原因不明の不妊症のカップルにおける体外受精/ICSIの結果改善におけるレスベラトロールの作用の可能性 (RECOS)

最新の推定に基づくと、世界の生涯不妊症有病率は 17.5% であり、これは約 6 人に 1 人が人生のある段階で不妊症を経験していることを意味します。

従来の診断調査は改善されているにもかかわらず、現在でもカップルの不妊症の原因の約 25% が未解明のままです。

実際、人間の生殖プロセスのいくつかの重要な瞬間は研究できず、したがって特定の生殖異常は診断されないままです。 卵胞の形成、卵母細胞の発育、胚の着床のプロセスを考えただけでも、まさに「生物学の謎」です。

これらのさまざまな生物学的側面の中でも、卵母細胞の品質が、IVF/ICSI 後の臨床妊娠の主な予測因子であることが知られています。 実際、卵母細胞の成熟プロセスは胚の発育、ひいては胚の生存率に影響を与えます。 良質の卵母細胞を決定するメカニズムは不明ですが、それでも、エネルギー依存のプロセスが卵母細胞の発生において主要な役割を果たしていると考えられています。 これらのプロセスはミトコンドリアによって媒介され、卵母細胞におけるミトコンドリアの濃度は人体の他の細胞の中で最も高くなります。 卵母細胞の核および細胞質の成熟は、顆粒膜細胞 (GC) の成長と厳密に関連しています。 これらの細胞は卵母細胞を取り囲み、ギャップ結合およびパラクリン因子を介して卵母細胞自体との機能的な双方向クロストークを確立します。 卵胞形成中に、GC はグルコースの消費を増加させ、グルコースをピルビン酸に代謝して卵母細胞に渡します。 これらすべてが、卵母細胞自体へのエネルギー供給の増加を決定し、ATP産生の増加によって実証され、卵母細胞が受精と、周知のように完全に卵母細胞に依存する胚発生の最初の段階に備えることができるようになります。

レスベラトロールは、細胞機能のこの領域に適合できるようです。 これは食品、植物、飲料に広く存在する天然のポリフェノールであり、SIRT1 依存的な方法で抗アポトーシス効果を通じて GC の増殖を誘導すると考えられます。 さらに、GC では、レスベラトロールは酸化ストレスを軽減し、ミトコンドリア生合成と細胞内 ATP レベルを増加させ、卵母細胞の成長に有利な高いエネルギー利用可能性を決定します。 レスベラトロールは、ラット顆粒膜細胞において、血管新生と血管透過性に関係する血管内皮増殖因子（VEGF）の発現を減少させるようであり、卵巣に関連する生命を脅かす状態である卵巣過剰刺激症候群（OHSS）のリスクに対する保護効果を示す可能性があります。 VEGF が主なメディエーターである刺激。

最近のランダム化臨床試験では、夫婦不妊症に悩まされICSIを受けている女性を対象に、レスベラトロールによる3か月の前治療を行うと、回収され成熟した卵子の数が増加し、受精率が高まり、1個あたりの胚盤胞の数が増加することが示された。臨床上の妊娠率や出生率に​​有意な影響が観察されなかったとしても、患者数が増加し、患者あたりの余剰凍結保存胚の数が増加しました。

この最後の証拠に基づいて、卵胞形成と卵母細胞の発育におけるレスベラトロールの潜在的な有益な効果を考慮して、研究者らは、レスベラトロールの生物学的転帰と臨床転帰の比較を目的とする無作為化対照二重盲検単施設試験を設計した。原因不明の不妊症で体外受精/ICSIサイクルを受けている女性へのサプリメント。

研究者の知る限り、この不妊症と診断されたカップルを考慮した体外受精/ICSIの結果に対するレスベラトロールの潜在的な影響についての研究は発表されていない。卵胞形成と卵母細胞の成熟のプロセスは制御できないため、この統合的治療の自然な標的である可能性がある。定期的に調査されています。 これらの生物学的メカニズムの変化は、原因不明の不妊症の一部の認識されていない原因である可能性があり、レスベラトロールによる治療は、研究に登録された患者に重大な臨床的改善をもたらす可能性があります。

より詳細には、この無作為化、プラセボ対照、二重盲検、単一施設試験の主な目的は、制御された卵巣刺激（COS）を受けている原因不明の不妊症患者において、より良好な卵胞発育を決定する上でのレスベラトロールの考えられる効果を評価することである。 ）体外受精/顕微授精の場合。

