Invloed van een mediterraan dieet gecombineerd met een fysieke activiteitsinterventie op NAFLD en ontstekingsparameters. (NAFLD-POS5)

ACHTERGROND Chronische leverziekten behoren tot de belangrijkste oorzaken van morbiditeit en mortaliteit. Een toenemende sterfte aan leverziekten is in verband gebracht met een toenemende prevalentie van NAFLD. De term 'leververvetting' is het kenmerk van NAFLD en verwijst naar een vetophoping in de levercellen van meer dan 5% die geen verband houdt met alcoholinname, virale infecties of drugsgebruik. Hepatische steatose is een onafhankelijke risicofactor voor alle leververanderingen die NAFLD karakteriseren, en in het bijzonder ontstekingen en fibrose.

Het percentage NAFLD heeft de neiging toe te nemen met toenemende BMI, leeftijd en aanwezigheid van stofwisselingsziekten zoals dyslipidemie en diabetes type 2.

De volgende zijn betrokken bij het ontstaan ​​en de progressie van NAFLD:

• insuline-resistentie
• gegeneraliseerde ontsteking;
• darm-lever trajecten
• darmmicrobiota. Bij gebrek aan officieel goedgekeurde farmacologische therapieën voor de behandeling van NAFLD bevelen de richtlijnen op levensstijl gebaseerde interventies aan, zowel in kwantitatieve als kwalitatieve termen op het gebied van voeding en meer lichaamsbeweging. Dieet kan NAFLD verbeteren door de hoeveelheid levervet en de insulineresistentie te verminderen, terwijl lichaamsbeweging gewichtsverlies bevordert en de leverfunctie verbetert.

Het beperken van de calorie-inname in diëten, het verminderen van de alcoholconsumptie en het verminderen van de consumptie van sterk bewerkte voedingsmiddelen zijn de belangrijkste factor gebleken bij de behandeling van NAFLD.

Wat betreft het mediterrane dieet: hoewel er onderzoeken zijn die de effectiviteit ervan bij het verbeteren van NAFLD aantonen, zijn er geen publicaties die hebben onderzocht welk Mediterraan dieetmodel het beste is voor NAFLD met betrekking tot het gehalte aan macronutriënten. In het mediterrane dieet worden koolhydraten voornamelijk geleverd door voedingsmiddelen die rijk zijn aan vezels en met een lage glycemische index of een lage glycemische lading, terwijl lipiden voornamelijk worden geleverd door voedingsmiddelen die rijk zijn aan enkelvoudig onverzadigde vetzuren (vooral olijfolie) en meervoudig onverzadigde vetzuren (voornamelijk gedroogd fruit). , vis en groenten). Het is niet bekend of variaties in het aandeel koolhydraten en lipiden, die kenmerkend zijn voor het mediterrane dieet, de ontwikkeling van NAFLD en NASH gunstig of ongunstig kunnen beïnvloeden.

Het is aangetoond dat lichamelijke inspanning de hoeveelheid levervet vermindert en deze verandering gaat gepaard met veranderingen in het lichaamsgewicht en de cardiorespiratoire capaciteit.

Recente studies suggereren dat veranderingen in de darmmicrobiota een nieuwe strategie kunnen vertegenwoordigen om NAFLD te voorkomen of te behandelen.

Uit een recent prospectief onderzoek is gebleken dat NAFLD geassocieerd is met een 20% verhoogd risico op het ontwikkelen van het prikkelbare darm syndroom (IBS), een ziekte die wordt gekenmerkt door buikpijn en een opgeblazen gevoel, frequente diarree of langdurige obstipatie, vaak afwisselend periodiek.

Omdat NAFLD en PDS veranderingen gemeen hebben in de circulerende niveaus van pro-inflammatoire cytokines, verhoogde (TNF)-α, interleukine (IL)-6 en verlaagde IL-10, veranderingen in de darmbarrière en veranderingen in de darmmotiliteit, kan men die verbetering niet uitsluiten. of verslechtering van NFLD kan de verbetering of verslechtering van IBS beïnvloeden.

Ontstekingen geassocieerd met obesitas kunnen op hun beurt een belangrijke rol spelen bij de ontwikkeling van gastro-intestinale stoornissen. Het is een chronische toestand van lage intensiteit waarbij het hele organisme betrokken is. Obesitas houdt verband met een toename van inflammatoire cytokines in weefsels die immuunreacties activeren, waardoor de cellulaire metabolische routes veranderen. Chronische ontstekingen met lage intensiteit en de variatie in de concentratie van metabolische hormonen, samen met de verdeling van vetweefsel in de buikholte en veranderingen in de bacteriepopulaties van de darmmicrobiota, vertegenwoordigen de belangrijkste factoren die betrokken zijn bij de ontwikkeling van gastro-intestinale ziekten. Pathologieën die zich juist ontwikkelen door veranderingen van de darmbarrière. Bij het evalueren van de integriteit van de darmbarrière is het belangrijk om zonuline in overweging te nemen, een GI-peptide dat in staat is de functionaliteit van tight juncties te moduleren.

