Mögliche Wirkung von Resveratrol bei der Verbesserung der Ergebnisse von IVF/ICSI bei Paaren mit ungeklärter Unfruchtbarkeit (RECOS)

Nach den letzten Schätzungen liegt die weltweite Lebenszeitprävalenz von Unfruchtbarkeit bei 17,5 %, was bedeutet, dass etwa jeder sechste Mensch irgendwann in seinem Leben einmal Unfruchtbarkeit erlebt hat.

Trotz einer Verbesserung der konventionellen Diagnostik sind auch heute noch etwa 25 % der Ursachen für Paarunfruchtbarkeit ungeklärt.

Tatsächlich können mehrere entscheidende Momente des menschlichen Fortpflanzungsprozesses nicht untersucht werden und daher bleiben spezifische Fortpflanzungsveränderungen unerkannt. Denken Sie nur an den Prozess der Follikulogenese der Eierstöcke, der Eizellenentwicklung und der Embryonalimplantation – alles echte „biologische Geheimnisse“.

Unter diesen verschiedenen biologischen Aspekten ist bekannt, dass die Eizellenqualität der wichtigste Prädiktor für eine klinische Schwangerschaft nach IVF/ICSI ist. Tatsächlich beeinflusst der Reifungsprozess der Eizellen die Entwicklung des Embryos und damit die Lebensfähigkeit des Embryos. Obwohl die Mechanismen, die eine gute Qualität der Eizelle bestimmen, nicht bekannt sind, wird angenommen, dass energieabhängige Prozesse eine wichtige Rolle bei der Entwicklung der Eizelle spielen. Diese Prozesse werden durch Mitochondrien vermittelt, deren Konzentration in Eizellen unter den anderen Zellen des menschlichen Körpers am höchsten ist. Die nukleare und zytoplasmatische Reifung der Eizelle ist eng mit dem Wachstum von Granulosazellen (GCs) verbunden. Diese Zellen umgeben die Eizelle und stellen über Gap Junctions und parakrine Faktoren eine funktionelle bidirektionale Wechselwirkung mit der Eizelle selbst her. Während der Follikulogenese erhöhen GCs den Glukoseverbrauch und wandeln Glukose in Pyruvat um, das zur Eizelle gelangt. All dies führt zu einer Erhöhung der Energieversorgung der Eizelle selbst, was sich in der Steigerung der ATP-Produktion zeigt, die es dieser Zelle ermöglicht, sich auf die Befruchtung und die ersten Stadien der Embryonalentwicklung vorzubereiten, die bekanntermaßen vollständig von der Eizelle abhängt.

Resveratrol scheint in diesen Bereich der Zellfunktion passen zu können. Es ist ein natürliches Polyphenol, das in Lebensmitteln, Pflanzen und Getränken weit verbreitet ist und die GC-Proliferation durch eine antiapoptotische Wirkung in SIRT1-abhängiger Weise zu induzieren scheint. Darüber hinaus reduziert Resveratrol in GCs den oxidativen Stress, erhöht die Biogenese der Mitochondrien und den intrazellulären ATP-Spiegel und sorgt so für eine hohe Energieverfügbarkeit, die das Eizellenwachstum begünstigt. Resveratrol scheint in Granulosazellen von Ratten die Expression des vaskulären endothelialen Wachstumsfaktors (VEGF) zu reduzieren, der an der Angiogenese und der Gefäßpermeabilität beteiligt ist, und zeigt möglicherweise eine schützende Wirkung auf das Risiko des ovariellen Überstimulationssyndroms (OHSS), einer lebensbedrohlichen Erkrankung im Zusammenhang mit Eierstöcken Stimulation, deren VEGF der Hauptmediator ist.

Eine kürzlich durchgeführte klinische randomisierte Studie zeigte, dass eine dreimonatige Vorbehandlung mit Resveratrol bei Frauen, die von Paarunfruchtbarkeit betroffen waren und sich einer ICSI unterzogen, mit einer höheren Anzahl entnommener und reifer Eizellen, einer höheren Befruchtungsrate und einer höheren Anzahl von Blastozysten pro Jahr verbunden war Patientin und eine höhere Anzahl überzähliger kryokonservierter Embryonen pro Patientin, auch wenn bei klinischen Schwangerschaften und Lebendgeburtenraten kein signifikanter Effekt beobachtet wurde.

