2.6. INKLUSION OG OPFØLGNING AF DELTAGERE 2.6.a -- Evaluering af BCG mod den alvorlige form for COVID-19:

Forsøgspersonerne vil blive kontaktet på D0 (dag for inklusion og intervention), D60, D120 og D180, samt på enhver dag med symptomdebut for at vurdere tilstedeværelsen og udviklingen af ​​en SARS-CoV-2-infektion. Et standardiseret spørgeskema vil blive udviklet, og tablets vil blive programmeret med REDCap-softwaren til at udføre interviews ved hvert besøg for at undersøge demografiske data, tidligere og nuværende sygdomme, vaccinationshistorie, risikoaktiviteter og symptomer, der tyder på COVID-19. Deltagerne vil blive bedt om at informere holdet, så snart der er mistænkelige symptomer. I hvert planlagt besøg vil deltagerne også gennemgå en venøs blodopsamling til:

- På D0 - Søgning af IgM/IgG antistoffer ved hurtig test og IgG ved serologi (enzymimmunoassay-ELISA) i alle forsøgspersoner og søgning efter pro-inflammatoriske cytokiner Tumor Necrosis Factor α (TNF-α), interferon γ (IFN-γ) , interleukin (IL)1β, IL-4, IL-6 og IL-10 i 50 deltagere fra hver gruppe.

- På D60 - Søgning af anti-SARS-CoV-2 IgG ved ELISA hos alle deltagere og parret cytokinsøgning (deltagere, der gjorde det på D0).

• På D120 og D180 - Søgning af anti-SARS-CoV-2 IgG ved ELISA.
• If Symptom - Daglig opfølgning for at vejlede diagnostisk bekræftelse af SARS-CoV-2-infektion i det lokale sundhedsnetværk og for at overvåge den kliniske udvikling. Endvidere vil patienten udfylde en tabel med daglige symptomer, som vil blive indsamlet ved næste planlagte besøg. I tilfælde af hospitalsindlæggelse vil data om klinisk udvikling blive indhentet fra lægejournaler.

2.6.b -- Evaluering af BCGs kapacitet til at forbedre vaccinens anti-SARS-CoV-2 effektivitet:

Fra det øjeblik deltagerne er vaccineret mod covid-19, vil besøgene blive tilpasset vaccinationsskemaet, som følger:

- VD - på tidspunktet for 1. dosis af vaccinen

- P1 - 20 dage efter 1. dosis

- P2 - mindst 30 dage efter 2. dosis Ved alle disse lejligheder vil neutraliserende anti-SARS-CoV-2 antistoffer blive testet hos alle deltagere.

2.7. INTERVENTION Inklusionen i BCG- eller Placebogruppen vil ske ved lodtrækning, hvis viden vil være begrænset til hovedforskeren og den professionelle, der skal udføre interventionen. Deltagerne og teknikeren, der skal udføre laboratorietestene, ved det ikke.

- BCG Group - BCG-vaccine (levende svækket Mycobacterium bovis (Bacillus Calmette-Guérin) fra Serum Institute of India Ltd. Intradermal dosis på 0,1 ml påført ved den distale indsættelse af højre deltoid.

Forventede bivirkninger af BCG kan være ømhed, hævelse og en rød papel på stedet, som vil blive til et flydende sår med en diameter på 1 cm, der lukker om 2 eller 3 måneder, og næsten altid efterlader et ar af samme størrelse. Andre mulige bivirkninger er: hovedpine, utilpashed, feber, sår større end 1 cm, forsinket heling (op til 6 måneder), forstørrede lymfeknuder. En sjælden alvorlig komplikation er lokal eller aksillær knudeabsces på grund af fejl i administrationen med subkutan deponering af vaccinen. Således vil BCG blive styret af en strengt uddannet professionel. Der henvises også til spredningen af ​​vaccinebacillen, der forårsager organskade hos immunkompromitterede individer (et udelukkelseskriterium). Personer med en alvorlig reaktion vil modtage tilstrækkelig opfølgning og behandling.

-Placebo Group - Anvendelse af 0,1 ml intradermalt BCG-vaccineopløsningsmiddel.

2.8. INFEKTIONSDETEKTION Aktuel SARS-Cov-2-infektion vil blive identificeret ved hurtig test for at påvise IgM/IgG-antistoffer (kun på D0 som et eksklusionskriterium) og ved serologi for at påvise IgG-antistoffer ved hvert besøg. Gennem positivitet for IgG gennem opfølgningen vil efterforskerne identificere de deltagere, der blev smittet mellem besøgene under opfølgningen.