Er is aangetoond dat serumzonulineniveaus correleren met de mate van schade aan de mucosale barrière. Cellulaire en/of TJ-schade kan een goede lekkende darmfunctie beïnvloeden. I-FABP's zijn cytosolische eiwitten die aanwezig zijn in epitheelcellen en verantwoordelijk zijn voor het transport van vetzuren en die in de bloedsomloop worden vrijgegeven na het verlies van membraanintegriteit en worden geëlimineerd in de urine en vertegenwoordigen een niet-invasieve marker van schade op epitheliaal niveau in de darmen.

Veranderingen in de barrièrefunctie kunnen de toegang van bacteriën en hun producten bevorderen. Er is vastgesteld dat lipopolysacharide (LPS) de barrièrefunctie beïnvloedt. Onder fysiologische omstandigheden is LPS niet in staat intact epitheel te passeren, maar in aanwezigheid van verminderde epitheliale integriteit kan het wel de maag-darmbarrière passeren.

Tryptofaan, een essentieel aminozuur voor de mens, wordt door commensale bacteriën gekataboliseerd in verschillende derivaten, die door de darm worden opgenomen en via de urine worden geëlimineerd. Twee van deze verbindingen, indol en skatol, worden momenteel gebruikt om respectievelijk dysbiose van de dunne darm en de dikke darm te diagnosticeren.

KLINISCH ONDERZOEKSONTWERP Het onderzoek, uitgevoerd bij patiënten met zowel obesitas (BMI > 30,0) als NAFLD (gediagnosticeerd door FLI (fatty lever index) en/of Fibroscan, zal een tweearmig interventioneel onderzoek zijn, met voeding en verhoogde lichaamsbeweging. De ingeschreven patiënten, die aan de inclusiecriteria voldoen, worden willekeurig toegewezen aan een van de twee onderzoeksarmen en zullen worden gevraagd een gepersonaliseerd dieet te volgen op basis van antropometrische kenmerken, waarbij het percentage macronutriënten in hun arm wordt gevolgd. Aan alle patiënten wordt gevraagd een caloriearm dieet te volgen, met ¾ van de calorieën van een isocalorisch dieet. Het oefenprogramma dat aan patiënten wordt gegeven, zal voor iedereen hetzelfde zijn. Nadat gemeenschappelijke criteria zijn vastgesteld voor de rekrutering van patiënten (aanwezigheid van obesitas en NAFLD), het type caloriearm dieet (3/4 van een isocalorisch dieet) en het type lichaamsbeweging, zullen patiënten worden geïncludeerd en willekeurig worden toegewezen aan de twee interventiearmen. Arm 1 omvat een caloriearm dieet dat voldoet aan de criteria van het mediterrane dieet, met het volgende percentage macronutriënten: koolhydraten 50% van de totale calorieën, lipiden 30%, eiwitten 20%; Arm 2 omvat een caloriearm dieet dat voldoet aan de criteria van het mediterrane dieet, met het volgende percentage macronutriënten: koolhydraten 30% van de totale calorieën, lipiden 50%, eiwitten 20%.

De oefening zal gestructureerd en georganiseerd zijn. Een effectief recept omvat een oefenprogramma dat systematisch is ontworpen en gepersonaliseerd in termen van frequentie, intensiteit, tijd, type, volume en progressie.

Frequentie. Fysieke activiteit (wandelen) wordt gedurende 12 weken 3 keer per week, op niet-opeenvolgende dagen, buiten uitgevoerd op een stedelijke route.

Intensiteit. De intensiteit van de oefening (50/75% van de maximale hartslag). Type. Het type oefening is matig aëroob met een snelheid variërend van 5 tot 10 km/u.

Tijd. Uitje van 60 minuten De behandeling duurt 3 maanden en naast het V0 (Screening Visit) staan ​​er nog 3 bezoeken gepland (V1-V2-V3).

Patiënten met obesitas (BMI > 30,0) en NAFLD, die niet stabiel medicijnen gebruiken, komen mogelijk in aanmerking voor deelname.

Bij V0 zullen potentieel inschrijfbare patiënten het volgende ondergaan:

• Anamnese;
• Fibroscan, om de mate van hepatische steatose te beoordelen;
• Overzicht van antropometrische kenmerken
• Bio-impedantieonderzoek;
• Beoordeling van de lichaamssamenstelling door DEXA
• Levering van de versnellingsmeter aan de patiënt, in bruikleen voor gebruik gedurende de komende 7 dagen.
• Voltooiing van IPAQ-SF en sportgeschiedenis. Als aan de inclusiecriteria wordt voldaan, worden de ingeschreven patiënten uitgenodigd om na 7 dagen terug te komen voor V1 om het dieetplan te ontvangen en wordt hen gevraagd om twee vragenlijsten in te vullen waarin gastro-intestinale symptomen worden beoordeeld, het Prikkelbare Darm Syndroom - Severity Scoring System (IBS-SSS) , specifiek voor PDS-symptomen, en Gastrointestinal Symptom Rating Scale (GSRS), die gastro-intestinale symptomen in het algemeen evalueert. Patiënten zal ook worden gevraagd de Morningness-Eveningness Questionnaire (MEQ-SA) in te vullen. Voor, tijdens en na de interventieperiode zullen darmkenmerken worden beoordeeld met behulp van de Bristol-schaal.