正常な卵巣予備能を持つ不妊女性患者は、臨床実践に従って治療され、期待される（AFCによる）卵母細胞と回収された卵母細胞との違いが、レスベラトロールの使用に関連して評価されます。

設計と方法論:

原因不明の不妊症に悩まされているカップルが登録されます。 原因不明の不妊症の定義は次のとおりです。卵巣機能、卵管、子宮、子宮頸部、骨盤が明らかに正常で、年齢が 40 歳以下で、適切な性交頻度を持つカップルの不妊症。そして明らかに正常な精巣機能、生殖器と尿路の構造、そして正常な射精物です。

すべての患者は、無治療群（プラセボ群 - 葉酸のみ）とレスベラトロール治療群（研究群）に1:1の比率で無作為に割り付けられます。 ソフトウェアによって生成されたランダム化リストは、研究に直接関与していない看護師によって管理され、治療期間中ずっと患者に薬が投与されます。 医師も発生学者も患者も薬（葉酸またはレスベラトロール）の箱の中身を知りません（二重盲検設計）。

治療期間は、刺激開始の少なくとも65日前（前胞状卵胞の段階から）から採卵日までとなります。

すべての AFC 測定は、刺激開始前の最後の 3 か月のうちの 1 つに、サイクルの 2 日目から 6 日目まで同じ 2 人の医師によって実行されます。 2 ～ 10 mm の範囲のすべての卵胞が記録されます (2 ～ 5 mm の範囲の卵胞と 6 ～ 10 mm の範囲の卵胞を区別します)。

ＣＯＳは、ｒＦＳＨ（Ｇｏｎａｌ Ｆ；Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ、Ｉｔａ​​ｌｙ）の毎日の注射によって実施され、周期の２日目／３日目に開始され、卵母細胞成熟の誘導の日まで継続される。 下垂体抑制は、GnRHアンタゴニストのガニレリックス(1日あたり0.25mg、Fyremadel、Ferring S.p.A.)の投与によって得られ、卵巣刺激の6日目から卵母細胞成熟の誘導の日まで開始される。

卵胞の発育は、5日間の治療後に監視され、その後は少なくとも2日ごとに監視されます。 モニタリングは以下から構成されます: a) 卵胞の数と最大直径、および子宮内膜の厚さを評価するための経膣超音波スキャン。 b) 卵母細胞成熟の誘導当日のみの 17β-エストラジオール、LH およびプロゲステロンの投与量。 モニタリングのための経膣超音波検査は同じ 2 人の医師によって行われます。

高度に精製された尿中 hCG (Gonasi HP、IBSA Farmaceutici、イタリア) 10,000 IU を皮下または筋肉内に使用し、直径 16 mm 以上の卵胞が 2 個以上観察された場合に最終的な卵母細胞の成熟を誘導し、35.5 ～ 36 時間投与します。計画的な採卵の前に。 OHSS リスクの場合、GnRH アゴニスト (トリプトレリン、デカペプチル 0.1 mg、Ipsen S.p.A.、イタリア) 0.3 mg を皮下投与することで最終的な卵母細胞の成熟が得られ、上記と同じ方法で採卵が計画されます。この場合、得られたすべての胚は凍結保存されます。

最終的な卵母細胞成熟を引き起こすこれら 2 つの異なる様式を比較しても、回収された卵母細胞の数に差は示されませんでした (Haahr et al., 2017)。

少なくとも 2 個の 16 mm 以上の卵胞に到達できない場合、卵子の成熟のトリガーは達成されません。

卵子の採取は、最高レベルの専門知識を持つ2人の医師によって行われます。

新鮮な胚の移植は、卵母細胞を回収してから2、3、または5日目に実行されます。

OHSS リスクの場合、および/または hCG 投与当日のプロゲステロン上昇 (1.5 ng/ml 以上) の場合、すべての胚は凍結保存されます。 すべての凍結胚を持つカップルがエンドポイントの分析の対象となります。

サンプルサイズの計算:

本研究プロトコルの目的を追求するために、必要な参加者の最小数を決定するために先験的なサンプルサイズの計算が行われました。 文献で入手可能なデータは、平均で 1.5 の違いがあることを示しています。レスベラトロールで治療したグループと対照グループの間の排卵前卵胞（16mm以上）の数は、研究グループを支持して平均15％増加しました。 したがって、10% という控えめな差を考慮すると、これは d=0.80 という大きな効果量、95% の検出力 (1-β)、0.05 のアルファ、両側 t 検定、および比率に相当します。 2 つのグループ間の主要結果の有意差を検証するには、合計 90 人の被験者 (各グループあたり 45 人) が必要となります。