Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Секретом амниотических мезенхимальных клеток человека при нейродегенерации и нейровоспалении (CONTRASTOME)

7 сентября 2026 г. обновлено: Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS

Противопоставление хронического воспаления и нейродегенерации с использованием секретома амниотических мезенхимальных клеток человека в качестве инновационной терапевтической стратегии

Нейродегенеративные заболевания представляют собой изнурительные состояния, характеризующиеся хроническим воспалением, приводящим к дисфункции как ненейрональных клеточных компонентов центральной нервной системы, так и иммунных клеток периферической крови. Таким образом, крайне важно разработать инновационную терапевтическую стратегию, которая не только эффективно контрастирует с нейродегенерацией, но и направлена ​​на уменьшение воспаления.

Общая цель исследования — обеспечить доклиническую демонстрацию in vitro иммуномодулирующего и прорегенеративного потенциала секретома амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека (hAMSC) в противодействии нейродегенерации.

Этот потенциал будет оценен в трехмерных in vitro моделях нейродегенеративных заболеваний, таких как боковой амиотрофический склероз (БАС) и хроническое демиелинизирующее заболевание (рассеянный склероз - РС). С этой целью исследование включает сбор образцов у пациентов, не получающих фармакологического лечения и не имеющих медицинских устройств. Пациенты с диагнозом БАС, пациенты с диагнозом рассеянный склероз и здоровые добровольцы будут набраны для сбора образцов крови и биопсии кожи. Будут разработаны специфичные для пациента и контролирующие органоидные платформы, имитирующие клеточную гетерогенность и трехмерные взаимодействия внутри центральной нервной системы, включая воспалительный отдел, для использования в качестве ценного инструмента для исследования эффективности секретома hAMSC in vitro.

Обзор исследования

Статус

Активный, не рекрутирующий

Условия

Вмешательство/лечение

Тип исследования

Интервенционный

Регистрация (Оцененный)

60

Фаза

  • Непригодный

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Места учебы

  • Италия
      • Roma, Италия, 00168
        • Fondazione Policlinico Universitario A. Gemelli IRCCS
      • Rome, Италия, 00168
        • Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

  • Взрослый

Принимает здоровых добровольцев

Да

Описание

Критерии включения:

  • Для пациентов с боковым амиотрофическим склерозом (БАС): возраст от 50 до 60 лет и сходный возраст начала и продолжительности заболевания.
  • Для пациентов с рассеянным склерозом (РС): с недавно подтвержденным диагнозом РС, в возрасте от 20 до 50 лет и с учетом соотношения мужчин и женщин с РС примерно 2:1.
  • Для здоровых добровольцев: супруги пациентов, не страдающих каким-либо неврологическим заболеванием и соответствующие их возрасту и гендерному соотношению для обоих состояний.

Критерии исключения:

  • Пациенты, не давшие согласия на участие в исследовании.
  • Больные рассеянным склерозом, получавшие лечение иммуномодуляторами или кортикостероидами и находящиеся в острой фазе заболевания.

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

  • Основная цель: Фундаментальная наука
  • Распределение: Нерандомизированный
  • Интервенционная модель: Параллельное назначение
  • Маскировка: Нет (открытая этикетка)

