NAFLDおよび炎症パラメーターに対する、身体活動介入と組み合わせた地中海食の影響。 (NAFLD-POS5)

背景 慢性肝疾患は、罹患率および死亡率の主な原因の一つである。 肝疾患による死亡率の増加は、NAFLD の有病率の増加と関連しています。 「脂肪肝疾患」という用語は NAFLD の特徴であり、アルコール摂取、ウイルス感染、薬物使用とは無関係に肝細胞に 5% を超える脂肪が沈着することを指します。 脂肪肝は、NAFLD を特徴付けるすべての肝臓の変化、特に炎症と線維症の独立した危険因子です。

NAFLDの割合は、BMIの増加、年齢、脂質異常症、2型糖尿病などの代謝性疾患の存在とともに増加する傾向があります。

NAFLD の発症と進行には以下が関与します。

• インスリン抵抗性
• 全身性の炎症。
• 腸-肝臓経路
• 腸内細菌叢。 NAFLDの治療に正式に承認された薬物療法がないため、ガイドラインでは、食事と運動量の増加という量的および質的な観点から、ライフスタイルに基づいた介入を推奨しています。 食事は肝脂肪の量とインスリン抵抗性を減らすことで NAFLD を改善し、運動は体重減少を促進し、肝機能を改善します。

食事でのカロリー摂取量を制限し、アルコール摂取量を減らし、高度に加工された食品の消費量を減らすことが、NAFLD の管理において最も重要な要素であることが証明されています。

地中海食に関しては、NAFLD の改善に有効であることを証明する研究はありますが、主要栄養素の含有量に関して NAFLD に最適な地中海食モデルを検討した出版物はありません。 地中海食では、炭水化物は主に繊維が豊富で血糖指数または血糖負荷が低い食品によって供給され、脂質は主に一価不飽和脂肪酸（主にオリーブオイル）と多価不飽和脂肪酸（主にドライフルーツ）が豊富な食品によって供給されます。 、魚、野菜）。 地中海食の特徴である炭水化物と脂質の割合の変動が、NAFLD と NASH の発症に有利な影響を与えるか不利な影響を与えるかは不明です。

身体的運動により肝臓脂肪の量が減少し、この変化は体重と心肺能力の変化に関連していることが示されています。

最近の研究では、腸内細菌叢の変化が NAFLD を予防または治療するための新しい戦略となる可能性があることが示唆されています。

最近の前向き研究では、NAFLD は過敏性腸症候群 (IBS) の発症リスクが 20% 増加することを観察しました。IBS は、腹痛や腹部膨満、頻繁な下痢や長期の便秘を特徴とし、しばしば周期的に繰り返されます。

NAFLD と IBS は、炎症誘発性サイトカインの循環レベルの変化、(TNF)-α、インターロイキン (IL)-6 の増加、IL-10 の減少、腸管バリアの変化、腸運動性の変化を共有しているため、その改善を排除することはできません。 NFLD の悪化は、IBS の改善または悪化に影響を与える可能性があります。

肥満に伴う炎症は、胃腸障害の発症に重要な役割を果たしている可能性があります。 これは、生体全体に影響を及ぼす低強度の慢性状態です。 肥満は、免疫反応を活性化し、細胞の代謝経路を変化させる組織内の炎症性サイトカインの増加に関連しています。 慢性的な低度の炎症と代謝ホルモン濃度の変動は、腹腔内の脂肪組織の分布と腸内細菌叢の細菌集団の変化とともに、胃腸疾患の発症に関与する主な要因となります。 腸関門の変化によって正確に発症する病状。 腸関門の完全性を評価する場合、密着結合の機能を調節できる GI ペプチドであるゾヌリンを考慮することが重要です。

血清ゾヌリンレベルは、粘膜バリアの損傷の程度と相関することが示されています。 細胞および/またはTJの損傷は、適切なリーキーガット機能に影響を与える可能性があります。 I-FABP は、脂肪酸の輸送を担う上皮細胞に存在するサイトゾルタンパク質で、膜の完全性が失われた後に循環中に放出され、尿中に排出され、腸の上皮レベルでの損傷の非侵襲性マーカーとなります。

