ピエゾサージェリー対従来のドリル：組織学的RCT

• 研究デザインと倫理委員会 これは、パイロット、並行群、二重盲検（患者 - 組織学者 - 統計学者）、分割口、無作為化臨床試験でした。
• 患者の選択と無作為化 この研究には、合計 12 の上顎または下顎の歯槽堤を有する両側部分無歯症の 6 人の患者が含まれていました。 すべての患者は、イタリアのボローニャ大学の Alma Mater Studiorum にある口腔および顎顔面外科のユニットに紹介されていました。 選択基準は次のとおりです。1) インプラント埋入前に骨再生を必要としない下顎骨または上顎骨の両側無歯顎部位。 2) 米国麻酔学会 (ASA) ステータス 1; 3) 研究の条件を理解し、受け入れる能力。 4) 少なくとも 1 年間の追跡調査への継続参加。 除外基準は次のとおりです。1）治療する部位の以前の骨増強。 2) 口腔衛生不良; 3) 喫煙 > 10 本/日; 4) アルコールまたは薬物の乱用; 5) 妊娠; 6) 局所または全身の急性感染; 7) コントロールされていない糖尿病またはその他の代謝性疾患; 8) 重度の肝機能障害または腎機能障害; 9) HIV、HBV、またはHCV感染; 10) 過去5年以内の化学療法または放射線療法; 11) 現在の免疫抑制療法; 12) 自己免疫疾患;または 13) ビスフォスフォネート療法。

歯槽隆起は、コンピューターで生成された方法を使用して 2 つのグループに無作為に割り付けられました。グループ A には、ピエゾ手術によって移植部位が準備された 6 つの領域が含まれ、グループ B には、従来の掘削によって準備された 6 つの領域が含まれていました。

すべての患者は、研究の目的とプロトコルについて知らされました。 各患者は、研究関連の手順に参加する前に、書面による情報を受け取り、書面によるインフォームドコンセントを提供しました。 登録後、データ収集と分析のために、各患者の各サイトに一意の識別番号が割り当てられました。

- 臨床手順 I - インプラント手術 すべての個人データ、医療データ、および診断データは、特定の臨床記録収集フォームを使用して記録され、モニタリングの各日にメモが作成されました。 手術の 1 週間前に、すべての患者は細菌負荷を減らすために専門的な歯のクリーニングを受けました。 すべての患者は、治療の 1 時間前に予防的抗生物質療法 (アモキシシリン 2 g とクラブラン酸)、および抗炎症療法 (ニメスリド 100 mg) を受けました。

手術およびプロテーゼのプロトコール 手術当日 (T0)、2% (w/v) のメピバカインと 1:100,000 のエピネフリンで局所麻酔を確立しました。 すべての手術は、1 人の外科医 (A.C.) によって行われました。 無歯顎隆起の角化組織内に歯槽頂中央の水平切開を作成し、舌神経または精神神経への損傷を慎重に回避しながら、頬側および舌側の両方で全層の外科的フラップを持ち上げました。 すべてのインプラントは円筒形で、先端部分のみが円錐状に進行し、ネックとボディは ZirTi (Premium、Sweden & Martina、Due Carrare、Padova、Italy) から機械加工されています。 グループ A では、メーカーのプロトコル (Piezosurgery、Mectron Medical Technology、カラスコ、イタリア) に従って、IM1、IM2、IM2-3、または IM3 ピエゾインサートを備えた圧電デバイスですべてのインプラント部位を準備しました。 1 つまたは 2 つのインプラントを各無歯顎隆線に配置し、隣接する領域に「スタディ フィクスチャ」と呼ばれる追加の 3.3 x 8.5 mm インプラントを配置しました。 グループ B では、製造元のプロトコル (Premium、Sweden & Martina、Due Carrare、Padova、Italy) に従って、すべてのインプラント部位が従来のドリルで準備されました。グループ A と同様に、1 つまたは 2 つのインプラントを各無歯顎隆線に配置し、追加の 3.3 x 8.5 mm の「スタディ フィクスチャ」を隣接領域に配置しました。

