Mulig handling av resveratrol for å forbedre resultatene av IVF/ICSI hos par med uforklarlig infertilitet (RECOS)

På grunnlag av de siste estimatene er den globale livstidsprevalensen for infertilitet 17,5 %, noe som betyr at omtrent én av seks personer har opplevd infertilitet på et tidspunkt i livet.

Til tross for en forbedring i konvensjonelle diagnostiske undersøkelser, fortsatt i dag, forblir rundt 25 % av årsakene til par-infertilitet uforklarlige.

Faktisk kan flere avgjørende øyeblikk av den menneskelige reproduksjonsprosessen ikke studeres, og derfor forblir spesifikke reproduktive endringer udiagnostisert. Tenker bare på prosessen med follikulogenese i eggstokkene, oocyttutvikling, embryonal implantasjon, alle de virkelige "biologiske mysteriene".

Blant disse ulike biologiske aspektene er det kjent at oocyttkvaliteten er hovedprediktoren for klinisk graviditet etter IVF/ICSI. Faktisk påvirker oocyttmodningsprosessen embryoutviklingen og følgelig embryoets levedyktighet. Selv om mekanismene som bestemmer en oocytt av god kvalitet ikke er kjent, er likevel energiavhengige prosesser ment å spille en stor rolle i oocyttutviklingen. Disse prosessene formidles av mitokondrier, hvis konsentrasjon i oocytter er den høyeste blant de andre cellene i menneskekroppen. Oocyttens kjernefysiske og cytoplasmatiske modning er strengt forbundet med veksten av granulosaceller (GC). Disse cellene omgir oocytten og etablerer en funksjonell toveis krysstale med selve oocytten gjennom gap junctions og parakrine faktorer. Under follikulogenese øker GC forbruket av glukose og metaboliserer glukose til pyruvat som går til oocytten. Alt dette bestemmer en økning i energitilførselen til selve oocytten, demonstrert av økningen i ATP-produksjonen, som lar den sistnevnte cellen forberede seg på befruktning og de første stadiene av embryonal utvikling som, som kjent, er helt oocyttavhengig .

Resveratrol ser ut til å være i stand til å passe inn i dette området av cellulær funksjon. Det er en naturlig polyfenol, utbredt i matvarer, planter, drikker, og den ser ut til å indusere GC-spredning gjennom en anti-apoptotisk effekt på en SIRT1-avhengig måte. Videre, i GCs, reduserer resveratrol det oksidative stresset, øker mitokondrienes biogenese og de intracellulære ATP-nivåene, og bestemmer en høy energitilgjengelighet som favoriserer oocyttveksten. Resveratrol ser ut til å redusere uttrykket av vaskulær endotelvekstfaktor (VEGF) i rottegranulosaceller, involvert i angiogenese og vaskulær permeabilitet, og viser potensielt en beskyttende effekt på risikoen for ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), en livstruende tilstand assosiert med ovarie. stimulering, hvis VEGF er hovedformidleren.

En fersk klinisk randomisert studie viste at en forbehandling på 3 måneder med resveratrol, hos kvinner rammet av parinfertilitet og gjennomgår ICSI, var assosiert med et høyere antall uthentede og modne oocytter, en høyere befruktningsrate, et høyere antall blastocyster pr. pasient og et høyere antall overskudd av kryokonserverte embryoer per pasient, selv om ingen signifikant effekt ble observert i kliniske svangerskap og levende fødselsrater.

Basert på dette siste beviset og gitt de potensielle fordelaktige effektene av resveratrol i follikulogenese og i oocyttutvikling, designet etterforskerne en randomisert, kontrollert, dobbeltblind, enkeltsenterstudie, hvis mål vil være å sammenligne biologiske og kliniske resultater av resveratrol. supplement hos kvinner som gjennomgår IVF/ICSI-sykluser for uforklarlig infertilitet.

Så vidt etterforskerne kjenner til, har det ikke blitt publisert noen studie om den potensielle effekten av resveratrol på IVF/ICSI-resultater med tanke på par med denne infertilitetsdiagnosen, som kan være det naturlige målet for denne integrerende behandlingen fordi prosessen med follikulogenese og oocyttmodning ikke kan utføres. rutinemessig undersøkt. En endring av disse biologiske mekanismene kan være den ukjente årsaken til en del av den uforklarlige infertiliteten, og behandling med resveratrol kan resultere i betydelig klinisk forbedring for pasientene som er registrert i studien.

I flere detaljer vil hovedmålet med denne randomiserte, placebokontrollerte, dobbeltblinde, enkeltsenterstudien være evalueringen av den mulige effekten av resveratrol for å bestemme en bedre follikkelutvikling hos pasienter med uforklarlig infertilitet som gjennomgår kontrollert eggstokkstimulering (COS). ) for IVF/ICSI.

Infertile kvinnelige pasienter med normal ovariereserve vil bli behandlet i henhold til klinisk praksis og forskjellen mellom forventede (gjennom AFC) og uthentede oocytter vil bli vurdert i forhold til bruk av resveratrol.

