Mycetoma 육아종의 조직 미세 환경 서명

Mycetoma는 만성, 특이성, 피하 육아종성, 진행성 및 변형성 염증성 질환입니다. 진균 또는 특정 박테리아에 의해 발생하므로 일반적으로 각각 진균종과 방선균종으로 분류됩니다. 진균종의 가장 흔한 원인균은 Madurella mycetomatis이며, 방선균종의 흔한 원인균은 Streptomyces somaliensis와 Nocardia brasiliensis입니다. 통증이 없는 피하 종괴, 부비동 형성 및 낟알을 포함하는 화농성 또는 혈청-화농성 분비물의 삼중주(triad)는 진균종의 병인입니다. 염증성 피하 육아종은 일반적으로 피부와 심부 구조를 포함하여 확산되어 파괴, 기형 및 기능 상실을 초래하며 때로는 치명적일 수 있습니다. 발과 손은 사례의 82%에서 가장 빈번하게 영향을 받는 부위입니다. 풍토병 지역에서는 무릎, 팔, 다리, 머리와 목, 허벅지 및 회음부와 같은 신체의 다른 부분이 관련될 수 있습니다. 균종에서는 연령이 면제되지 않습니다. 그러나 20~40세의 젊은 성인 남성에서 더 자주 발생하며 보고된 환자의 거의 30%가 어린 학생이었습니다.

전 세계 균종의 실제 발병률과 유병률은 정확히 알려져 있지 않습니다. 보고된 균종 데이터의 대부분이 진행성 질병을 앓고 있는 병원 환자와 관련되어 있다는 점은 흥미롭습니다. 이것은 일반적으로 통증이 없고 천천히 진행되며 열악한 보건 교육, 의료 시설 부족 및 재정적 제약으로 인해 대부분의 환자가 늦게 ​​나타나는 균종의 특성에 기인합니다.

균종의 전 세계적 분포는 매우 다양합니다. 그것은 많은 열대 및 아열대 지역의 풍토병이며 수단, 소말리아, 세네갈, 인도, 예멘, 멕시코, 베네수엘라, 콜롬비아, 아르헨티나 및 기타 국가를 포함하는 균종 벨트에서 우세합니다. 아프리카 대륙은 질병의 부담과 유병률이 가장 높은 것으로 보입니다. 인도에서도 광범위하게보고되었습니다. 그러나 균종은 많은 온대 지역에서도 보고되었습니다. 미국, 스리랑카, 독일, 이집트, 터키, 필리핀, 일본, 레바논, 태국, 사우디아라비아, 튀니지, 이란 등지에서 균종에 대한 몇 가지 보고가 있습니다.

진균종의 적절한 치료는 주로 정확한 진단에 달려 있습니다. 원인균을 종 수준으로 동정하는 것이 필수적이며 이에 대한 현재의 검사는 고전적인 곡물 배양, 외과적 생검 조직병리학적 검사 및 PCR과 같은 다양한 분자 기술입니다. 기존의 방사선학, 초음파, CT 스캔 및 MRI와 같은 다양한 영상 기술이 질병 확장을 결정하는 데 사용됩니다. 이러한 테스트와 기술의 대부분은 침습적이고 비용이 많이 들며 민감도와 특이도가 낮습니다. 또한, 균류종 풍토 지역에서는 구할 수 없어 사용이 간편하고 현장 친화적인 원인 인자를 확인할 수 있는 검사가 절실히 요구되고 있다.

이 고통스럽고 파괴적인 질병의 관리는 실망스럽습니다. 치료는 주로 병인, 질병의 부위 및 범위에 따라 다릅니다. 최근까지 균종에 사용할 수 있는 유일한 치료법은 절단 또는 다중 절단 변형 수술적 절제였습니다. 진균종에 대한 항진균제 및 방선균종에 대한 항생제 및 항균제 및 다양한 외과 적 절제의 조합 치료는 진균종의 황금 표준입니다.