カバー スクリューを配置した後、平行な心根尖 X 線写真を撮影し、フラップを 4-0 Vicryl で縫合しました。 手術後、抗生物質療法（アモキシシリン 1 g とクラブラン酸を 8 時間ごとに 4 日間）、鎮痛療法（ニメスリド 200 mg/日を 2 日間、痛みが持続する場合は継続）、消毒療法（クロルヘキシジン 0.2% [w/v] 1日3回）が処方されました。

• 臨床手順 II - 再突入手術 手術後 28 日 (T1) に、両方のグループのすべての「スタディ フィクスチャ」を、トレフィン ドリルを使用して外植しました。 再突入手術のタイミング (T1) は、以前の動物実験 12 に基づいて 28 日に固定されました。 骨組織生検で回収されたすべてのインプラントは、組織学的分析の前に 4% (v/v) ホルマリンで固定されました (図 7,8)。
• 臨床手順 III - 補綴修復 手術後 3 か月 (T2) に、垂直方向の切開を行わずに角化組織の歯槽頂中央部の水平方向の切開を行い、水中のインプラントを露出させ、ヒーリング スクリューを配置しました。 1 か月後 (T3)、インプラント支持の金属セラミック固定修復物が患者に提供され、機能負荷が可能になりました。

組織学的、組織形態計測、および免疫組織化学的分析 標本を 4% (v/v) ホルマリンで 10 時間固定し、65 mL 85% (v/v) ギ酸、40 mL 65% (v) の混合液で 12 時間脱灰した。 /v) 硝酸、および蒸留水 895 mL。 すべてのサンプルをパラフィンに包埋し、ミクロトームを使用して厚さ 3 ～ 5 μm のスライスに切断し (Microm International GmbH、ハイデルベルク、ドイツ)、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色しました。 すべての定量的および定性的分析は、エリアベースの画像分析ソフトウェア（Dot-Slideバージョン1.2）を実行するコンピューターにリンクされたBX51顕微鏡（オリンパス、東京、日本）を使用して、単一の盲検オペレーター（A.R.）によって実行されました。 簡単に言えば、切片を高倍率 (400 倍) でスクリーニングし、生きた骨細胞を欠く壊死した骨の領域と骨再生の領域をポインターで自動的に輪郭を描き、デジタル ペルチェ冷却カメラ (Q-color 3) を使用して写真を撮りました。 ; 解像度 1,376 x 1,032 ピクセル; オリンパス)。 各サンプルの中央領域で組織学的および組織形態計測分析を実行し、Image Jソフトウェア（NIH、Bethesda、MD、USA）を使用して炎症性浸潤の存在とタイプを決定し、形態計測パラメーターを定量化しました。

さらに、実験室は、1 つのモノクローナル抗体 (クローン 1A10; Diapath S.p.A.、マルティネンゴ BG、イタリア) および SATB2 (特別な AT リッチ配列結合タンパク質) を使用して、厚さ 5 μm のパラフィン包埋サンプルを CD31 (分化クラスター 31) について免疫組織化学的に染色しました。 2) 別のモノクローナル抗体 (1:250 希釈; Sigma, St. Louis, MO, USA) と自動免疫染色装置 (Ventana BenchMark AutoStainer, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA) を使用。 適切な陽性および陰性対照が含まれていました。 対照スライドは、一次抗体なしで、または非免疫血清とともにインキュベートしました。免疫反応はごくわずかでした。

「ドット スライド」ソフトウェア (Olympus Europa SE & Co. KG、ハンブルグ、ドイツ) を実行する自動顕微鏡 (Olympus Slide Digital Virtual Microscope) を使用して、すべての CD31 および SATB2 免疫染色スライドを倍率 10 倍でスキャンし、VSI (Virtual Slide Image) ファイルを作成し、CD31 および SATB2 陽性の細胞数をカウントしました。