Basierend auf diesen letzten Beweisen und angesichts der potenziellen positiven Wirkungen von Resveratrol auf die Follikulogenese und die Eizellenentwicklung konzipierten die Forscher eine randomisierte, kontrollierte, doppelblinde, monozentrische Studie, deren Ziel der Vergleich der biologischen und klinischen Ergebnisse von Resveratrol sein wird Nahrungsergänzungsmittel für Frauen, die sich wegen ungeklärter Unfruchtbarkeit einem IVF/ICSI-Zyklus unterziehen.

Nach Kenntnis der Forscher wurde keine Studie über die mögliche Wirkung von Resveratrol auf die IVF/ICSI-Ergebnisse bei Paaren mit dieser Unfruchtbarkeitsdiagnose veröffentlicht, die das natürliche Ziel dieser integrativen Behandlung sein könnte, da der Prozess der Follikulogenese und Eizellenreifung nicht möglich ist routinemäßig untersucht. Eine Veränderung dieser biologischen Mechanismen könnte die unerkannte Ursache für einen Teil der ungeklärten Unfruchtbarkeit sein und die Behandlung mit Resveratrol könnte zu einer signifikanten klinischen Verbesserung für die in die Studie aufgenommenen Patienten führen.

Genauer gesagt wird das Hauptziel dieser randomisierten, placebokontrollierten, doppelblinden, monozentrischen Studie die Bewertung der möglichen Wirkung von Resveratrol bei der Bestimmung einer besseren Follikelentwicklung bei Patientinnen mit ungeklärter Unfruchtbarkeit sein, die sich einer kontrollierten Eierstockstimulation (COS) unterziehen ) für IVF/ICSI.

Unfruchtbare Patientinnen mit normaler Eierstockreserve werden gemäß der klinischen Praxis behandelt und der Unterschied zwischen erwarteten (durch AFC) und entnommenen Eizellen wird in Bezug auf die Verwendung von Resveratrol beurteilt.

DESIGN UND METHODIK:

Eingeschrieben werden Paare, die von ungeklärter Unfruchtbarkeit betroffen sind. Die Definition von ungeklärter Unfruchtbarkeit lautet wie folgt: Unfruchtbarkeit bei Paaren mit scheinbar normaler Funktion der Eierstöcke, Eileiter, Gebärmutter, Gebärmutterhals und Becken, Alter ≤ 40 Jahre und mit ausreichender Koitalfrequenz; und offenbar normale Hodenfunktion, Urogenitalanatomie und ein normales Ejakulat.

Alle Patienten werden für keine Behandlung (Placebogruppe – nur Folsäure) und für die Behandlung mit Resveratrol (Studiengruppe) im Verhältnis 1:1 randomisiert. Die von einer Software erstellte Randomisierungsliste wird von einer nicht direkt an der Studie beteiligten Krankenschwester verwaltet und gibt den Patienten die Medikamente für die gesamte Behandlungsdauer. Weder die Ärzte/Embryologen noch die Patienten erfahren den Inhalt der Medikamentenschachteln (Folsäure oder Resveratrol) (Doppelblind-Design).

Die Behandlungsdauer beträgt mindestens 65 Tage vor Beginn der Stimulation (ab dem Stadium der präantralen Follikel) und bis zum Tag der Eizellentnahme.

Alle AFC-Bestimmungen werden vom 2. bis 6. Tag des Zyklus in einem der letzten drei Monate vor Beginn der Stimulation von denselben beiden Ärzten durchgeführt. Es werden alle Follikel im Bereich von 2 bis 10 mm erfasst (unterscheidet zwischen Follikeln im Bereich von 2 bis 5 mm und solchen im Bereich von 6 bis 10 mm).

