Роль вакцины БЦЖ в клинической эволюции COVID-19 и в эффективности вакцин против SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2)

ЦЕЛЬ. Оценить роль вакцины БЦЖ против тяжелой формы COVID-19 и в повышении эффективности вакцин против SARS-CoV-2 посредством клинического испытания с двумя группами, сравнивающего БЦЖ с плацебо. Конкретно:

1. Оценить, способна ли вакцина БЦЖ стимулировать неспецифический иммунный ответ (обученный иммунитет).
2. Проверить, способна ли БЦЖ защитить от инфекции SARS-CoV-2.
3. Оценить, способна ли БЦЖ защитить инфицированных SARS-CoV-2 от болезни
4. Оцените, способна ли БЦЖ защитить пациентов с COVID-19 от его тяжелой формы.
5. Оценить, может ли БЦЖ повысить эффективность доз вакцин против SARS-CoV-2.
6. Знание того, вызывает ли ревакцинация взрослых БЦЖ неожиданные побочные реакции

МЕТОДОЛОГИЯ:

2.1 МОДЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: клиническое исследование с двумя группами - вмешательство (БЦЖ) в сравнении с плацебо

2.2 ИССЛЕДУЕМОЕ НАСЕЛЕНИЕ: Добровольцы, еще не инфицированные SARS-CoV-2 или вакцинированные против COVID-19, которые могут быть работниками основных служб с частыми контактами с населением: работники медицинских пунктов, пользователи сети общественного здравоохранения по другим причинам. тяжелобольные, сотрудники полиции, работники аптек, супермаркетов, магазинов и др.

Выборка: Поскольку реальная распространенность инфекции SARS-CoV-2 среди подходящей популяции в различных местах набора неизвестна, была рассмотрена распространенность 50% (это обеспечивает самый большой размер выборки) и было подсчитано, что распространенность после введения БЦЖ снизится. не менее 10%, если его эффективность должна быть продемонстрирована. Таким образом, была найдена выборка из 385 испытуемых. С учетом потерь будет набрано не менее 400 участников, не менее 200 в каждой группе.

2.3. КРИТЕРИИ ВКЛЮЧЕНИЯ:

• Никогда не был инфицирован SARS-Cov-2 - история болезни и отсутствие антител IgM/IgG к иммуноглобулинам SARS-CoV-2 при экспресс-тесте (немедленное) и серологическом тесте (позднее подтверждение)
• Отсутствие прививки от COVID-19
• Быть не моложе 18 лет

2.4. КРИТЕРИИ ИСКЛЮЧЕНИЯ: • Были вакцинированы БЦЖ менее 6 месяцев назад.

• Были привиты БЦЖ более одного раза в прошлом

• Наличие любых классических противопоказаний для БЦЖ - беременность, кормление грудью, острые лихорадочные заболевания, тяжелая аллергия на один из компонентов, вакцинация другими живыми вакцинами в течение последнего месяца (корь, желтая лихорадка, опоясывающий герпес), иммуносупрессия по любой причине (врожденная, болезнь , использование кортикостероидов или иммунодепрессантов)
• Переболели туберкулезом или контактировали с больным туберкулезом
• Наличие признаков любого острого заболевания в настоящее время или перенесенное тяжелое заболевание менее 15 дней
• Представьте поражение кожи в месте нанесения вакцины (правая дельтовидная мышца)
• В анамнезе тяжелые аллергические реакции на какой-либо продукт: крапивница, отек голосовой щели, ангионевротический отек, дыхательная недостаточность, бронхоспазм.
• Тяжелые аутоиммунные заболевания в анамнезе: системная красная волчанка, болезнь Крона, язвенный колит, рассеянный склероз, гемолитическая анемия, анкилозирующий спондилоартрит, пузырчатка и др.
• Иммунодефицит по любой причине: врожденный, болезнь, прием кортикостероидов или иммунодепрессантов
• Наличие сопутствующей патологии при тяжелом течении COVID-19: плохо контролируемая артериальная гипертензия, декомпенсированная болезнь сердца (хроническая, врожденная или ишемическая), заболевание легких (хроническая пневмопатия, плохо контролируемая астма, хроническая интерстициальная пневмопатия и др. ...), запущенная хроническая болезнь почек (использование диализа), трансплантация (солидных органов или костного мозга), неконтролируемый диабет

2.5. НАБОР УЧАСТНИКОВ Добровольцы будут набраны в трех разных штатах Бразилии – штате Минас-Жерайс (город Жуис-де-Фора), штате Амазонас (город Манаус) и штате Пара (город Белен). Их подход будет основываться на жизнеспособности и логистике каждого места набора с учетом местной динамики вакцинации против COVID-19 в зависимости от возраста. Те, кто соответствует критериям включения и соглашается участвовать в исследовании, должны подписать форму информированного согласия (ICF). По жребию участник будет распределен в 1-ю или 2-ю группу для получения плацебо (растворителя БЦЖ) или вакцины БЦЖ.