Оружие и интервенции

Группа участников / Армия
Вмешательство/лечение
Экспериментальный: Пациенты с диагнозом боковой амиотрофический склероз
Пациенты с боковым амиотрофическим склерозом будут набраны для забора венозной крови и биопсии кожи, чтобы оптимизировать трехмерную клеточную модель рассеянного склероза, в которой определят нейропротекторные и противовоспалительные/иммуномодулирующие эффекты секретома амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Другой: Забор венозной крови и биопсия кожи
Ткань кожи будет использована для выделения фибробластов, которые затем будут перепрограммированы в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК). Эти ИПСК будут дифференцированы для разработки специфичных для пациента и контрольных органоидов. Образцы крови будут использоваться для выделения мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) для изучения вклада воспаления в разработанных моделях in vitro.
Экспериментальный: Пациенты с диагнозом рассеянный склероз
Пациенты с рассеянным склерозом будут набраны для забора венозной крови и биопсии кожи, чтобы оптимизировать трехмерную клеточную модель рассеянного склероза, в которой определят нейропротекторные и противовоспалительные/иммуномодулирующие эффекты секретома амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Другой: Забор венозной крови и биопсия кожи
Ткань кожи будет использована для выделения фибробластов, которые затем будут перепрограммированы в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК). Эти ИПСК будут дифференцированы для разработки специфичных для пациента и контрольных органоидов. Образцы крови будут использоваться для выделения мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) для изучения вклада воспаления в разработанных моделях in vitro.
Активный компаратор: Здоровые волонтеры, незатронутые супруги пациентов
Супруги пациентов будут включены в качестве здоровых лиц контрольной группы, соответствующих их возрасту и соотношению мужчин и женщин для обоих состояний, для взятия венозной крови и биопсии кожи, чтобы разработать контрольную модель, на основе которой можно оценить доклиническую эффективность человеческого препарата. Секретом амниотических мезенхимальных стромальных клеток.
Другой: Забор венозной крови и биопсия кожи
Ткань кожи будет использована для выделения фибробластов, которые затем будут перепрограммированы в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК). Эти ИПСК будут дифференцированы для разработки специфичных для пациента и контрольных органоидов. Образцы крови будут использоваться для выделения мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) для изучения вклада воспаления в разработанных моделях in vitro.

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Измерение длины нейритов в трехмерной клеточной модели бокового амиотрофического склероза.
Временное ограничение: 18 месяцев
Будут созданы органоиды из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (иПСК), выделенных из биопсии кожи 6 пациентов с боковым амиотрофическим склерозом (БАС) и 6 здоровых людей из контрольной группы. Дегенерацию нейритов будут измерять с помощью флуоресцентной микроскопии как общую длину βIII-ТУБУЛИН-положительных волокон, деленную на количество βIII-ТУБУЛИН-положительных клеток в микрометрах. Измерения будут проведены как минимум у 5 БАС и 5 контрольных органоидов для анализа корреляций и различий между группами. Уровень значимости для статистических тестов и моделей установлен на уровне 0,05.
18 месяцев
Процент апоптотических клеток в трехмерной клеточной модели бокового амиотрофического склероза.
Временное ограничение: 18 месяцев
Будут созданы органоиды из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (иПСК), выделенных из биопсии кожи 6 пациентов с боковым амиотрофическим склерозом (БАС) и 6 здоровых людей из контрольной группы. Апоптоз будет оцениваться по проценту йодид-положительных клеток пропидия, что представляет собой долю мертвых клеток по отношению к общему количеству клеток. Измерения будут проведены как минимум у 5 БАС и 5 контрольных органоидов для анализа корреляций и различий между группами. Уровень значимости для статистических тестов и моделей установлен на уровне 0,05.
18 месяцев
Измерение площади поврежденного миелина в трехмерной клеточной модели рассеянного склероза.
Временное ограничение: 18 месяцев
Будут созданы органоиды из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (иПСК), выделенных из биопсии кожи 6 пациентов с рассеянным склерозом (РС) и 6 здоровых людей из контрольной группы. Повреждение миелиновой оболочки будет оцениваться с помощью иммунофлуоресценции как уменьшение площади, окрашенной маркером миелина, по сравнению с общей площадью среза. Измерения будут проводиться как минимум с 5 MS и 5 контрольных органоидов для анализа корреляций и различий между группами. Уровень значимости для статистических тестов и моделей установлен на уровне 0,05.
18 месяцев
Количество воспаленных микроглиальных клеток в трехмерной клеточной модели рассеянного склероза.
Временное ограничение: 18 месяцев
Будут созданы органоиды из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (иПСК), выделенных из биопсии кожи 6 пациентов с рассеянным склерозом (РС) и 6 здоровых людей из контрольной группы. Активацию микроглии будут оценивать по морфологическим вариациям, классифицируя клетки как гомеостатические, разветвленные, гиперразветвленные или амебоидные. Воспалительное увеличение микроглии будет определяться как доля активированных морфологических клеток по отношению к общему количеству клеток. Маркеры воспаления HLA-DR и iNOS будут оцениваться по CD68 и IBA1-положительным клеткам и интенсивности флуоресценции. Измерения будут проводиться как минимум с 5 MS и 5 контрольных органоидов для анализа корреляций и различий между группами. Уровень значимости для статистических тестов и моделей установлен на уровне 0,05.
18 месяцев
Измерение длины нейритов в органоидах бокового амиотрофического склероза после обработки секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Временное ограничение: 24 месяца
Длина нейритов в органоидах, полученных из бокового амиотрофического склероза (БАС), обработанных секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека (hAMSC), будет количественно определяться с помощью флуоресцентной микроскопии как общая длина βIII-ТУБУЛИН-положительных волокон, деленная на количество βIII-ТУБУЛИН-положительных клеток. . Будет оценена способность секретома hAMSC восстанавливать органоиды БАС (не менее 5) до значений, близких к органоидам здоровых доноров (не менее 5). Уровень значимости установлен на уровне 0,05.
24 месяца
Процент апоптотических клеток в органоидах бокового амиотрофического склероза после обработки секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Временное ограничение: 24 месяца
Апоптоз будет измеряться по уменьшению количества йодид-положительных клеток пропидия, выраженному в процентах от общего числа клеток, в органоидах, полученных из бокового амиотрофического склероза (АЛС), обработанных секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека (hAMSC). Будет оценена способность секретома hAMSC восстанавливать органоиды БАС (не менее 5) до значений, близких к органоидам здоровых доноров (не менее 5). Уровень значимости установлен на уровне 0,05.
24 месяца
Измерение площади поврежденного миелина в органоидах рассеянного склероза после лечения секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Временное ограничение: 24 месяца
Уменьшение демиелинизированных областей в органоидах, полученных из рассеянного склероза (РС), обработанных секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека (hAMSC), будет измеряться по увеличению маркеров зрелых олигодендроцитов относительно общей площади среза. Будет оценена способность секретома hAMSC восстанавливать органоиды РС (не менее 5) до значений, близких к органоидам здоровых доноров (не менее 5). Уровень значимости установлен на уровне 0,05.
24 месяца
Количество иммунорегуляторных микроглиальных клеток в органоидах рассеянного склероза после обработки секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека.
Временное ограничение: 24 месяца
Приобретение иммунорегуляторного фенотипа будет определяться в органоидах, полученных из рассеянного склероза (РС), после обработки секретомом амниотических мезенхимальных стромальных клеток человека (hAMSC) путем анализа клеток, которые являются iNOS-негативными, аргиназо-положительными и с низким уровнем HLA-DR. Иммунофлуоресцентный анализ подсчитает количество клеток, положительных на воспалительные/иммунорегуляторные маркеры, от общего числа микроглиальных клеток IBA1+. Также будут оценены изменения интенсивности флуоресценции. Будет оценена способность секретома hAMSC восстанавливать органоиды РС (не менее 5) до значений, близких к органоидам здоровых доноров (не менее 5). Уровень значимости установлен на уровне 0,05.
24 месяца

