Resveratrols mulige handling til at forbedre resultaterne af IVF/ICSI hos par med uforklarlig infertilitet (RECOS)

På baggrund af de seneste skøn er den globale livstidsprævalens af infertilitet 17,5 %, hvilket betyder, at cirka hver sjette person har oplevet infertilitet på et eller andet tidspunkt i deres liv.

På trods af en forbedring i konventionelle diagnostiske undersøgelser er omkring 25 % af årsagerne til par-infertilitet stadig i dag uforklarlige.

Faktisk kan flere afgørende øjeblikke af den menneskelige reproduktionsproces ikke studeres, og derfor forbliver specifikke reproduktive ændringer udiagnosticeret. Tænker bare på processen med follikulogenese i æggestokkene, oocytudvikling, embryonal implantation, alle deres rigtige "biologiske mysterier".

Blandt disse forskellige biologiske aspekter er det kendt, at oocytkvaliteten er hovedprædiktoren for klinisk graviditet efter IVF/ICSI. Faktisk påvirker oocytmodningsprocessen embryoudviklingen og følgelig embryolevedygtigheden. Selvom de mekanismer, der bestemmer en oocyt af god kvalitet, ikke er kendt, formodes energiafhængige processer ikke desto mindre at spille en stor rolle i oocytudviklingen. Disse processer medieres af mitokondrier, hvis koncentration i oocytter er den højeste blandt de andre celler i menneskekroppen. Oocytkernens og cytoplasmatiske modning er strengt forbundet med væksten af ​​granulosaceller (GC'er). Disse celler omgiver oocytten og etablerer en funktionel tovejs krydstale med selve oocytten gennem gap junctions og parakrine faktorer. Under follikulogenese øger GC'er forbruget af glucose og metaboliserer glucose til pyruvat, som passerer til oocytten. Alt dette bestemmer en stigning i energitilførslen til selve oocytten, demonstreret af stigningen i ATP-produktion, som gør det muligt for sidstnævnte celle at forberede sig på befrugtning og de første stadier af embryonal udvikling, som som kendt er fuldstændig oocytafhængig .

Resveratrol ser ud til at være i stand til at passe ind i dette område af cellulær funktion. Det er en naturlig polyphenol, udbredt i fødevarer, planter, drikkevarer, og det ser ud til at inducere GCs spredning gennem en anti-apoptotisk effekt på en SIRT1-afhængig måde. I GC'er reducerer resveratrol desuden det oxidative stress, øger mitokondriernes biogenese og de intracellulære ATP-niveauer, hvilket bestemmer en høj energitilgængelighed, som favoriserer oocytvæksten. Resveratrol synes at reducere ekspressionen af ​​vaskulær endothelial vækstfaktor (VEGF) i rottegranulosaceller, der er impliceret i angiogenese og vaskulær permeabilitet, hvilket potentielt viser en beskyttende effekt på risikoen for ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), en livstruende tilstand forbundet med ovarie. stimulation, hvis VEGF er den vigtigste mediator.

Et nyligt klinisk randomiseret forsøg viste, at en forbehandling på 3 måneder med resveratrol, hos kvinder ramt af parinfertilitet og gennemgår ICSI, var forbundet med et højere antal udvundne og modne oocytter, en højere befrugtningsrate, et højere antal blastocyster pr. patient og et højere antal overskydende kryokonserverede embryoner pr. patient, selvom der ikke blev observeret nogen signifikant effekt i kliniske graviditeter og levende fødselsrater.

Baseret på denne sidste evidens og givet de potentielle gavnlige virkninger af resveratrol i follikulogenese og i oocytudvikling, designede efterforskerne et randomiseret, kontrolleret, dobbeltblindt enkeltcenter-forsøg, hvis formål vil være sammenligning af biologiske og kliniske resultater af resveratrol supplement til kvinder, der gennemgår IVF/ICSI-cyklusser for uforklarlig infertilitet.

Så vidt efterforskernes viden er, er der ikke offentliggjort nogen undersøgelse af resveratrols potentielle effekt på IVF/ICSI-resultater i betragtning af par med denne infertilitetsdiagnose, som kan være det naturlige mål for denne integrerede behandling, fordi processen med follikulogenese og oocytmodning ikke kan rutinemæssigt undersøgt. En ændring af disse biologiske mekanismer kan være den uerkendte årsag til en del af den uforklarlige infertilitet, og behandling med resveratrol kan resultere i signifikant klinisk forbedring for de patienter, der er inkluderet i undersøgelsen.

Mere detaljeret vil hovedformålet med dette randomiserede, placebokontrollerede, dobbeltblindede enkeltcenterforsøg være evalueringen af ​​den mulige effekt af resveratrol til at bestemme en bedre follikeludvikling hos patienter med uforklarlig infertilitet, der gennemgår kontrolleret ovariestimulering (COS). ) til IVF/ICSI.

Infertile kvindelige patienter med normal ovariereserve vil blive behandlet i henhold til klinisk praksis, og forskellen mellem forventede (gennem AFC) og udvundne oocytter vil blive vurderet i forhold til brug af resveratrol.