COS wird durch tägliche Injektionen von rFSH (Gonal F; Merck Serono, Italien) durchgeführt und am 2./3. Tag des Zyklus begonnen und bis zum Tag der Induktion der Eizellenreifung fortgesetzt. Die Unterdrückung der Hypophyse wird durch die Verabreichung des GnRH-Antagonisten Ganirelix (0,25 mg pro Tag, Fyremadel, Ferring S.p.A.) erreicht, die ab dem 6. Tag der Eierstockstimulation bis zum Tag der Induktion der Eizellenreifung begonnen wird.

Die Follikelentwicklung wird nach 5 Behandlungstagen und danach mindestens alle 2 Tage überwacht. Die Überwachung umfasst: a) eine transvaginale Ultraschalluntersuchung zur Beurteilung der Anzahl und des maximalen Durchmessers der Eierstockfollikel sowie der Dicke des Endometriums; b) die Dosierung von 17β-Östradiol, LH und Progesteron nur am Tag der Induktion der Eizellenreifung. Der transvaginale Ultraschall zur Überwachung wird von denselben beiden Ärzten durchgeführt.

Hochgereinigtes Urin-hCG (Gonasi HP, IBSA Farmaceutici, Italien) 10.000 IE, subkutan oder intramuskulär, wird verwendet, um die endgültige Reifung der Eizelle zu induzieren, wenn zwei oder mehr Follikel mit einem Durchmesser von ≥ 16 mm beobachtet werden, und wird 35,5–36 Stunden lang verabreicht vor der geplanten Eizellentnahme. Im Falle eines OHSS-Risikos wird die endgültige Reifung der Eizellen durch die Verwendung eines GnRH-Agonisten (Triptorelin, Decapeptyl 0,1 mg, Ipsen S.p.A., Italien) 0,3 mg subkutan erreicht, und die Eizellentnahme wird mit den gleichen Modalitäten wie oben beschrieben geplant; In diesem Fall werden alle gewonnenen Embryonen kryokonserviert.

Beim Vergleich dieser beiden unterschiedlichen Modalitäten zur Auslösung der endgültigen Eizellenreifung konnte kein Unterschied in der Anzahl der entnommenen Eizellen festgestellt werden (Haahr et al., 2017).

Der Auslöser der Eizellenreifung wird nicht erreicht, wenn nicht mindestens 2 Follikel ≥16 mm erreicht werden können.

Die Eizellentnahme wird von zwei Ärzten mit höchster Fachkompetenz durchgeführt.

Der erneute Transfer von Embryonen erfolgt am zweiten, dritten oder fünften Tag nach der Entnahme der Eizellen.

Im Falle eines OHSS-Risikos und/oder eines Progesteronanstiegs am Tag der hCG-Gabe (≥ 1,5 ng/ml) werden alle Embryonen kryokonserviert. Für die Analyse der Endpunkte werden die Paare mit allen eingefrorenen Embryonen berücksichtigt.

BERECHNUNG DER PROBENGRÖSSE:

Um die Ziele des vorliegenden Studienprotokolls zu verfolgen, wurde eine a priori Berechnung der Stichprobengröße durchgeführt, um die minimal erforderliche Teilnehmerzahl zu bestimmen. In der Literatur verfügbare Daten deuten im Durchschnitt auf einen Unterschied von 1,5 in der Nr. hin. der präovulatorischen Follikel (≥16 mm) zwischen der mit Resveratrol behandelten Gruppe und der Kontrollgruppe, mit einem durchschnittlichen Anstieg von 15 % zugunsten der Studiengruppe. Unter Berücksichtigung einer konservativen Differenz von 10 %, was einer großen Effektgröße von d=0,80 entspricht, einer Potenz (1-β) von 95 %, einem Alpha von 0,05, einem zweiseitigen t-Test und einem Verhältnis von 1:1 zwischen den beiden Gruppen wären insgesamt 90 Probanden (45 für jede Gruppe) erforderlich, um einen signifikanten Unterschied im primären Ergebnis zwischen den beiden Gruppen zu überprüfen.