• データ収集 手術中およびすべての術後訪問 (T0、T1、T2、および T3) で、臨床データおよび放射線写真データが 1 人のオペレーター (E.V.) によって記録されました。 組織学的、組織形態学的、および免疫組織化学的データは、骨生検および実験室分析 (T1) の後、同じフォームに記録されました。
• 臨床データ 骨質は、インプラント骨切り術中の外科医の触覚知覚によって暫定的に次のように分類されました 16: D1 硬度はオークまたはカエデ材に類似、D2 硬度はホワイト パインまたはトウヒ材に類似、D3 硬度はバルサ材に類似、D4 硬度は類似発泡スチロールに。 すべての手術および治癒合併症は、T0 から T2 まで記録されました。 外科的合併症は 17 に等級付けされました。クラス A、皮弁の損傷 (軟部組織の穿孔または裂傷)。クラス B、神経学的損傷 (感覚異常または感覚異常);クラス C、血管損傷 (出血)。 治癒の合併症は次のとおりです。初期治癒の欠如。感染症（痛み、腫れ、および/または膿）;インプラントのオッセオインテグレーションの欠如。 インプラントの安定性は、最大 100 Ncm のトルクを測定できる手動動力測定レンチを使用して、挿入トルク (IT) (Ncm) を測定することによって評価されました。
• 検査データ

すべての標本は、壊死骨面積 (NBA%) と新しく形成された骨面積 (nFBA%) のパーセンテージ、および総骨面積 (TBA) に対するこれらの値の比率に関して完全に分析されました。 各標本について、著者は固定具の表面から生検の境界に向かって 3 つの異なる領域を特定しました。ゾーン2、織られて新しく形成された骨。そしてゾーン3、ネイティブボーン。 各ゾーンについて、以下を記録しました。

1. 絶対面積と相対面積: ゾーン面積は、総面積に対する絶対値 (mm2) と相対値 (%) で表されます。
2. 炎症性浸潤：炎症性浸潤（存在する場合）の存在と種類が分類されました。炎症を、存在しない (炎症細胞なし)、最小 (< 5 細胞/mm2)、または存在 (> 5 細胞/mm2) としてスコア付けしました。
3. CD31 (血管内皮分化および新骨形成マーカー): CD31 発現は、陽性血管数/mm2 として記録されました。

4. SATB2 (骨芽細胞分化および骨形成マーカー): SATB2 発現は、陽性スポットの数/mm2 として記録されました。

   • データ管理と統計分析

著者は、Excel のデータ収集フォームとデータ管理システム (Microsoft Excel 2011; Windows、ver. 14.0.0; Microsoft Corp.、米国ワシントン州レドモンド)。 すべてのデータは、1 人のオペレーターによって入力されました。 入力前に、すべてのデータが正確性と完全性に関して評価されました。論理的な一貫性が検証され、定量的データの範囲が計算されました。

この研究では、非劣性統計的アプローチは、グループ A (ピエゾ インプラント インサート) がグループ B (従来のインプラント ドリル) に比べて壊死率に関して劣っていないという対立仮説に基づいていました (ゾーン 1 が主要な結果です)。 、報告試験の統合基準（CONSORT声明）に従って。

ピエゾ グループの非劣性のしきい値は、平均変化のドリル グループとの差が 10% 未満です。 非劣性マージンは 4.04 (デルタ - 臨床的に許容できる最大の差) に設定されました。 さらに、CD31 および SATB2 に関連して、ゾーン 1、2、3 に対して非劣性テストが実行されました (片側信頼区間アプローチ)。

規制当局は優越性分析から非劣性分析に移行する可能性を排除しないことに基づいて21、すべての変数について優越性アプローチを使用して二次統計分析を実施しました。 帰無仮説は、実験的治療 (グループ A) が従来の治療 (グループ B) よりも優れているというものでした。 各変数について、平均、中央値、標準偏差 (SD)、四分位範囲 (IQR)、および信頼区間 (CI) 値が報告されました。 正規性の仮説は、歪度/尖度検定 (p 値 > 0.05 の場合は正規分布) で検定されました。 変数間の差の統計的有意性は、t 検定と、必要に応じて Wilcoxon マッチド ペアの符号順位検定によって評価されました。 統計学者は目が見えず、ワーキンググループ（A.F.）の外部にいました。 データ分析は、STATA / ICソフトウェア（StataCorp LLC、College Station、TX、USA）を使用して実行されました。