DESIGN OG METODOLOGI:

Par, der er ramt af uforklarlig infertilitet, vil blive tilmeldt. Definitionen af ​​uforklarlig infertilitet er følgende: infertilitet hos par med tilsyneladende normal ovariefunktion, æggeledere, livmoder, livmoderhals og bækken, alder ≤ 40 år og med tilstrækkelig koital frekvens; og tilsyneladende normal testikelfunktion, genito-urinær anatomi og et normalt ejakulat.

Alle patienter vil blive randomiseret til ingen behandling (placebogruppe - kun folinsyre) og til behandling af resveratrol (undersøgelsesgruppe) med et forhold på 1:1. Randomiseringslisten, genereret af en software, vil blive administreret af en sygeplejerske, der ikke er direkte involveret i undersøgelsen, og vil give patienterne lægemidlerne i hele behandlingens varighed. Hverken lægerne/embryologerne eller patienterne vil være opmærksomme på indholdet af kasserne med lægemidler (folinsyre eller resveratrol) (Dobbeltblinddesign).

Behandlingsvarigheden vil være mindst 65 dage før start af stimulering (fra stadiet af præ-antrale follikler) og indtil dagen for oocytopsamling.

Alle AFC-bestemmelserne vil blive udført af de samme to læger fra 2. til 6. dag i cyklussen, i en af ​​de sidste tre måneder før starten af ​​stimulationen. Alle folliklerne fra 2 til 10 mm vil blive registreret (der skelnes mellem folliklerne fra 2 til 5 mm og dem, der varierer fra 6 til 10 mm).

COS vil blive udført ved daglige injektioner af rFSH (Gonal F; Merck Serono, Italien) og vil blive startet på den 2./3. dag i cyklussen og fortsættes indtil dagen for induktion af oocytmodning. Hypofyseundertrykkelsen vil blive opnået ved administration af GnRH-antagonisten ganirelix (0,25 mg pr. dag, Fyremadel, Ferring S.p.A.), som vil blive startet fra den 6. dag af ovariestimuleringen indtil dagen for induktion af oocytmodning.

Follikulær udvikling vil blive overvåget efter 5 dages behandling og derefter mindst hver 2. dag. Monitorering vil bestå af: a) transvaginal ultralydsscanning for at evaluere antallet og den maksimale diameter af ovariefollikler og endometrietykkelsen; b) doseringen af ​​17β-østradiol, LH og progesteron kun på dagen for induktion af oocytmodning. Den transvaginale ultralyd til overvågning vil blive udført af de samme to læger.

Højt oprenset urin-hCG (Gonasi HP, IBSA Farmaceutici, Italien) 10.000 IE, subkutant eller intramuskulært, vil blive brugt til at inducere endelig oocytmodning, når to eller flere follikler på ≥16 mm i diameter vil blive observeret og vil blive administreret 35,5-36 timer før planlagt ægudtagning. I tilfælde af OHSS-risiko vil den endelige oocytmodning blive opnået ved at bruge en GnRH-agonist (Triptorelin, Decapeptyl 0,1 mg, Ipsen S.p.A., Italien) 0,3 mg subkutant, og oocytudtagningen vil blive planlagt med samme modaliteter beskrevet ovenfor; i dette tilfælde vil alle de opnåede embryoner blive kryokonserveret.

Der blev ikke vist nogen forskel i antallet af udvundne oocytter ved at sammenligne disse to forskellige modaliteter til at udløse den endelige oocytmodning (Haahr et al., 2017).

Udløseren af ​​oocytmodning vil ikke blive opnået i tilfælde af manglende evne til at nå mindst 2 follikler ≥16 mm.

Oocytopsamlingerne vil blive udført af de to læger med det højeste niveau af ekspertise.

Frisk overførsel af embryoner vil blive udført på den anden, tredje eller femte dag efter udtagning af oocytterne.

I tilfælde af OHSS-risiko og/eller i tilfælde af progesteronstigning på dagen for hCG-indgivelse (≥1,5 ng/ml), vil alle embryoner blive kryokonserveret. Parrene med alle frosne embryoner vil blive overvejet til analysen af ​​endepunkterne.

BEREGNING AF PRØVESTØRRELSE:

For at forfølge målene med denne undersøgelsesprotokol blev der udført en a priori prøvestørrelsesberegning for at bestemme det minimale antal deltagere, der kræves. Data tilgængelige i litteraturen indikerer i gennemsnit en forskel på 1,5 i antallet. af præ-ovulatoriske follikler (≥16 mm) mellem gruppen behandlet med resveratrol og kontrolgruppen, med en gennemsnitlig stigning på 15 % til fordel for undersøgelsesgruppen. Tager man således en konservativ forskel på 10 % i betragtning, hvilket svarer til en stor effektstørrelse på d=0,80, en potens (1-β) på 95 %, en alfa på 0,05, en tohalet t-test og et forhold på 1:1 mellem de to grupper, ville der være behov for i alt 90 forsøgspersoner (45 for hver gruppe) for at verificere en signifikant forskel i primært resultat mellem de to grupper.