2.9. KLINISK UDVIKLING - Den kliniske status for symptomatisk inficerede mennesker vil blive defineret som:

• MILD STATUS (Influenza Syndrom-SG) - Feber ledsaget af hoste eller ondt i halsen eller tab af lugt/smag og mindst et af følgende symptomer: hovedpine, myalgi eller artralgi. Mindre almindelige symptomer kan være: kropssmerter, tilstoppet næse, diarré, mavesmerter, udslæt, misfarvede fingre og tæer, conjunctivitis.
• MODERAT STATUS - Træthed eller let åndedrætsbesvær ved små anstrengelser og/eller stigning i intensiteten af ​​de underliggende symptomer efter 4 dages sygdom og/eller stigning i antallet af underliggende symptomer efter 4 dages sygdom og/eller vedvarende symptomer for mere end en uge.
• ALVORLIG STATUS (Svere Acute Respiratory Syndrome) - SG forbundet med underskud i åndedrætssystemet (åndedrætsbesvær, cyanose, iltmætning <95 %, takypnø, partialtryk af ilt i alveolær gas/fraktion af indåndet ilt (PaO2/FiO2) <300 og/eller pulmonal infiltration >50% i 24-48 timer), underskud i det kardiovaskulære system (hypotension, svag puls) eller ændring i mental status.
• KRITISK STATUS - Respirationssvigt, septisk shock og/eller dysfunktion af flere organer, tab af tale eller bevægelse.

2.10. EVALUERING AF DEN HUMORALSE SPONSPROFIL Ved D0, som et inklusionskriterium, den hurtige test til påvisning af anti-SARS-CoV-2 IgG/IgM antistoffer (TR COVID-19 IgM/IgG "BioManguinhos-Fiocruz") med 100 % specificitet for IgM og IgG og følsomhed på 85,7 % (4-7 dage) og 90 % (> 8 dage) for IgM og 92,8 % (4-7 dage) og 90 % (>8 dage) for IgG. Også på D0 og på alle besøgsdage og i tilfælde af symptomer vil IgG blive detekteret ved en kommerciel enzymimmunoassay (rekombinant ELISA - "Euroimmun Brasil Medicina Diagnóstica") med S1-underdomænet af Spike-proteinet som indfangningsantigen, mhp. opdage infektioner opstået mellem besøgene (serokonversion).

For at vurdere effektiviteten af ​​anti-SARS-CoV-2-vacciner vil anti-SARS-CoV-2-neutraliserende antistoffer blive undersøgt ved hjælp af SARS-CoV-2 Surrogate Virus Neutralization Test-sVNT ("Genscript") kit, som giver kvalitative og semikvatitative (titer i UI/ml) resultater. Denne undersøgelse vil blive udført 20 dage efter 1. dosis og mindst 1 måned efter 2. dosis af vaccinen.

2.11. CYTOKIN ANALYSE - Det vil blive målt de proinflammatoriske cytokiner IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α (R&D Systems) og IFN-γ ("Sanquin") ved D0 og D60 for at vurdere effektiviteten af BCG til at stimulere det ikke-specifikke immunrespons.

2.12. ETISKE SPØRGSMÅL - Projektet blev godkendt af National Commission for Ethics in Research with Human Beings-CONEP. Frivillige, der ønskede at deltage, underskrev den informerede samtykkeformular. En uafhængig data- og sikkerhedsovervågningskomité (IDSMC) vil overvåge undersøgelsen for at sikre, at den er etisk ikke-voldelig og data troværdig, og kan anbefale ændringer eller suspension af undersøgelsen, hvis det er nødvendigt. Gennem Research Electronic Data Capture-REDCap-softwaren vil en datamanager give information om studiets fremskridt, når som helst det bliver anmodet om det. Resultaterne af prøverne vil blive udleveret til deltagerne. Intense reaktioner på BCG vil modtage behørig omhu fra forskerholdet og vil blive underrettet til CONEP og IDSMC inden for 24 timer. Deltagerne vil blive opfordret til at modtage COVID-19-vaccinen, når den bliver tilgængelig for dem.

2.14. STATISTISK ANALYSE AF RESULTATER - Gennem programmerne Statistisk Pakke for Samfundsvidenskab (IBM SPSS v.22) og Stata (v.14.0) vil resultaterne blive analyseret sammenlignende mellem grupperne, defineret som fiaskoer. Analyser vil blive udført for intention-to-treat-populationen (totale rekrutter) og per protokol-population (med fuld opfølgning) ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden. Andele vil blive beregnet med 95 % konfidensintervaller og sammenlignet med Chi2 og Fishers eksakte test. Overlevelseskurver vil blive sammenlignet ved log rank test. Logistisk regression vil identificere det sæt af uafhængige variabler, der kan forklare de binære afhængige variable, såsom serologisk reaktivitet.