진균류종의 의학적 치료에 대한 보고는 드물고 부적절합니다. 수년에 걸쳐 지금까지 진균종의 치료는 통제된 임상 시험보다는 개인의 임상 경험과 산발적인 증례 보고 결과에 기반을 두었습니다. 일반적으로 진균종의 치료는 대대적인 외과적 절제나 환부 절단이 선택된다. 다양한 항진균제가 거의 성공하지 못한 채 시도되었습니다. Eumycetoma 원인 물질은 저급 감염성 유기체이고 이들의 박멸은 항진균제 투여에 의해 쉽게 달성되어야 하기 때문에 이것은 아마도 놀라운 일입니다. 일반적으로 방선균종은 항생제 및 기타 화학요법제로 치료할 수 있습니다. 병용 약물 요법은 약물 내성을 피하고 질병 박멸을 위해 단일 약물보다 항상 선호됩니다.

두 종류의 진균종에 대한 치료는 환자가 임상적으로, 방사선학적으로, 초음파적으로, 세포학적으로 완치될 때까지 계속되어야 합니다. 재발은 불완전하거나 불규칙한 치료 과정 후에 더 일반적입니다. 환자가 순응하지 않으면 유기체가 약물 내성을 개발할 좋은 기회가 있습니다.

이 연구는 수단 하르툼에 있는 Mycetoma Research Center(MRC)의 Mycetoma 클리닉에서 수행되었습니다. 헬싱키 선언에 따라 서면 동의서를 얻은 후 환자를 연구에 등록했습니다.

환자는 세 그룹으로 분류되었습니다.

• 진균종 병변이 있는 환자(n=10)
• 방선균종 병변이 있는 환자(n=12)
• 인과관계를 알 수 없는 병변이 있는 환자(n=6)

포르말린 고정 및 파라핀 포매는 표준 절차에 따라 MRC에서 수행되었습니다.

세침 흡인물(FNA)은 유세포 분석을 위해 신체 내 병변의 동일한 위치에서 동시에 수집되었습니다.

흡인물은 향후 분석을 위해 -80C에서 동결되었습니다. 동시에 면역 기능 분석을 위해 각 환자로부터 15ml의 혈액을 채취했습니다.

말초 혈액 단핵 세포는 표준 프로토콜을 사용하여 준비하고 필요할 때까지 액체 질소에 보관했습니다.

transcriptomics 분석을 위해 Paxgene 튜브에 5ml의 혈액을 수집했습니다.

Immunohistochemistry Immunohistochemistry는 University of York, UK에서 수행되었습니다. 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 절편을 700 유전자 Nanostring PanCancer 면역 세포 프로파일링 패널을 사용하여 분석하여 면역/염증 시그니처에 대한 높은 수준의 보기를 얻었습니다.

병변 미세 환경에 대한 포괄적이고 공간적으로 해결된 통찰력을 얻기 위해 Nanostring Digital Spatial Profiling 시스템을 사용하여 연속 절편을 고도로 다중화된 항체 염색에 적용했습니다.

이러한 접근법에 의해 확인된 후보 범진균종 표적은 면역형광 항체 및 RNA-형광 in situ 혼성화를 사용하여 확인되었습니다.

모든 데이터는 게시 및 보관을 위해 디지털화된 전체 슬라이드 이미지로 기록되었습니다.

항원 특이적 T 세포 반응 T 세포 반응 분석은 Khartoum 대학의 풍토병 연구소에서 수행되었습니다.

환자의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)와 풍토병 지역의 연령 및 성별 일치 건강한 대조군을 곰팡이 및 박테리아 용해물로 7일 동안 자극했습니다. IFN, IL-17, IL-4 및 IL-10 반응은 ELISPOT 분석으로 결정되었습니다.

T 세포 및 골수 세포 표현형을 평가하기 위해 항체 패널로 FNB에 대한 유세포 분석을 수행했습니다.

전혈 트랜스크립토믹스 혈액을 Paxgene에 수집하여 -80c에 보관했습니다. 저장된 샘플에서 RNA를 추출했습니다. RNA-Seq에 의해 전체 전혈 전사체 데이터를 얻었습니다.

진균종 흡인물의 사이토카인 측정은 상업적으로 이용 가능한 ELISA 키트를 사용하여 수행되었습니다.