개발도상국의 경구 투여 백신에 대한 면역 반응에 관한 연구

연구 설계 및 방법

백신 현장 사이트 및 전반적인 연구 설계:

미르푸르. 백신 연구는 지난 15년 동안 구강 콜레라, ETEC 및 로타바이러스 연구와 아메바 연구를 수행하고 있는 도시 다카의 미르푸르 현장 현장에서 수행될 것입니다. Dukoral 백신의 경우 연구 참여자에게 14일 간격으로 2회 용량을 투여합니다. 비보티프의 경우 1일, 3일, 5일 격일로 3회 투여하거나 28일 간격으로 2회 투여한다.

혈액 및 대변 검체는 예방 접종 전, 콜레라 백신 접종 후 7일, 장티푸스 백신 마지막 접종 후 7일에 채취하며, 면역학적 검사를 위한 검체 채취량은 부록에 기재되어 있다. 2. 참가자는 백신 접종 전 1시간과 접종 후 1시간 동안 음식물을 섭취할 수 없습니다. 유아의 장티푸스 백신에 대한 면역 반응에 대한 아연의 효과를 평가하기 위해 아연 보충은 첫 번째 접종 2주 전에 시작되고 마지막(세 번째) 장티푸스 백신 접종 후 최대 21일까지 계속됩니다. 40일).

혈청 아연 농도는 기준선에서만 결정됩니다. 정맥혈은 미량 원소가 없는 진공 테이너에서 수집되며 당일 ICDDR,B 실험실에 도착할 때까지 얼음에 보관됩니다.

Shahrasti의 비소 오염 지역에서 백신 연구:

약 200,000명의 인구를 가진 Shahrasti thana는 Matlab에서 약 40km 떨어져 있으며 Comilla, Chandpur 및 Dhaka와 도로로 잘 연결되어 있습니다. BAMWSP(Bangladesh Arsenic Mitigation Water Supply Project)에 따르면 Shahrasti Thana의 지하수는 비소로 심하게 오염되어 있습니다. 튜브 우물의 약 99%가 오염된 것으로 보고되었습니다(50 마이크로그램/L). BAMWSP와 DGHS는 이미 비소 독성과 일치하는 피부 병변이 있는 3000명의 환자를 확인했으며 방글라데시에서 비소 유발 피부 병변이 두 번째로 많은 지역을 나타냅니다. ICDDR,B와 협력하여 University Chicago와 Columbia University는 공동으로 비소 유발 피부 병변 환자에 대한 대규모 종적 감시 및 임상 시험을 수행하고 있습니다. 이 대규모 연구의 목적은 임상 및 생화학적 마커를 평가하여 피부암을 줄이는 것입니다. 우리는 진행 중인 연구의 인프라와 시설을 사용하여 Dukoral에 대한 이러한 사이트의 어린이 반응을 연구할 계획입니다. 면역원성 연구는 앞서 기술된 바와 같이 수행될 것이다. 2~5세 어린이 102명에게 듀코랄을 14일 간격으로 2회 접종할 계획입니다. 같은 수의 어린이들이 다카 시의 미르푸르 현장에서 비소 수치가 낮은 것으로 알려진 지역에서 연구될 것입니다. 이것은 비소가 발생하기 쉬운 지역과 비소가 적은 지역에서 점막 백신에 대한 면역 반응을 비교하는 첫 번째 연구가 될 것입니다.

백신 연구를 위한 피험자 동의 및 선택:

예방 접종, 다양한 분석을 위한 혈액 및 대변 샘플링을 포함하여 아동의 참여에 대해 부모/보호자로부터 자발적인 서면 동의서를 얻을 것입니다(부록). ICDDR,B 또는 다른 조직에서 수행한 다른 연구에 현재 등록되지 않은 미르푸르 현장에 거주하는 건강한 어린이(1~5세)와 성인(18~45세)은 자격 기준을 충족하는 대상으로 심사 및 등록됩니다. Shahrasti에서 수행될 Dukoral 연구의 일부에 대해서도 유사한 절차를 따를 것입니다.

우리는 이전에 가족의 최소 60%가 연구 연구에 자녀를 참여시키는 데 동의한 것을 경험했습니다. 이 연구의 예상 참가자는 등록 전에 의사가 신중하게 검사하고 평가합니다. 그들의 이전 예방 접종에 대한 상세한 이력을 얻을 것이며, 그들의 영양 상태와 면역 체계 및 가족 배경 등을 손상시킬 수 있는 최근 질병(아래에 설명된 대로)이 연구 등록 전에 고려될 것입니다. 참가자는 Dukoral 백신만 평가되는 Shahrasti 어린이의 비소 관련 피부 병변을 포함하여 면역 체계를 손상시킬 수 있는 만성 질환 또는 최근 질병이 없어야 합니다.