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Процент измененных иммунофенотипических маркеров у пациентов с боковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом
Временное ограничение: 18 месяцев
Измененный иммунный фенотип мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) пациентов с боковым амиотрофическим склерозом (БАС, n = 15) и рассеянным склерозом (РС, n = 15) будет сравниваться со здоровыми контрольными клетками РВМС соответствующего возраста и пола (n =30). Проточная цитометрия будет использоваться для выявления изменений в Т- и В-лимфоцитах, а также моноцитах и ​​их подмножествах, включая наивные подмножества и подмножества памяти, статус старения, экспрессию маркеров активации и костимулирующие молекулы. Будет учитываться процент более 40 маркеров и регистрироваться положительная экспрессия для каждого маркера. Иммунофенотипические различия между РВМС пациента и здоровыми контрольными РВМС будут считаться статистически значимыми при значении p <0,05.
18 месяцев

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Спонсор

Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS

Следователи

  • Главный следователь: Ornella Parolini, Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования (Действительный)

17 января 2025 г.

Первичное завершение (Действительный)

31 марта 2026 г.

Завершение исследования (Оцененный)

28 февраля 2027 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

16 июля 2024 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

9 августа 2024 г.

Первый опубликованный (Действительный)

13 августа 2024 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Действительный)

9 сентября 2026 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

7 сентября 2026 г.

Последняя проверка

1 сентября 2026 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • 6823

Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы

Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.

Нет

Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Нет

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться