원인 불명의 불임 부부의 IVF/ICSI 결과 개선에 레스베라트롤의 가능한 작용 (RECOS)

최근 추정에 따르면 전 세계 불임 유병률은 17.5%로, 이는 대략 6명 중 1명이 일생의 어느 단계에서든 불임을 경험했다는 의미입니다.

전통적인 진단법의 발전에도 불구하고 오늘날에도 부부 불임의 원인 중 약 25%는 설명되지 않는 상태로 남아 있습니다.

실제로 인간 생식 과정의 몇 가지 중요한 순간을 연구할 수 없으므로 특정한 생식 변화는 아직 진단되지 않은 상태로 남아 있습니다. 난소의 난포생성, 난모세포 발달, 배아 착상 등 모든 과정을 생각해보면 정말 "생물학적 미스터리"입니다.

이러한 다양한 생물학적 측면 중에서 난모세포의 질이 IVF/ICSI 이후 임상적 임신의 주요 예측변수인 것으로 알려져 있습니다. 실제로, 난모세포 성숙 과정은 배아 발달과 결과적으로 배아 생존 능력에 영향을 미칩니다. 좋은 품질의 난모세포를 결정하는 메커니즘은 알려져 있지 않지만, 그럼에도 불구하고 에너지 의존적 과정은 난모세포 발달에 중요한 역할을 하는 것으로 추정됩니다. 이러한 과정은 난모세포의 농도가 인체의 다른 세포 중에서 가장 높은 미토콘드리아에 의해 매개됩니다. 난모세포 핵 및 세포질 성숙은 과립막 세포(GC)의 성장과 밀접하게 연관되어 있습니다. 이 세포는 난모세포를 둘러싸고 간극 접합부와 측분비 인자를 통해 난모세포 자체와 기능적인 양방향 누화를 설정합니다. 난포생성 동안 GC는 포도당 소비를 증가시키고 포도당을 피루브산으로 대사하여 난모세포로 전달합니다. 이 모든 것은 난모세포 자체에 대한 에너지 공급의 증가를 결정하며, 이는 ATP 생산의 증가로 입증되며, 이는 후자의 세포가 수정 및 완전히 난모세포에 의존하는 배아 발달의 첫 단계를 준비할 수 있게 해줍니다.

레스베라트롤은 세포 기능의 이 영역에 적합한 것으로 보입니다. 이는 식품, 식물, 음료에 널리 퍼져 있는 천연 폴리페놀이며 SIRT1 의존적 방식으로 항세포사멸 효과를 통해 GC 증식을 유도하는 것으로 보입니다. 또한, GC에서 레스베라트롤은 산화 스트레스를 감소시키고, 미토콘드리아 생합성 및 세포내 ATP 수준을 증가시켜 난모세포 성장에 유리한 높은 에너지 가용성을 결정합니다. 레스베라트롤은 쥐 과립막 세포에서 혈관 신생 및 혈관 투과성과 관련된 혈관 내피 성장 인자(VEGF)의 발현을 감소시키는 것으로 보이며 잠재적으로 난소와 관련된 생명을 위협하는 상태인 난소과자극 증후군(OHSS)의 위험에 대한 보호 효과를 보여줍니다. VEGF가 주요 매개체인 자극.

최근 임상 무작위 시험에서는 부부 불임으로 영향을 받고 ICSI를 겪고 있는 여성에게 레스베라트롤을 3개월 동안 전처리한 경우 회수된 성숙 난모세포의 수가 더 많았고, 수정률이 높았으며, 배반포 수가 더 많았습니다. 임상 임신 및 정상 출산율에서는 유의미한 영향이 관찰되지 않았음에도 불구하고 환자당 냉동 보존된 잉여 배아의 수가 더 많았습니다.

이 마지막 증거를 기반으로 하고 모낭 형성 및 난모세포 발달에 대한 레스베라트롤의 잠재적인 유익한 효과를 고려하여 연구자들은 레스베라트롤의 생물학적 및 임상적 결과를 비교하는 것이 목표인 무작위, 대조, 이중 맹검, 단일 센터 시험을 설계했습니다. 원인 불명의 불임으로 인해 IVF/ICSI 주기를 겪고 있는 여성의 보충제.

연구자들이 아는 바로는, 이러한 불임 진단을 받은 부부를 고려하여 IVF/ICSI 결과에 대한 레스베라트롤의 잠재적 영향에 대한 연구는 발표되지 않았습니다. 정기적으로 조사됩니다. 이러한 생물학적 메커니즘의 변화는 설명할 수 없는 불임의 일부 원인을 알 수 없는 원인일 수 있으며, 레스베라트롤을 사용한 치료는 연구에 등록한 환자에게 상당한 임상적 개선을 가져올 수 있습니다.

더 자세히 말하면, 이 무작위, 위약 대조, 이중 맹검, 단일 센터 시험의 주요 목적은 통제된 난소 자극을 받는 원인 불명의 불임 환자의 난포 발달을 개선하는 데 있어 레스베라트롤의 가능한 효과를 평가하는 것입니다(COS). ) IVF/ICSI의 경우.