어린이는 또한 다음이 있는 경우 제외됩니다. (i) 만성 위장 장애 병력; (ii) 지난 2주 동안의 설사병(설사는 24시간 동안 3회 이상 비정상적으로 묽거나 묽은 변으로 정의됨, (iii) 이전 주에 열병, (iv) 기타 만성 질환, (v ) 지난 7일 이내에 항생제 치료를 받은 이력 및 (vi) 심각한 단백질 에너지 영양실조(PEM). 아동의 영양 상태는 인체측정학적 측정(연령 대비 체중 및 길이/신장 대비 체중)을 사용하여 평가됩니다. NCHS 중앙값의 키/길이에 대한 체중이 -2SD 미만인 어린이는 등록되지 않습니다. 마찬가지로 지난 2개월 동안 아연을 섭취한 어린이도 모집되지 않습니다.

기준 실험실 평가:

대변: ETEC를 포함한 장내 병원체의 분리 및 동정을 위한 현미경 검사 및 배양. V. cholerae 및 S.Typhi는 예방 접종 전 4일 동안 수행됩니다. 대변 ​​검체에서 이러한 병원균을 분리한 소아는 백신에 대한 반응 평가를 혼동하게 되므로 백신을 접종하지 않습니다. 백신 2차 접종 시(1차 접종 후 14일) 발열 또는 설사가 있는 소아는 연구에서 제외됩니다.

비소 관련 연구의 경우 비소 수치를 평가하기 위해 소변을 수집하고 보관합니다. 이것은 표준 절차를 사용하여 ICDDR,B의 생화학 및 영양 부서에서 수행됩니다.

백신, 관리 및 배정:

듀코랄. 콜레라 백신인 Dukoral은 Swedish Bacteriological Laboratories(SBL Vaccin AB 스톡홀름, 스웨덴)에서 생산합니다. 이 불활성화 경구용 콜레라 백신은 LPS와 단백질 항원을 모두 포함하고 콜레라 독소(rCTB)의 재조합 B 서브유닛을 포함하는 O1 ElTor 및 고전 V. 콜레라의 개별 변종에서 준비한 죽은 박테리아로 구성됩니다. 1회 용량의 백신에는 1.25 x 1011개의 죽은 전체 세포와 1mg의 rCTB가 포함되어 있습니다. 사용 직전에 액상 백신의 개별 용량을 재구성된 중탄산염 완충액과 혼합합니다. 어린이의 경우 백신은 중탄산염-구연산 완충액 20ml(총 4티스푼)에 현탁됩니다[완충액은 중탄산염 완충액 한 봉지에 물 100ml를 첨가하여 준비합니다(중탄산염 2g, 구연산 750mg, Recip AB, 스톡홀름). 성인의 경우 Dukoral은 완충액 100ml에 재구성됩니다.

Vivotif: 약독화된 경구용 장티푸스 생백신 Vivotif에는 S. Typhi Ty21a 균주의 2-6x109 CFU(집락 형성 단위)가 포함되어 있습니다(1,2). 스위스 베른에 있는 Berna Biotech Ltd는 이 백신을 제조합니다. 장용성 장티푸스 백신은 3캡슐 세트로 포장되어 있습니다. 백신 캡슐을 식수와 함께 삼키고 1일, 3일, 5일 격일로 투여합니다. 5세 미만 어린이의 예방접종을 위해 여행자 클리닉(스웨덴 및 미국)의 어린이를 위한 절차와 같이 중탄산염 완충액으로 백신을 투여할 계획입니다. 이를 위해 캡슐을 열고 내용물을 20ml의 중탄산염 완충액에 현탁한 다음 경구로 복용합니다.

전체 샘플 크기 계산:

표본 크기는 95% 신뢰도, 기준선 대비 50% 개선의 최소 감지 평균 차이(DMD), 약 15% 탈락에 대해 조정된 단측 가설을 사용하여 다양한 개입에 대해 추정되었습니다.