2.6. ВКЛЮЧЕНИЕ УЧАСТНИКОВ И ПОСЛЕДУЮЩИЕ ДЕЙСТВИЯ 2.6.a -- Оценка БЦЖ против тяжелой формы COVID-19:

С субъектами свяжутся в D0 (день включения и вмешательства), D60, D120 и D180, а также в любой день появления симптомов, чтобы оценить наличие и развитие инфекции SARS-CoV-2. Будет разработана стандартизированная анкета, а планшеты будут запрограммированы с помощью программного обеспечения REDCap для проведения интервью при каждом посещении для изучения демографических данных, прошлых и текущих заболеваний, истории вакцинации, рискованной деятельности и симптомов, указывающих на COVID-19. Участники будут проинструктированы сообщать команде, как только появятся какие-либо подозрительные симптомы. Во время каждого запланированного визита участники также будут проходить забор венозной крови, чтобы:

- На D0 - поиск антител IgM/IgG экспресс-тестом и IgG серологическим методом (иммуноферментный анализ-ИФА) у всех субъектов и поиск провоспалительных цитокинов фактора некроза опухоли α (TNF-α), интерферона γ (IFN-γ) , интерлейкин (IL)1β, IL-4, IL-6 и IL-10 у 50 участников из каждой группы.

- На Д60 - Поиск анти-SARS-CoV-2 IgG методом ИФА у всех участников и парный поиск цитокинов (участники, которые делали это на Д0).

• На Д120 и Д180 - Поиск анти-SARS-CoV-2 IgG методом ИФА.
• Если симптом — ежедневное последующее наблюдение для диагностического подтверждения инфекции SARS-CoV-2 в местной сети здравоохранения и для мониторинга клинической эволюции. Кроме того, пациент будет заполнять таблицу ежедневных симптомов, которые будут собраны во время следующего планового визита. В случае госпитализации данные о клиническом развитии будут получены из медицинских карт.

2.6.б -- Оценка способности БЦЖ повышать эффективность вакцины против SARS-CoV-2:

С момента вакцинации участников от covid-19 визиты будут корректироваться в соответствии с графиком вакцинации следующим образом:

- ВД - на момент введения 1-й дозы вакцины

- P1 - через 20 дней после 1-й дозы

- P2 - не менее чем через 30 дней после введения 2-й дозы. Во всех этих случаях у всех участников будут тестироваться нейтрализующие антитела против SARS-CoV-2.

2.7. ВМЕШАТЕЛЬСТВО Включение в группу БЦЖ или плацебо будет осуществляться по жребию, чьи знания будут ограничены главным исследователем и специалистом, который будет проводить вмешательство. Участники и техник, который будет проводить лабораторные испытания, не будут знать об этом.

- BCG Group - вакцина БЦЖ (живая аттенуированная Mycobacterium bovis (бацилла Кальметта-Герена) производства Serum Institute of India Ltd. Внутрикожно вводят 0,1 мл в дистальном месте прикрепления правой дельтовидной мышцы.

Ожидаемыми побочными эффектами БЦЖ могут быть болезненность, отек и покраснение папулы на месте, которая превратится в жидкую язву диаметром 1 см, которая закроется через 2 или 3 месяца, почти всегда оставляя шрам того же размера. Другими возможными побочными эффектами являются: головная боль, недомогание, лихорадка, язва более 1 см, замедленное заживление (до 6 мес), увеличение лимфатических узлов. Редким серьезным осложнением является местный абсцесс или абсцесс подмышечного лимфатического узла из-за ошибки при введении с подкожным введением вакцины. Таким образом, BCG будет управляться тщательно подготовленным профессионалом. Имеется также ссылка на распространение вакцинной палочки, вызывающей поражение органов у лиц с ослабленным иммунитетом (критерий исключения). Субъекты с тяжелой реакцией получат адекватное последующее наблюдение и лечение.

- Группа плацебо - Внутрикожное введение 0,1 мл растворителя вакцины БЦЖ.

2.8. ВЫЯВЛЕНИЕ ИНФЕКЦИИ Текущая инфекция SARS-Cov-2 будет идентифицирована с помощью экспресс-теста для выявления антител IgM/IgG (только в день D0 в качестве критерия исключения) и с помощью серологии для выявления антител IgG при каждом посещении. Благодаря положительному результату на IgG на протяжении всего последующего наблюдения исследователи будут идентифицировать участников, которые заразились между визитами на протяжении всего последующего наблюдения.

