Rola szczepionki BCG w ewolucji klinicznej COVID-19 i skuteczności szczepionek przeciw SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2)

CEL - Ocena roli szczepionki BCG przeciwko ciężkiej postaci COVID-19 oraz poprawy skuteczności szczepionek przeciw SARS-CoV-2 poprzez dwuramienne badanie kliniczne porównujące BCG z placebo. Konkretnie:

1. Oceń, czy szczepionka BCG jest w stanie stymulować nieswoistą odpowiedź immunologiczną (odporność wytrenowana)
2. Sprawdź, czy BCG jest w stanie chronić przed zakażeniem SARS-CoV-2
3. Ocenić, czy BCG jest w stanie ochronić zakażonych SARS-CoV-2 przed zachorowaniem
4. Ocenić, czy BCG jest w stanie chronić osoby z COVID-19 przed jego ciężką postacią
5. Ocenić, czy BCG może sprzyjać skuteczności dawek szczepionek anty-SARS-CoV-2
6. Wiedza o tym, czy ponowne szczepienie dorosłych szczepionką BCG powoduje nieoczekiwane działania niepożądane

METODOLOGIA:

2.1 MODEL BADANIA: Dwuramienne badanie kliniczne — interwencja (BCG) w porównaniu z placebo

2.2 BADANA POPULACJA: Wolontariusze jeszcze niezakażeni SARS-CoV-2 lub zaszczepieni przeciwko COVID-19, którzy mogą być pracownikami niezbędnych usług mającymi częsty kontakt z ludnością: pracownicy placówek służby zdrowia, użytkownicy sieci publicznej służby zdrowia z powodu innych nie- ciężko chorzy, policjanci, pracownicy aptek, supermarketów, sklepów i inni

Pobieranie próbek: Ponieważ rzeczywista częstość występowania zakażenia SARS-CoV-2 w kwalifikującej się populacji z różnych miejsc rekrutacji jest nieznana, przyjęto częstość występowania wynoszącą 50% (zapewnia największą liczebność próby) i oszacowano, że częstość występowania po BCG zmniejszy się co najmniej 10%, jeśli ma zostać wykazana jego skuteczność. W ten sposób znaleziono próbę 385 osób. Biorąc pod uwagę straty, zostanie zrekrutowanych minimum 400 uczestników, po co najmniej 200 w każdej grupie.

2.3. KRYTERIA PRZYJĘCIA:

• Nigdy nie byłem zakażony SARS-Cov-2 - historia kliniczna i brak przeciwciał IgM/IgG anty-SARS-CoV-2 w szybkim teście (natychmiast) i teście serologicznym (późniejsze potwierdzenie)
• Brak szczepienia przeciwko COVID-19
• Mieć co najmniej 18 lat

2.4. KRYTERIA WYKLUCZENIA: • Byli szczepioni BCG mniej niż 6 miesięcy temu

• Były szczepione BCG więcej niż raz w przeszłości

• Przedstaw wszelkie klasyczne przeciwwskazania do BCG - ciąża, karmienie piersią, ostra choroba przebiegająca z gorączką, ciężka alergia na jeden ze składników, szczepienie innymi żywymi szczepionkami w ciągu ostatniego miesiąca (odra, żółta febra, półpasiec), immunosupresja z jakiejkolwiek przyczyny (wrodzona, , stosowanie kortykosteroidów lub leków immunosupresyjnych)
• Chorował na gruźlicę lub miał kontakt z osobą chorą na gruźlicę
• Obecne objawy jakiejkolwiek aktualnej ostrej choroby lub ciężka choroba trwała krócej niż 15 dni
• Przedstawić zmianę skórną w miejscu podania szczepionki (prawy mięsień naramienny)
• Historia ciężkich reakcji alergicznych na jakikolwiek produkt: pokrzywka, obrzęk głośni, obrzęk naczynioruchowy, niewydolność oddechowa, skurcz oskrzeli
• Historia poważnych chorób autoimmunologicznych: toczeń rumieniowaty układowy, choroba Leśniowskiego-Crohna, wrzodziejące zapalenie jelita grubego, stwardnienie rozsiane, niedokrwistość hemolityczna, zesztywniające zapalenie stawów kręgosłupa, pęcherzyca i inne
• Obniżenie odporności z jakiegokolwiek powodu: wrodzone, choroba, stosowanie kortykosteroidów lub leków immunosupresyjnych
• Przedstawienie współwystępowania ryzyka ciężkiego COVID-19: źle kontrolowane nadciśnienie, niewyrównana choroba serca (przewlekła, wrodzona lub niedokrwienna), choroba płuc (przewlekła pneumopatia, źle kontrolowana astma, przewlekła śródmiąższowa pneumopatia, inne ...), choroba zaawansowana przewlekła choroba nerek (stosowanie dializy), transplantacja (narządów miąższowych lub szpiku kostnego), niekontrolowana cukrzyca