DESIGN OG METODOLOGI:

Par som er rammet av uforklarlig infertilitet vil bli registrert. Definisjonen av uforklarlig infertilitet er følgende: infertilitet hos par med tilsynelatende normal eggstokkfunksjon, eggledere, livmor, livmorhals og bekken, alder ≤ 40 år og med tilstrekkelig koital frekvens; og tilsynelatende normal testikkelfunksjon, genito-urinær anatomi og et normalt ejakulat.

Alle pasienter vil bli randomisert for ingen behandling (placebogruppe - kun folsyre) og for behandling av resveratrol (studiegruppe) med et forhold på 1:1. Randomiseringslisten, generert av en programvare, vil bli administrert av en sykepleier som ikke er direkte involvert i studien og vil gi pasientene medisiner for hele behandlingens varighet. Verken legene/embryologene eller pasientene vil være klar over innholdet i boksene med legemidler (folsyre eller resveratrol) (Dobbeltblinddesign).

Behandlingsvarigheten vil være minst 65 dager før stimuleringen starter (fra stadiet av pre-antrale follikler) og frem til dagen for oppsamling av oocytter.

Alle AFC-bestemmelsene vil bli utført av de samme to legene fra 2. til 6. dag av syklusen, i en av de siste tre månedene før stimuleringen starter. Alle folliklene som varierer fra 2 til 10 mm vil bli registrert (skiller mellom folliklene som varierer fra 2 til 5 mm og de som varierer fra 6 til 10 mm).

COS vil bli utført ved daglige injeksjoner av rFSH (Gonal F; Merck Serono, Italia) og vil bli startet på 2./3. dag av syklusen og fortsette til dagen for induksjon av oocyttmodning. Hypofysesuppresjonen vil bli oppnådd ved administrering av GnRH-antagonisten ganirelix (0,25 mg per dag, Fyremadel, Ferring S.p.A.), som vil bli startet fra den 6. dagen av eggstokkstimuleringen til dagen for induksjon av oocyttmodning.

Follikulær utvikling vil bli overvåket etter 5 dagers behandling og deretter minst hver 2. dag. Overvåking vil bestå av: a) transvaginal ultralydsskanning for å evaluere antall og maksimale diameter av eggstokkfollikler og endometrietykkelsen; b) dosering av 17β-østradiol, LH og progesteron kun på dagen for induksjon av oocyttmodning. Den transvaginale ultralyden for overvåking vil bli utført av de samme to legene.

Høyrenset urin-hCG (Gonasi HP, IBSA Farmaceutici, Italia) 10 000 IE, subkutant eller intramuskulært, vil bli brukt for å indusere endelig oocyttmodning når to eller flere follikler på ≥16 mm i diameter vil bli observert og vil bli administrert 35,5-36 timer før planlagt oocyttuthenting. Ved OHSS-risiko vil den endelige oocyttmodningen oppnås ved å bruke en GnRH-agonist (Triptorelin, Decapeptyl 0,1 mg, Ipsen S.p.A., Italia) 0,3 mg subkutant, og oocyttuthentingen vil bli planlagt med samme modaliteter beskrevet ovenfor; i dette tilfellet vil alle oppnådde embryoer bli kryokonservert.

Det ble ikke vist noen forskjell i antall hentede oocytter ved å sammenligne disse to forskjellige modalitetene for å utløse den endelige oocyttmodningen (Haahr et al., 2017).

Utløseren av oocyttmodning vil ikke bli oppnådd ved manglende evne til å nå minst 2 follikler ≥16 mm.

Oocytthentingene vil bli utført av de to legene med høyest ekspertise.

Frisk overføring av embryoer vil bli utført på den andre, tredje eller femte dagen etter uthenting av oocyttene.

Ved OHSS-risiko og/eller ved progesteronøkning på dagen for hCG-administrasjon (≥1,5 ng/ml), vil alle embryoene frysekonserveres. Parene med alle frosne embryoer vil bli vurdert for analysen av endepunktene.

BEREGNING AV PRØVESTØRRELSE:

For å forfølge målene med denne studieprotokollen, ble det utført a priori prøvestørrelsesberegning for å bestemme det minimale antallet deltakere som kreves. Data tilgjengelig i litteraturen indikerer i gjennomsnitt en forskjell på 1,5 i antall. av pre-ovulatoriske follikler (≥16 mm) mellom gruppen behandlet med resveratrol og kontrollgruppen, med en gjennomsnittlig økning på 15 % til fordel for studiegruppen. Tatt i betraktning en konservativ forskjell på 10 %, som tilsvarer en stor effektstørrelse på d=0,80, en potens (1-β) på 95 %, en alfa på 0,05, en to-hals t-test og et forhold. på 1:1 mellom de to gruppene, ville totalt 90 forsøkspersoner (45 for hver gruppe) være nødvendig for å bekrefte en signifikant forskjell i primærresultat mellom de to gruppene.