神経変性および神経炎症に対するヒト羊膜間葉細胞セクレトーム (CONTRASTOME)
革新的な治療戦略としてヒト羊膜間葉細胞セクレトームを使用した慢性炎症と神経変性の対比
神経変性疾患は、中枢神経系の非神経細胞成分と末梢血免疫細胞の両方の機能不全を引き起こす、慢性炎症を特徴とする衰弱性疾患です。 したがって、神経変性を効果的に対比するだけでなく、炎症を軽減することを目的とした革新的な治療戦略を開発することが重要です。
研究の全体的な目的は、神経変性に対抗するヒト羊膜間葉系間質細胞 (hAMSC) セクレトームの免疫調節および再生促進の可能性を前臨床 in vitro で実証することです。
この可能性は、筋萎縮性側索硬化症 (ALS) や慢性脱髄疾患 (多発性硬化症 - MS) などの神経変性疾患の 3 次元 in vitro モデルで評価されます。 この目的を達成するために、この研究には薬物治療や医療機器を使用していない患者からのサンプル採取が含まれています。 ALSと診断された患者、MSと診断された患者、および健康なボランティアが血液サンプルと皮膚生検を収集するために募集されます。 炎症性コンパートメントを含む中枢神経系内の細胞の不均一性と三次元相互作用を模倣した、患者特異的および制御オルガノイドプラットフォームが開発され、hAMSCセクレトームのin vitro有効性を調査するための貴重なツールとして使用されます。
調査の概要
研究の種類
介入
入学 (推定)
60
段階
- 適用できない
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
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Roma、イタリア、00168
- Fondazione Policlinico Universitario A. Gemelli IRCCS
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Rome、イタリア、00168
- Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS
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参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
健康ボランティアの受け入れ
はい
説明
包含基準:
- 筋萎縮性側索硬化症（ALS）患者の場合：年齢が50～60歳で、発症年齢と罹患期間が同様の年齢。
- 多発性硬化症（MS）患者の場合：最近MSと診断された、20～50歳の年齢で、MSの男女比が約2：1であると考えられる患者。
- 健康なボランティアの場合: 神経疾患に罹患しておらず、両方の疾患の年齢と性別比が一致する患者の配偶者。
除外基準:
- 研究への参加に同意しない患者。
- 免疫調節剤またはコルチコステロイドによる治療を受けており、疾患の急性期にある MS 患者。
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：基礎科学
- 割り当て：非ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：筋萎縮性側索硬化症と診断された患者
筋萎縮性側索硬化症患者は、ヒト羊膜間葉系間質細胞セクレトームの神経保護効果および抗炎症/免疫調節効果を判定する多発性硬化症の三次元細胞モデルを最適化するために、静脈採血と皮膚生検を行うために募集される。
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皮膚組織は線維芽細胞を分離するために使用され、その後、人工多能性幹細胞（iPSC）に再プログラムされます。
これらの iPSC は、患者固有の制御オルガノイドを開発するために分化されます。
血液サンプルは、開発された in vitro モデルにおける炎症の寄与を研究するために末梢血単核球 (PBMC) を分離するために使用されます。
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実験的：多発性硬化症と診断された患者
多発性硬化症患者は、ヒト羊膜間葉系間質細胞セクレトームの神経保護効果および抗炎症/免疫調節効果を決定する多発性硬化症の三次元細胞モデルを最適化するために、静脈採血と皮膚生検を行うために募集されます。
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皮膚組織は線維芽細胞を分離するために使用され、その後、人工多能性幹細胞（iPSC）に再プログラムされます。
これらの iPSC は、患者固有の制御オルガノイドを開発するために分化されます。
血液サンプルは、開発された in vitro モデルにおける炎症の寄与を研究するために末梢血単核球 (PBMC) を分離するために使用されます。
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アクティブコンパレータ：健康なボランティア、患者の影響を受けていない配偶者
患者の配偶者は、ヒトの前臨床有効性を評価するための対照モデルを開発するために、静脈採血と皮膚生検を行うために、年齢と両方の症状の男女比を一致させて健康対照として登録されます。羊膜間葉系間質細胞セクレトーム。
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皮膚組織は線維芽細胞を分離するために使用され、その後、人工多能性幹細胞（iPSC）に再プログラムされます。
これらの iPSC は、患者固有の制御オルガノイドを開発するために分化されます。