정상적인 난소 예비력을 가진 불임 여성 환자는 임상 실습에 따라 치료할 것이며 예상 난모세포(AFC를 통해)와 회수된 난모세포 간의 차이를 레스베라트롤 사용과 관련하여 평가할 것입니다.

설계 및 방법론:

설명할 수 없는 불임의 영향을 받는 커플이 등록됩니다. 설명할 수 없는 불임의 정의는 다음과 같습니다: 겉보기에 정상적인 난소 기능, 나팔관, 자궁, 자궁 경부 및 골반, 연령 40세 이하, 적절한 성교 빈도를 갖는 부부의 불임; 명백히 정상적인 고환 기능, 생식기-요로 해부학 및 정상적인 사정.

모든 환자는 치료 없음(위약 그룹 - 엽산만 사용) 및 레스베라트롤 치료(연구 그룹)에 대해 1:1 비율로 무작위 배정됩니다. 소프트웨어에 의해 생성된 무작위 목록은 연구에 직접 참여하지 않은 간호사가 관리하며 치료 기간 내내 환자에게 약물을 제공합니다. 의사/발생학자, 환자 모두 약물(엽산 또는 레스베라트롤) 상자의 내용물을 알지 못합니다(이중 맹검 설계).

치료 기간은 자극 시작 전(전강난포 단계부터) 최소 65일부터 난모세포 채취일까지입니다.

모든 AFC 결정은 자극 시작 전 마지막 3개월 중 한 달 동안 주기의 2일부터 6일까지 동일한 두 의사에 의해 수행됩니다. 2~10mm 범위의 모든 모낭이 기록됩니다(2~5mm 범위의 모낭과 6~10mm 범위의 모낭을 구별).

COS는 rFSH(Gonal F, Merck Serono, Italy)를 매일 주사하여 주기의 2/3일에 시작하여 난모세포 성숙 유도일까지 계속됩니다. 뇌하수체 억제는 GnRH 길항제인 가니렐릭스(1일 0.25mg, Fyremadel, Ferring S.p.A.)를 투여하여 얻을 수 있으며, 이는 난소 자극 6일째부터 시작하여 난모세포 성숙 유도일까지 진행됩니다.

난포 발달은 치료 5일 후, 그 이후에는 적어도 2일마다 모니터링됩니다. 모니터링은 다음으로 구성됩니다: a) 난소 난포의 수와 최대 직경 및 자궁내막 두께를 평가하기 위한 질경유 초음파 검사; b) 난모세포 성숙 유도일에만 17β-에스트라디올, LH 및 프로게스테론의 투여량. 모니터링을 위한 질경유 초음파 검사는 동일한 두 명의 의사가 수행합니다.

고도로 정제된 요중 hCG(Gonasi HP, IBSA Farmaceutici, 이탈리아) 10.000 IU는 직경 16mm 이상의 난포가 2개 이상 관찰될 때 피하 또는 근육 내로 최종 난모세포 성숙을 유도하는 데 사용되며 35.5-36시간 동안 투여됩니다. 계획된 난모세포 채취 전. OHSS 위험이 있는 경우, GnRH 작용제(Triptorelin, Decapeptyl 0.1mg, Ipsen S.p.A., Italy) 0.3mg을 피하 주사하여 최종 난모세포 성숙을 얻고, 위에서 설명한 것과 동일한 방식으로 난모세포 채취를 계획합니다. 이 경우, 획득된 모든 배아는 냉동보존됩니다.

최종 난모세포 성숙을 유발하는 이 두 가지 다른 방식을 비교하면 회수된 난모세포 수에 차이가 없는 것으로 나타났습니다(Haahr et al., 2017).

16mm 이상의 난포 2개 이상에 도달할 수 없는 경우 난모세포 성숙이 유발되지 않습니다.

난자 채취는 최고 수준의 전문 지식을 갖춘 두 명의 의사가 수행합니다.

새로운 배아 이식은 난모세포 채취 후 2일, 3일 또는 5일째에 수행됩니다.

OHSS 위험이 있는 경우 및/또는 hCG 투여 당일 프로게스테론이 상승한 경우(≥1.5ng/ml), 모든 배아는 냉동보존됩니다. 모든 냉동 배아를 갖고 있는 부부는 종말점 분석을 위해 고려됩니다.

샘플 크기 계산:

본 연구 프로토콜의 목적을 추구하기 위해 필요한 최소 참가자 수를 결정하기 위해 사전 표본 크기 계산이 수행되었습니다. 문헌에서 이용 가능한 데이터는 평균 1.5의 차이를 나타냅니다. 레스베라트롤 치료군과 대조군 사이의 배란 전 난포(≥16mm)의 비율은 연구군에서 평균 15% 증가했습니다. 따라서 10%의 보수적인 차이를 고려하면 d=0.80의 큰 효과 크기, 95%의 검정력(1-β), 0.05의 알파, 양측 t-검정 및 비율에 해당합니다. 두 그룹 간의 1:1 비율로, 두 그룹 간의 일차 결과의 유의미한 차이를 확인하려면 총 90명의 피험자(각 그룹당 45명)가 필요합니다.