CAPにおけるマルチプレックスPCRの役割

肺炎は依然として罹患率と死亡率が高い世界的な健康問題です。 肺炎の原因となる微生物病原体の同定は、肺炎患者の最適な臨床管理にとって重要な分野であり、従来の微生物学的方法にとっては大きな課題です。 肺炎の分子診断検査の開発と実施は、近年の呼吸器病原体の微生物学的診断において大きな進歩となっています。 標的を絞った抗生物質の選択と、より効果的な緊張緩和と肺炎患者に対する管理の改善。

PCR は、シンプルでありながら洗練された酵素アッセイであり、複雑な DNA プールから特定の DNA 断片を増幅できます。 従来の実験室法を使用して分析するのに十分なコピーを PCR に生成するには、微量の DNA のみが必要です。 このため、PCR は高感度のアッセイです。

各 PCR アッセイには、テンプレート DNA、プライマー、ヌクレオチド、および DNA ポリメラーゼの存在が必要です。DNA ポリメラーゼは、個々のヌクレオチドを結合して PCR 産物を形成する重要な酵素です。 ヌクレオチドには、DNA に含まれる 4 つの塩基、アデニン、チミン、シトシン、グアニン (A、T、C、G) が含まれます。 これらは、結果として生じる PCR 産物を作成するために DNA ポリメラーゼによって使用される構成要素として機能します。 反応中のプライマーは、増幅される正確な DNA 産物を指定します。 プライマーは、検出および増幅されるターゲット DNA に相補的な定義された配列を持つ短い DNA フラグメントです。 これらは、DNA ポリメラーゼを構築するための拡張ポイントとして機能します。PCR には複数の利点があります。 まず、これは理解して使用するのが簡単なテクニックであり、すぐに結果が得られます。 これは、配列決定、クローニング、および分析のために特定の製品の数百万から数十億のコピーを生成する可能性がある非常に機密性の高い技術です。 PCR は貴重な技術ですが、限界もあります。 PCR は非常に感度の高い技術であるため、たとえ微量の DNA によるサンプルのいかなる汚染も、誤解を招く結果をもたらす可能性があります。 さらに、PCR 用のプライマーを設計するには、事前の配列データが必要です。 したがって、PCR は既知の病原体または遺伝子の有無を特定するためにのみ使用できます。