血液サンプルは、開発された in vitro モデルにおける炎症の寄与を研究するために末梢血単核球 (PBMC) を分離するために使用されます。
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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筋萎縮性側索硬化症の三次元細胞モデルにおける神経突起の長さの測定。
時間枠：18ヶ月
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6人の筋萎縮性側索硬化症（ALS）患者と6人の健常対照者の皮膚生検から単離された人工多能性幹細胞（iPSC）からオルガノイドが生成される。
神経突起変性は、蛍光顕微鏡で、βIII-チューブリン陽性線維の総長をβIII-チューブリン陽性細胞の数で割ったもの（マイクロメートル単位）として測定される。
少なくとも5つのALSオルガノイドと5つの対照オルガノイドから測定が行われ、グループ間の相関と差異が分析されます。
統計検定とモデルの有意水準は 0.05 に設定されます。
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18ヶ月
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筋萎縮性側索硬化症の三次元細胞モデルにおけるアポトーシス細胞の割合。
時間枠：18ヶ月
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6人の筋萎縮性側索硬化症（ALS）患者と6人の健常対照者の皮膚生検から単離された人工多能性幹細胞（iPSC）からオルガノイドが生成される。
アポトーシスは、細胞の総数に対する死んだ細胞の割合を表す、ヨウ化プロピジウム陽性細胞の割合によって評価されます。
少なくとも5つのALSオルガノイドと5つの対照オルガノイドから測定が行われ、グループ間の相関と差異が分析されます。
統計検定とモデルの有意水準は 0.05 に設定されます。
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18ヶ月
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多発性硬化症の三次元細胞モデルにおける損傷したミエリンの面積測定。
時間枠：18ヶ月
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6人の多発性硬化症（MS）患者と6人の健康な対照者の皮膚生検から単離された人工多能性幹細胞（iPSC）からオルガノイドが生成されます。
ミエリン鞘の損傷は、総切片面積に対するミエリン マーカー染色面積の減少として免疫蛍光によって評価されます。
グループ間の相関と差異を分析するために、少なくとも 5 つの MS オルガノイドと 5 つの対照オルガノイドから測定が行われます。
統計検定とモデルの有意水準は 0.05 に設定されます。
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18ヶ月
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多発性硬化症の三次元細胞モデルにおける炎症を起こしたミクログリア細胞の数。
時間枠：18ヶ月
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6人の多発性硬化症（MS）患者と6人の健康な対照者の皮膚生検から単離された人工多能性幹細胞（iPSC）からオルガノイドが生成されます。
ミクログリアの活性化は形態学的変化によって評価され、細胞を恒常性、分枝状、超分枝状、またはアメーバ状に分類します。
炎症性ミクログリアの増加は、総細胞数に対する活性化された形態細胞の割合として定義されます。
炎症マーカーである HLA-DR および iNOS は、CD68 および IBA1 陽性細胞と蛍光強度の観点から評価されます。
グループ間の相関と差異を分析するために、少なくとも 5 つの MS オルガノイドと 5 つの対照オルガノイドから測定が行われます。
統計検定とモデルの有意水準は 0.05 に設定されます。
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18ヶ月
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ヒト羊膜間質細胞セクレトームによる治療後の筋萎縮性側索硬化症オルガノイドにおける神経突起の長さの測定。
時間枠：24ヶ月
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ヒト羊膜間葉系間質細胞 (hAMSC) セクレトームで処理した筋萎縮性側索硬化症 (ALS) 由来のオルガノイドの神経突起の長さは、蛍光顕微鏡を使用して、βIII-TUBULIN 陽性線維の総長を βIII-TUBULIN 陽性細胞の数で割った値として定量されます。 。
ALS オルガノイド (少なくとも 5 つ) を健康なドナーのオルガノイド (少なくとも 5 つ) に近い値に回復する hAMSC セクレトームの能力が評価されます。
有意水準は 0.05 に設定されます。
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24ヶ月
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ヒト羊膜間質細胞セクレトームによる処理後の筋萎縮性側索硬化症オルガノイドにおけるアポトーシス細胞の割合。