2.5. REKRUTACJA UCZESTNIKÓW Wolontariusze będą rekrutowani w trzech różnych stanach Brazylii - stanie Minas Gerais (miasto Juiz de Fora), stanie Amazonas (miasto Manaus) i stanie Pará (miasto Belém). Ich podejście będzie oparte na rentowności i logistyce każdego miejsca rekrutacji, biorąc pod uwagę lokalną dynamikę szczepień przeciwko COVID-19 według wieku. Osoby, które spełniają kryteria włączenia i wyrażają zgodę na udział w badaniu, muszą podpisać formularz świadomej zgody (ICF). W drodze losowania uczestnik zostanie przydzielony do grupy 1 lub 2, aby otrzymać placebo (rozpuszczalnik BCG) lub szczepionkę BCG.

2.6. WŁĄCZENIE I KONTROLA UCZESTNIKÓW 2.6.a -- Ocena BCG przeciwko ciężkiej postaci COVID-19:

Z pacjentami skontaktujemy się w D0 (dzień włączenia i interwencji), D60, D120 i D180, a także w każdym dniu wystąpienia objawów w celu oceny obecności i ewolucji zakażenia SARS-CoV-2. Opracowany zostanie standaryzowany kwestionariusz, a tablety zostaną zaprogramowane z oprogramowaniem REDCap do przeprowadzania wywiadów podczas każdej wizyty w celu zbadania danych demograficznych, przebytych i obecnych chorób, historii szczepień, działań związanych z ryzykiem i objawów sugerujących COVID-19. Uczestnicy zostaną poinstruowani, aby informować zespół, gdy tylko wystąpią jakiekolwiek podejrzane objawy. Na każdej zaplanowanej wizycie uczestnicy zostaną poddani również pobraniu krwi żylnej w celu:

- W D0 - Wyszukiwanie przeciwciał IgM/IgG za pomocą szybkich testów i IgG za pomocą serologii (enzymatyczny test immunologiczny-ELISA) u wszystkich badanych oraz poszukiwanie cytokin prozapalnych Czynnik martwicy nowotworów α (TNF-α), interferon γ (IFN-γ) , interleukiny (IL)1β, IL-4, IL-6 i IL-10 u 50 uczestników z każdej grupy.

- W dniu 60 - Wyszukiwanie anty-SARS-CoV-2 IgG za pomocą testu ELISA u wszystkich uczestników i wyszukiwanie sparowanych cytokin (uczestnicy, którzy wykonali to w dniu 0).

• W D120 i D180 - Poszukiwanie anty-SARS-CoV-2 IgG metodą ELISA.
• Jeśli objaw — codzienna obserwacja w celu potwierdzenia diagnostycznego zakażenia SARS-CoV-2 w lokalnej sieci opieki zdrowotnej i monitorowania rozwoju klinicznego. Ponadto pacjent wypełni tabelę codziennych objawów, które zostaną zebrane podczas kolejnej zaplanowanej wizyty. W przypadku hospitalizacji dane dotyczące ewolucji klinicznej będą pozyskiwane z dokumentacji medycznej.