방글라데시에서 실시된 초기 Dukoral 콜레라 백신 연구에서 6개월에서 2세 사이의 접종 어린이의 56%가 살진균 항체에 반응했습니다. Vivotif 백신 데이터의 경우 >6세 백신에서 67%의 혈청 전환이 기록되었습니다. 연구의 다양한 구성 요소에 대한 샘플 크기는 어린이의 50%가 Vivotif에 반응할 것이라는 가정을 기반으로 계산되었습니다. Dukoral에 대한 면역 반응에 대한 아연 보충으로 얻은 결과에 근거하여 아연 보충 시 비율이 56%에서 79%로 증가하고 Vivotif에 대한 반응이 30% 증가(약 15 감소율)한다고 가정하면 샘플 크기 각 그룹(아연 유무에 관계없이)에서 75가 됩니다.

도시 다카에서 2~5세 어린이의 주요 장내 기생충 유병률은 약 78%입니다. 콜레라 및 장티푸스 백신 접종 전 구충제 치료 효과를 보기 위해 Dukoral(n=102x2=204)의 각 그룹에 102명의 어린이를 등록하고 Vivotif 백신(102 x 2 = 204). 각 백신에 대해 한 그룹은 치료를 받고 다른 그룹은 치료를 받지 않습니다. 따라서 경구 콜레라 및 장티푸스 백신에 대한 면역 반응에 대한 구충제의 효과를 확인하기 위해 총 408명의 어린이를 대상으로 연구할 계획입니다.

Dukoral에 대한 면역 반응에 대한 비소의 영향을 확인하기 위해 비소 오염되지 않은 지역의 어린이들 사이에서 백신의 면역원성은 55%이고 오염된 지역에서는 35%로 감소할 것이라고 가정합니다. 95% 신뢰도와 90% 검정력으로 이 차이를 탐지하기 위해 두 연구 영역 각각에서 표본 크기를 138로 추정했습니다. 후속 조치에 약 10%의 손실이 있는 경우 필요한 샘플 크기는 154개입니다. 따라서 2세에서 5세 사이의 총 308명(154 x 2 = 308)명의 어린이가 등록됩니다.

경구 콜레라 백신에 대한 급성 및 기억 B 및 T 세포 반응을 결정하기 위해 성인(18-45세) 및 다양한 연령대의 어린이(1-5세)에서 연구가 수행될 것입니다. 연구의 이 부분에서는 성인 25명, 유아(2~5세) 25명, 2세 미만 어린이 25명이 예방접종을 받게 됩니다. Vivotif에 대한 응답을 위해 성인(n=25) 및 유아(n-25)만 연구합니다.

참가자는 면역화 전, 초기 면역화 후 기간(7일 후), 마지막 투여 후 30일 및 6, 12 및 24개월에 T 및 B 세포 반응에 대해 연구하고 후속 조치를 취할 것입니다.

관련 개입의 관리

Vivotif에 대한 면역 반응에 대한 아연의 영향 우리는 예방 접종 2주 전부터 소아에게 황산아연(20mg/일)을 매일 보충함으로써 경구용 장티푸스 백신과 콜레라 백신의 면역원성에 미치는 아연의 영향을 연구하고자 합니다. 샘플 수집을 위한 마지막 후속 조치(n=150).

Vivotif 및 Dukoral에 대한 면역 반응에 대한 구충제가 미치는 영향 콜레라 및 장티푸스 예방 접종, 콜레라 및 장티푸스 예방 접종 전에 구충제 치료의 효과를 확인하기 위해 총 408명의 어린이가 등록됩니다. 이를 위해 어린이는 예방 접종 1주일 전에 알벤다졸(400mg)과 세크니다졸(500mg)을 투여받습니다.

Dukoral에 대한 면역 반응에 대한 비소의 영향 연구 이 연구는 비소 오염 지역(Shahrasti)과 비소가 없는 지역(Mirpur)에서 어린이(2-5세)를 대상으로 실시됩니다. 이를 위해 총 308명의 어린이(각 사이트에서 154명)가 등록되어 Dukoral로 예방접종을 받을 것입니다. 이 연구는 처음으로 비소가 발생하기 쉬운 지역과 비소가 적은 지역에서 점막 백신에 대한 면역 반응을 비교할 것입니다. 소변은 비소 수준을 결정하기 위해 예방 접종 전에 모든 참가자로부터 수집됩니다.

소아 및 성인의 경구용 콜레라 및 장티푸스 백신에 대한 급성 및 기억 B 및 T 세포 반응을 결정합니다.

총 150명의 피험자가 백신을 접종하고 면역화 후 초기 기간(접종 후 7일), 30일, 6, 12 및 24개월 후의 기간 동안 T 및 B 세포 반응에 대해 후속 조치를 취할 것입니다.