バリア機能の変化により、細菌とその生成物の侵入が促進される可能性があります。 リポ多糖（LPS）はバリア機能に影響を与えることがわかっています。 生理学的条件下では、LPS は無傷の上皮を通過することができませんが、上皮の完全性が低下している場合には、胃腸関門を通過することができます。

人間にとって必須アミノ酸であるトリプトファンは、共生細菌によってさまざまな誘導体に異化され、腸で吸収されて尿中に排出されます。 これらの化合物のうちの 2 つ、インドールとスカトールは、現在、それぞれ小腸と結腸の腸内細菌叢の異常を診断するために使用されています。

臨床研究のデザイン この研究は、肥満（BMI > 30.0）とNAFLD（FLI（脂肪肝指数）および/またはフィブロスキャンによって診断された）の両方の患者を対象に実施され、栄養補給と運動量の増加を伴う二群介入研究となります。 対象基準を満たす登録患者は、2 つの研究群のうちの 1 つにランダムに割り当てられ、治療群内の主要栄養素の割合に従って、人体計測学的特徴に基づいて個別の食事療法に従うよう求められます。 すべての患者は、等カロリー食のカロリーの 3/4 を摂取する低カロリー食に従うように求められます。 患者に施される運動プログラムは誰にとっても同じです。 患者募集（肥満および NAFLD の存在）、低カロリー食の種類（等カロリー食の 3/4）および運動の種類に関する共通基準を確立した後、患者は登録され、2 つの介入群にランダムに割り当てられます。 アーム 1 では、地中海食の基準を満たし、多量栄養素の割合が次のとおりである低カロリーの食事が含まれます: 総カロリーの炭水化物 50%、脂質 30%、タンパク質 20%。アーム 2 では、地中海食の基準を満たし、多量栄養素の割合が総カロリーの炭水化物 30%、脂質 50%、タンパク質 20% である低カロリーの食事が含まれます。

演習は構造化され、組織化されます。 効果的な処方には、頻度、強度、時間、種類、量、進行の観点から体系的に設計され、個人に合わせた運動プログラムが含まれます。

頻度。 身体活動（ウォーキング）は、都市部のルートで屋外で週に 3 回、連続しない日に 12 週間実施されます。

強度。 運動の強度 (最大心拍数の 50/75%) タイプ。 運動の種類は中程度の有酸素運動で、速度は時速 5 ～ 10 km です。

時間。 60 分間の外出 治療は 3 か月間続き、V0 (スクリーニング来院) に加えて、さらに 3 回の来院 (V1、V2、V3) が計画されています。

肥満（BMI > 30.0）およびNAFLDを有し、薬の服用が安定していない患者は、登録の資格がある可能性があると考えられます。

V0 では、登録可能な患者は以下の処置を受けることになります。

• 既往歴;
• フィブロスキャン、脂肪肝の程度を評価します。
• 人体計測的特徴調査
• 生体インピーダンス検査;
• DEXAによる体組成評価
• 加速度計を患者に配送し、今後 7 日間使用できるように貸し出します。
• IPAQ-SFとスポーツの歴史の完成。 包含基準が満たされる場合、登録された患者は、食事計画を受け取るために 7 日後に V1 に戻るように勧められ、胃腸症状、過敏性腸症候群 - 重症度スコアリング システム (IBS-SSS) を評価する 2 つのアンケートに記入するよう求められます。 IBS 症状に特有の、胃腸症状評価スケール (GSRS) は、胃腸症状をより一般的に評価します。 患者には、朝夕アンケート (MEQ-SA) への回答も求められます。 腸の特性は、介入期間前、介入期間中、介入後にブリストルスケールを使用して評価されます。