Bij V1 zullen patiënten ook een bloedmonster ondergaan via venapunctie. Er zal hen worden gevraagd twee ontlastingsmonsters mee te nemen voor de evaluatie van de darmmicrobiota, fecale zonuline en fecaal metaboloom. Ook wordt u gevraagd twee urinemonsters mee te nemen. Bij elk bezoek zullen ontlastings- en urinemonsters worden opgevraagd (V1-V2-V3). De karakterisering van het microbioom zal worden uitgevoerd met behulp van een DNA-metabarcodering en metatranscriptomics-aanpak. DNA-metabarcoding-analyse zal worden uitgevoerd met behulp van de V5-V6 hypervariabele regio's van 16S-rRNA voor bacteriën (MiSeq-Illumina-platform). De monsters die significant blijken te zijn in de DNA-metabarcoding-analyse zullen worden onderworpen aan metatracryptomische analyse (NextSeq 500-platform - Illumina). Metagenomische en metatracryptomische gegevens zullen worden geanalyseerd met behulp van bio-informaticapijplijnen.

Metabolomics-onderzoeken zullen worden uitgevoerd op ontlasting- en urinemonsters. Barrièrepeptidetest: testen van fecaal en serum Zonuline, evenals I-FABP, DAO en circulerende LPS in serum zullen worden uitgevoerd met behulp van commercieel verkrijgbare ELISA-methoden.

Dosering van indool en skatol in urine: indool wordt gedoseerd met een colorimetrische analytische methode, terwijl skatol wordt bepaald met een chromatografische methode met fluorometrische detectie op urine die vroeg in de ochtend is verzameld. Wanneer de indool- en skatolwaarden in de urine de normale drempel overschrijden, brengen ze respectievelijk fermentatieve (in de dunne darm) en bederfelijke (in de dikke darm) dysbiose tot uitdrukking.

Tijdens V1 krijgen patiënten ook een maag-darmsymptoomdagboek om in te vullen tot het volgende bezoek, maar ook voor volgende bezoeken.

Daarnaast zal er zijn:

• Meettest spierkracht: HandGripp-test;
• Test voor het meten van fysieke prestaties: SPPB;
• Dynamische balanstest: (TGUG, Time Get Up and Go-test)
• Looptest van 2 km.
• Sit and Reach-test Ten slotte zullen vier vragenlijsten worden afgenomen om de niveaus van angst, depressie en stress te beoordelen. In het bijzonder de Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS) en Perceived Stress Scale (PSS), de Rotter Locus of Control Scale (Q_LOC) en de Delaying Gratification Inventory (DGI).

Patiënten worden na 45 dagen (V2) en 90 dagen (V3) teruggeroepen.

Tijdens deze bezoeken worden zij onderworpen aan:

• bloedafname door venapunctie;
• GSRS-vragenlijst;
• IBS-SSS-vragenlijst;
• Detectie van antropometrische kenmerken;
• Bio-impedantietest

Alleen al in V3 zullen patiënten ook het volgende ondergaan:

• Invullen van de HADS-vragenlijst (Hospital Anxiety and Depression Scale);
• Invullen van de PSS-vragenlijst (Perceived Stress Scale);
• Invullen van Rotter's locus of control scale (Q_LOC) vragenlijst
• Invullen van de Delaying Gratification Inventory (DGI)-vragenlijst.
• Test voor het meten van spierkracht HandGripp Test;
• Test voor het meten van fysieke prestaties: SPPB;
• Dynamische balanstest: (TGUG, Time Get Up and Go-test)
• Looptest van 2 km.
• Zit- en reiktest Het bloedmonster dat bij de V1-V2-V3-onderzoeken wordt afgenomen, wordt gebruikt voor de dosering van routinematige hematochemische parameters en voedings-, metabolische en cardiovasculaire risicoparameters (glycemie, insuline geglyceerd hemoglobine, triglyceriden, totaal cholesterol, HDL- en LDL-cholesterol). , transaminasen (AST en ALT), γGT, creatininemie, uricinemie, bloedbeeld, ferritine, 25-OH-vitamine D, calciëmie, IGF-I, TSH, FT3, FT4, proBNP). Op basis van de resultaten zal de mate van insulineresistentie (HOMA-index) en de mate van hepatische steatose FLI (leververvettingsindex) worden berekend, op basis van antropometrische (BMI, buikomtrek) en hematochemische (triglyceriden en γGT) parameters. en leverfibrose (FIB-4).

Belangrijke adipokines (leptine, adiponcetine, RBP-4, resistine, visfatin, chemerine), belangrijke hepatische groeifactoren (HGF, Fetuin-A, FGF21, FGF19, PAI-1), belangrijke pro-inflammatoire cytokines (hooggevoelige C-reactieve eiwit, IL-6, IL-8 en TNF-α) en ontstekingsremmende cytokines (IL-4) zullen ook gemeten worden.