時間枠：24ヶ月
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アポトーシスは、ヒト羊膜間葉系間質細胞（hAMSC）セクレトームで処理した筋萎縮性側索硬化症（ALS）由来のオルガノイドにおける、ヨウ化プロピジウム陽性細胞の減少（全細胞に対する割合として表します）によって測定されます。
ALS オルガノイド (少なくとも 5 つ) を健康なドナーのオルガノイド (少なくとも 5 つ) に近い値に回復する hAMSC セクレトームの能力が評価されます。
有意水準は 0.05 に設定されます。
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24ヶ月
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ヒト羊膜間質細胞セクレトームによる治療後の多発性硬化症オルガノイドにおける損傷したミエリンの面積測定。
時間枠：24ヶ月
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ヒト羊膜間葉系間質細胞（hAMSC）セクレトームで処理した多発性硬化症（MS）由来のオルガノイドにおける脱髄領域の減少は、全切片面積に対する成熟稀突起膠細胞マーカーの増加によって測定されます。
MS オルガノイド (少なくとも 5 つ) を健康なドナーのオルガノイド (少なくとも 5 つ) に近い値に復元する hAMSC セクレトームの能力が評価されます。
有意水準は 0.05 に設定されます。
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24ヶ月
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ヒト羊膜間質細胞セクレトームによる処理後の多発性硬化症オルガノイドにおける免疫調節ミクログリア細胞の数。
時間枠：24ヶ月
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免疫調節表現型の獲得は、ヒト羊膜間葉系間質細胞 (hAMSC) セクレトーム処理後の多発性硬化症 (MS) 由来オルガノイドにおいて、iNOS 陰性、アルギナーゼ陽性、HLA-DR が低い細胞を分析することによって判定されます。
免疫蛍光分析では、総ミクログリア IBA1+ 細胞のうち炎症/免疫調節マーカー陽性の細胞の数をカウントします。
蛍光強度の変化も評価されます。
MS オルガノイド (少なくとも 5 つ) を健康なドナーのオルガノイド (少なくとも 5 つ) に近い値に復元する hAMSC セクレトームの能力が評価されます。
有意水準は 0.05 に設定されます。
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24ヶ月
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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筋萎縮性側索硬化症および多発性硬化症患者における免疫表現型マーカーの変化の割合
時間枠：18ヶ月
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筋萎縮性側索硬化症 (ALS、n=15) および多発性硬化症 (MS、n=15) の患者由来の末梢血単核球 (PBMC) の免疫表現型の変化を、年齢と性別が一致した健康な対照 PBMC (n=15) と比較します。 =30)。
フローサイトメトリーは、T および B リンパ球、単球およびそのサブセット (ナイーブおよび記憶サブセットを含む)、老化状態、活性化マーカーの発現、および共刺激分子の変化を特定するために使用されます。
40 を超えるマーカーの割合が考慮され、各マーカーの陽性発現が記録されます。
患者の PBMC と健康な対照 PBMC の間の免疫表現型の変動は、p 値 < 0.05 で統計的に有意であると見なされます。
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18ヶ月
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協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
捜査官
- 主任研究者：Ornella Parolini、Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始 (実際)
2025年1月17日
一次修了 (実際)
2026年3月31日
研究の完了 (推定)
2027年2月28日
試験登録日
最初に提出
2024年7月16日
QC基準を満たした最初の提出物
2024年8月9日
最初の投稿 (実際)
2024年8月13日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
2026年9月9日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2026年9月7日
最終確認日
2026年9月1日
詳しくは
本研究に関する用語
追加の関連 MeSH 用語
その他の研究ID番号
- 6823
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
いいえ
米国FDA規制機器製品の研究
いいえ
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