V1 では、患者は静脈穿刺によって血液サンプルも採取されます。 腸内微生物叢、糞便ゾヌリン、および糞便メタボロームを評価するために、2 つの便サンプルを持参するように求められます。 また、尿サンプルを 2 つ持参するように求められます。 便と尿のサンプルは訪問ごとに要求されます (V1、V2、V3)。マイクロバイオームの特性評価は、DNA メタバーコーディングおよびメタトランスクリプトミクスのアプローチを使用して実行されます。 DNA メタバーコーディング解析は、細菌の 16S rRNA の V5-V6 超可変領域を使用して実行されます (MiSeq-Illumina プラットフォーム)。 DNA メタバーコーディング分析で重要であることが判明したサンプルは、メタトラクリプトミック分析 (NextSeq 500 プラットフォーム - イルミナ) に供されます。 メタゲノムおよびメタトラクリプトミック データは、バイオインフォマティクス パイプラインを使用して分析されます。

メタボロミクス検査は便と尿のサンプルに対して行われます。 バリアペプチドアッセイ: 糞便および血清のゾヌリン、ならびに血清中の I-FABP、DAO、および循環 LPS のアッセイは、市販の ELISA 法を使用して実行されます。

尿中のインドールおよびスカトールの投与量: インドールは比色分析法で投与され、スカトールは早朝に採取された尿の蛍光検出によるクロマトグラフィー法で測定されます。 尿中のインドールとスカトールの値が正常の閾値を超えると、それぞれ発酵性 (小腸内) と腐敗性 (結腸内) の腸内細菌叢異常が発現します。

V1 の間、患者には次回の来院まで、およびその後の来院まで記入するための消化器症状日記も渡されます。

さらに、次のものが追加されます。

• 筋力測定テスト：ハンドグリップテスト；
• 身体能力を測定するためのテスト: SPPB;
• 動的バランステスト: (TGUG、Time Get Up and Go テスト)
• 2kmの歩行テスト。
• シットアンドリーチテスト 最後に、不安、うつ病、ストレスのレベルを評価するために 4 つのアンケートが実施されます。 具体的には、病院不安・うつ病尺度（HADS）と知覚ストレス尺度（PSS）、ロッテル・ローカス・オブ・コントロール尺度（Q_LOC）、および遅延満足度目録（DGI）です。

患者は 45 日後 (V2) と 90 日後 (V3) に回収されます。

これらの訪問中、彼らは次のことを課せられます。

• 静脈穿刺による採血。
• GSRSアンケート;
• IBS-SSS アンケート。
• 人体計測的特徴の検出。
• 生体インピーダンス検査

V3 単独の場合、患者は次のような症状も受けます。

• HADS アンケート (病院の不安とうつ病の尺度) への回答。
• PSS (知覚ストレススケール) アンケートへの回答。
• Rotter の制御スケール (Q_LOC) アンケートの完了
• 遅延満足度目録 (DGI) アンケートへの回答。
• 筋力を測定するテスト HandGripp Test;
• 身体能力を測定するためのテスト: SPPB;
• 動的バランステスト: (TGUG、Time Get Up and Go テスト)
• 2kmの歩行テスト。
• シットアンドリーチテスト V1、V2、V3 検査で採取された血液サンプルは、ルーチンの血液化学パラメータおよび栄養、代謝および心血管リスクパラメータ（血糖、インスリン糖化ヘモグロビン、トリグリセリド、総コレステロール、HDL および LDL コレステロール）の投与に使用されます。 、トランスアミナーゼ（ASTおよびALT）、γGT、クレアチニン血症、ウリシン血症、血球数、フェリチン、25-OH-ビタミンD、カルシウム血症、IGF-I、TSH、FT3、FT4、proBNP）。 その結果に基づいて、人体測定（BMI、腹囲）および血液化学（トリグリセリドおよびγGT）パラメータに基づいて、インスリン抵抗性の程度（HOMA指数）および肝脂肪変性FLIの程度（脂肪肝指数）が計算されます。）肝線維症（FIB-4）。

主要なアディポカイン (レプチン、アディポンセチン、RBP-4、レジスチン、ビスファチン、ケマリン)、主要な肝成長因子 (HGF、フェチュイン A、FGF21、FGF19、PAI-1)、主要な炎症促進性サイトカイン (高感度 C 反応性)タンパク質、IL-6、IL-8、TNF-α）および抗炎症性サイトカイン（IL-4）も測定されます。