2.6.b -- Ocena zdolności BCG do poprawy skuteczności szczepionki przeciw SARS-CoV-2:

Od momentu zaszczepienia uczestników przeciw covid-19 wizyty będą dostosowywane do kalendarza szczepień w następujący sposób:

- VD - w czasie podania pierwszej dawki szczepionki

- P1 - 20 dni po 1. dawce

- P2 - co najmniej 30 dni po II dawce We wszystkich tych przypadkach u wszystkich uczestników zostaną przebadane przeciwciała neutralizujące anty-SARS-CoV-2.

2.7. INTERWENCJA Włączenie do Grupy BCG lub Grupy Placebo nastąpi w drodze losowania, którego wiedza będzie ograniczona do głównego badacza i specjalisty, który przeprowadzi interwencję. Uczestnicy i technik, który przeprowadzi badania laboratoryjne, nie będą tego wiedzieć.

- Grupa BCG - Szczepionka BCG (żywe atenuowane Mycobacterium bovis (Bacillus Calmette-Guérin) z Serum Institute of India Ltd. Śródskórna dawka 0,1 ml podana w dystalnym przyczepie prawego mięśnia naramiennego.

Oczekiwanymi działaniami niepożądanymi BCG mogą być tkliwość, obrzęk i zaczerwieniona grudka w miejscu, które przekształci się w ciekły wrzód o średnicy 1 cm, który zagoi się w ciągu 2 lub 3 miesięcy, prawie zawsze pozostawiając bliznę tej samej wielkości. Inne możliwe działania niepożądane to: ból głowy, złe samopoczucie, gorączka, wrzód większy niż 1 cm, opóźnione gojenie (do 6 miesięcy), powiększone węzły chłonne. Rzadkim poważnym powikłaniem jest ropień miejscowy lub węzłowy pachowy spowodowany błędem w podaniu szczepionki podskórnie. W ten sposób firma BCG będzie zarządzana przez rygorystycznie wyszkolonego profesjonalistę. Istnieje również wzmianka o rozprzestrzenianiu się prątków szczepionkowych powodujących uszkodzenie narządów u osób z obniżoną odpornością (kryterium wykluczenia). Osoby z ciężką reakcją otrzymają odpowiednią obserwację i leczenie.

-Grupa Placebo - Podanie śródskórne 0,1 ml rozpuszczalnika szczepionki BCG.

2.8. WYKRYWANIE ZAKAŻENIA Obecna infekcja SARS-Cov-2 będzie identyfikowana za pomocą szybkiego testu do wykrywania przeciwciał IgM/IgG (tylko w D0 jako kryterium wykluczenia) oraz serologii do wykrywania przeciwciał IgG podczas każdej wizyty. Dzięki pozytywnemu wynikowi IgG w trakcie obserwacji badacze zidentyfikują uczestników, którzy zostali zakażeni między wizytami w trakcie obserwacji.

2.9. EWOLUCJA KLINICZNA - Stan kliniczny zakażonych osób z objawami zostanie zdefiniowany jako:

• STAN ŁAGODNY (zespół grypy-SG) - Gorączka, której towarzyszy kaszel lub ból gardła lub utrata węchu/smaku i co najmniej jeden z następujących objawów: ból głowy, ból mięśni lub ból stawów. Mniej powszechnymi objawami mogą być: ból ciała, przekrwienie błony śluzowej nosa, biegunka, ból brzucha, wysypka, odbarwienie palców rąk i nóg, zapalenie spojówek.
• STAN UMIARKOWANY - Zmęczenie lub niewielkie trudności w oddychaniu przy niewielkich wysiłkach i/lub nasilenie objawów podstawowych po 4 dniach choroby i/lub zwiększenie liczby objawów podstawowych po 4 dniach choroby i/lub utrzymywanie się objawów przez więcej niż tydzień.
• STAN POWAŻNY (Zespół Ciężkiej Ostrej Niewydolności Oddechowej) - SG związana z deficytem w układzie oddechowym (trudności w oddychaniu, sinica, wysycenie tlenem <95%, przyspieszony oddech, ciśnienie cząstkowe tlenu w gazie pęcherzykowym/frakcja tlenu wdychanego (PaO2/FiO2) <300 i/lub naciek w płucach >50% w ciągu 24-48h), deficyt w układzie sercowo-naczyniowym (niedociśnienie, słaby puls) lub zmiana stanu psychicznego.
• STAN KRYTYCZNY - Niewydolność oddechowa, wstrząs septyczny i/lub dysfunkcja wielu narządów, utrata mowy lub ruchu.