2.9. КЛИНИЧЕСКАЯ ЭВОЛЮЦИЯ - Клинический статус инфицированных людей с симптомами будет определяться как:

• ЛЕГКОЕ СОСТОЯНИЕ (синдром гриппа-SG) - Лихорадка, сопровождающаяся кашлем или болью в горле, или потеря обоняния/вкуса и по крайней мере один из следующих симптомов: головная боль, миалгия или артралгия. Менее распространенными симптомами могут быть: боль в теле, заложенность носа, диарея, боль в животе, сыпь, обесцвечивание пальцев рук и ног, конъюнктивит.
• УМЕРЕННОЕ СОСТОЯНИЕ - Усталость или небольшое затруднение дыхания при небольших усилиях и/или усиление интенсивности основных симптомов через 4 дня болезни и/или увеличение числа основных симптомов через 4 дня болезни и/или сохранение симптомов в течение более одной недели.
• ТЯЖЕЛОЕ СОСТОЯНИЕ (тяжелый острый респираторный синдром) - СГ, связанная с дефицитом в дыхательной системе (затрудненное дыхание, цианоз, сатурация кислорода <95%, тахипноэ, парциальное давление кислорода в альвеолярном газе/фракция вдыхаемого кислорода (PaO2/FiO2) <300 и/или легочная инфильтрация >50% за 24-48 ч), дефицит со стороны сердечно-сосудистой системы (гипотензия, слабый пульс) или изменение психического статуса.
• КРИТИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ - Дыхательная недостаточность, септический шок и/или полиорганная дисфункция, потеря речи или движений.

2.10. ОЦЕНКА ПРОФИЛЯ ГУМОРАЛЬНОГО ОТВЕТА В D0 в качестве критерия включения использовали экспресс-тест на выявление антител IgG/IgM к SARS-CoV-2 (TR COVID-19 IgM/IgG «BioManguinhos-Fiocruz») со 100% специфичностью для IgM и IgG и чувствительность 85,7% (4-7 дней) и 90% (>8 дней) для IgM и 92,8% (4-7 дней) и 90% (>8 дней) для IgG. Также в D0 и во все дни посещения и в случае появления симптомов IgG будет определяться с помощью коммерческого иммуноферментного анализа (рекомбинантный ИФА - «Euroimmun Brasil Medicina Diagnóstica») с субдоменом S1 шиповидного белка в качестве антигена захвата, чтобы выявить инфекции, произошедшие между визитами (сероконверсия).

Для оценки эффективности вакцин против SARS-CoV-2 будут исследованы нейтрализующие антитела против SARS-CoV-2 с использованием набора для нейтрализации суррогатного вируса SARS-CoV-2-sVNT («Genscript»), который обеспечивает качественные и полуколичественные (титр в МЕ/мл) результаты. Это исследование будет проведено через 20 дней после введения 1-й дозы и не менее чем через 1 месяц после введения 2-й дозы вакцины.

2.11. ЦИТОКИНОВЫЙ АНАЛИЗ. Будут измеряться провоспалительные цитокины IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α (R&D Systems) и IFN-γ («Санквин») в день 0 и день 60 для оценки эффективности. БЦЖ в стимуляции неспецифического иммунного ответа.

2.12. ЭТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ - Проект был одобрен Национальной комиссией по этике в исследованиях с людьми-CONEP. Добровольцы, пожелавшие принять участие, подписали форму информированного согласия. Независимый комитет по мониторингу данных и безопасности (IDSMC) будет контролировать исследование, чтобы убедиться, что оно не является насильственным с этической точки зрения и данные достоверны, и может рекомендовать изменения или приостановку исследования, если это необходимо. С помощью программного обеспечения Research Electronic Data Capture-REDCap менеджер данных будет предоставлять информацию о ходе исследования в любое время, когда она будет запрошена. Результаты экзаменов будут предоставлены участникам. Исследовательская группа уделит должное внимание интенсивной реакции на БЦЖ и уведомит CONEP и IDSMC в течение 24 часов. Участникам будет предложено получить вакцину от COVID-19, когда она станет для них доступной.

2.14. СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ. С помощью программ Статистического пакета для социальных наук (IBM SPSS v.22) и Stata (v.14.0) результаты будут проанализированы в сравнении между группами, определяемыми как неудачи. Анализы будут выполняться для популяции, намеренной лечиться (общее число новобранцев) и популяции согласно протоколу (с полным последующим наблюдением) с использованием метода Каплана-Мейера. Пропорции будут рассчитаны с доверительным интервалом 95% и сравнены с помощью критерия Chi2 и точного критерия Фишера. Кривые выживания будут сравниваться с помощью логарифмического рангового теста. Логистическая регрессия идентифицирует набор независимых переменных, которые могут объяснить бинарные зависимые переменные, такие как серологическая реактивность.