2.10. OCENA PROFILU ODPOWIEDZI HUMORALNEJ W D0, jako kryterium włączenia, szybki test do wykrywania przeciwciał anty-SARS-CoV-2 IgG/IgM (TR COVID-19 IgM/IgG „BioManguinhos-Fiocruz”) ze 100% swoistością dla IgM i IgG oraz czułość 85,7% (4-7 dni) i 90% (>8 dni) dla IgM i 92,8% (4-7 dni) i 90% (>8 dni) dla IgG. Również w D0 i we wszystkie dni odwiedzin oraz w przypadku wystąpienia objawów, IgG zostanie wykryte komercyjnym testem immunoenzymatycznym (rekombinowany test ELISA – „Euroimmun Brasil Medicina Diagnóstica”) z subdomeną S1 białka Spike jako antygenem wychwytującym, w celu wykryć infekcje, które wystąpiły między wizytami (serokonwersja).

Aby ocenić skuteczność szczepionek anty-SARS-CoV-2, przeciwciała neutralizujące anty-SARS-CoV-2 zostaną zbadane przy użyciu zestawu SARS-CoV-2 Surrogate Virus Neutralizacja Test-sVNT („Genscript”), który zapewnia jakościowe i wyniki półilościowe (miano w UI/ml). Badanie to zostanie przeprowadzone 20 dni po pierwszej dawce i co najmniej 1 miesiąc po drugiej dawce szczepionki.

2.11. ANALIZA CYTOKIN - Będzie mierzyć prozapalne cytokiny IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α (R&D Systems) i IFN-γ („Sanquin”) w D0 i D60 w celu oceny skuteczności BCG w stymulowaniu niespecyficznej odpowiedzi immunologicznej.

2.12. KWESTIE ETYCZNE - Projekt uzyskał akceptację Krajowej Komisji ds. Etyki Badań nad Ludźmi-CONEP. Wolontariusze, którzy chcieli wziąć udział, podpisali formularz świadomej zgody. Niezależny Komitet ds. Monitorowania Danych i Bezpieczeństwa (IDSMC) będzie monitorował badanie, aby upewnić się, że nie zawiera ono przemocy etycznej, a dane są wiarygodne, iw razie potrzeby może zalecić modyfikacje lub zawieszenie badania. Dzięki oprogramowaniu Research Electronic Data Capture-REDCap menedżer danych dostarczy informacji o postępie badania w dowolnym momencie, gdy zostanie o to poproszony. Wyniki egzaminów zostaną przekazane uczestnikom. Intensywna reakcja na BCG zostanie objęta należytą opieką zespołu badawczego i zostanie zgłoszona do CONEP i IDSMC w ciągu 24 godzin. Uczestnicy będą zachęcani do przyjęcia szczepionki przeciwko COVID-19, gdy stanie się ona dla nich dostępna.

2.14. STATYSTYCZNA ANALIZA WYNIKÓW - Za pomocą programów Statistical Package for the Social Sciences (IBM SPSS v.22) i Stata (v.14.0) wyniki zostaną przeanalizowane porównawczo między grupami, zdefiniowane jako niepowodzenia. Analizy zostaną przeprowadzone dla populacji, która miała być leczona (całkowita liczba rekrutów) oraz populacji według protokołu (z pełną obserwacją) przy użyciu metody Kaplana-Meiera. Proporcje zostaną obliczone z 95% przedziałami ufności i porównane za pomocą Chi2 i dokładnego testu Fishera. Krzywe przeżycia zostaną porównane za pomocą testu log-rank. Regresja logistyczna zidentyfikuje zestaw zmiennych niezależnych, które mogą wyjaśnić binarne zmienne zależne, takie jak reaktywność serologiczna.