Idarubicin은 급성 골수성 백혈병 환자에서 Daunorubicin보다 더 높은 유도 관해율과 품질로 MDR1 유도 화학내성을 극복합니다.

급성 골수성 백혈병(AML)의 장기 생존율은 화학 요법 프로토콜의 개선과 조혈 줄기 세포 이식으로 인해 상당히 연장되었습니다. 그러나 불응성 AML 환자의 약 20%-40%는 완전관해(CR) 달성에 실패하고 CR 환자의 약 50%는 결국 재발할 것입니다. 1-3 불응성 및 재발성 AML 환자는 예후가 매우 좋지 않으므로 불응성 및 재발은 AML의 화학 요법에 대한 주요 과제입니다.

화학 저항은 AML 치료의 성공에 대한 주요 장애물 중 하나입니다.4 AML 항암화학요법의 주요 매개체 중 하나는 다제내성-1(MDR1) 유전자와 투과성 당단백질 또는 P-gp로도 알려진 MDR1 단백질입니다.5,6,7 백혈병 모세포에 대한 연구는 MDR1 발현과 화학 요법에서 일반적으로 사용되는 여러 항암제에 대한 암세포 저항성을 유발하는 세포 증식 억제 약물의 낮은 세포 내 보유와 관련이 있음을 보여주었습니다. 여러 후속 연구에서 MDR1 발현 수준이 백혈병 환자의 치료 반응 및 생존에 미치는 영향을 나타냈으며, MDR1 발현이 증가함에 따라 화학 요법에 대한 내성 빈도가 증가했습니다.8,9,10 MDR1 발현을 결정하기 위한 이전의 방법에는 유세포 분석법 및/또는 면역조직화학에 의한 P-당단백질의 증명 및 RNA 발현에 대한 분자 중합효소 연쇄 반응(PCR) 기반 검정이 포함되었습니다. 그러나 이러한 분석은 표준화하기 어렵거나 수행하기가 지루한 것으로 입증되었으며 주로 정성적 또는 반정량적 분석에 중점을 둡니다. 11,12 실시간 형광 정량 PCR은 민감도를 높이고 높은 특이도를 유지합니다. 증폭 생산의 오염으로 인한 위양성도 밀폐 작업으로 줄일 수 있습니다. RQ-PCR은 유전자 발현을 민감하고 정량적으로 측정할 수 있는 새로운 방법론입니다. 12MDR1 유전자 발현 판별을 위한 RQ-PCR 방법을 확립하였습니다. 우리는 AML 환자의 MDR1 발현과 CR 비율의 관계를 결정하기 위해 AML 환자의 소규모 코호트를 대상으로 파일럿 연구를 수행했습니다. 데이터는 대부분의 AML 사례에서 MDR1 발현이 발견되었음을 보여줍니다. 그러나 MDR1 발현 수준은 경우에 따라 크게 다릅니다. 이 결과는 RQ-PCR 방법이 정성적 RT-PCR 방법에 의해 양성인 다른 AML 사례에서 MDR1 발현 수준을 검출하기 위한 정확한 정량적 측정을 제공할 것임을 나타냅니다. 13,14 파일럿 결과는 유도 요법에 대한 완전 반응률이 높은 수준의 MDR1 발현으로 인해 손상되었음을 나타냅니다. 15

최소 잔류 질환(MRD)은 백혈병 재발의 주요 원인입니다. 인간 백혈병의 치료 강도는 MRD 유전자의 발현 상태로 평가할 수 있다고 보고된 바 있다. 그러나 급성 백혈병의 50% 이상, 특히 AML에서는 MRD 모니터링에 적합한 알려진 유전적 병변 또는 클론원성 마커가 부족합니다. WT1 유전자는 징크 핑거 전사 인자를 암호화하는 염색체 11p13에 위치하며 대부분의 AML 환자에서 확인되었습니다. WT1 수준의 검출은 AML에서 MRD 발현 상태를 효과적으로 모니터링할 수 있다고 보고되었습니다.16,17 따라서 WT1 발현은 MRD를 모니터링하고 AML 환자의 관해 품질을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. WT1 수준을 감지함으로써 다양한 유도 요법의 효능을 평가할 수 있습니다.

다중 형광 정량 PCR을 사용하면 여러 표적 유전자를 동시에 정량적으로 증폭할 수 있습니다. 따라서 다중 형광 정량 PCR이 임상 적용에 더 적합합니다. 이 기술은 더 높은 정확도, 특이성 및 재현성을 제공할 뿐만 아니라 절차를 단순화하고 측정 비용을 줄입니다. MDR1 및 WT1 유전자의 재조합 플라스미드가 구축되었으며 다중 형광 정량 PCR 방법론도 우리 그룹에서 개발되었습니다.14

높은 MDR1 유전자 발현은 기존의 화학요법에 대한 AML 내성의 일반적인 특징입니다.18,19 MDR을 극복하는 전략 중 하나는 P-당단백질에 의해 펌핑되는 약물 유출을 상쇄하기 위해 약물의 지용성을 증가시키고 세포내 약물 농도를 높이는 것입니다. 새로운 안트라사이클린 계열인 이다루비신(IDA)은 기존 마르셀로마이신에 비해 지용성이 강화되어 세포막 투과가 용이하다. 또한, IDA(4-IDA)의 생체 내 대사산물은 IDA와 동일한 항종양 활성을 가지며 생체 내 반감기가 더 길다. 그것은 또한 혈액 뇌 장벽을 투과할 수 있습니다. 그 결과 IDA는 다른 마르셀로마이신보다 강력한 항백혈병 활성을 가지며 P-당단백질 매개 약물 내성을 부분적으로 극복할 수 있다.20, 21 최근 파일럿 연구에서 우리는 160명의 de novo AML 환자의 전처리된 골수 샘플에서 MDR1의 발현을 발견했으며 de novo AML 사례에서 MDR1/GAPDH 비율의 중앙값은 0.016(0-81.865)이었습니다. MDR1 유전자 발현의 중앙값은 높은 또는 낮은 MDR1 유전자 발현 수준의 컷오프 포인트로 간주되었습니다. 높은 MDR1 발현 환자의 경우 낮은 MDR1 발현 환자(80.0%, P =0.009). 본 후향적 파일럿 연구에서는 123명의 환자가 daunorubicin(DNR 35~45mg/m2/d,3일) 또는 이다루비신(IDA 6~8mg/m2/d, 3일)과 cytarabine(Ara-c100~200 mg/m2/d, 7일) 관해 유도 및 2코스 화학요법 후 IA 요법(57건)과 DA 요법(66건) 사이에 CR 비율(80.7% vs 57.6%)에서 유의한 차이가 관찰되었습니다. , P=0.006). 또한 MDR1 발현이 높은 AML 환자의 CR 비율(75.9% vs 43.6%, P=0.011)과 관련하여 두 치료군 간에 유의미한 차이가 발견될 수 있었습니다. 우리의 데이터는 IDA가 de novo 높은 MDR1 발현 AML 환자에서 DNR보다 더 높은 CR 비율로 MDR1 유도된 화학내성을 극복할 수 있음을 보여줍니다. 이러한 결과는 IA 요법과 DA 요법의 CR 비율을 MDR1 발현이 높은 노보 AML 환자를 대상으로 이다루비신이 새로운 급성 골수성 백혈병 환자에서 다우노루비신보다 높은 유도 관해율로 MDR1 유도 화학내성을 극복할 수 있는지 여부를 확인합니다. 우리는 IA 요법을 사용하는 높은 MDR1 환자 그룹에서 더 유리한 결과가 더 높은 관해율과 관련이 있을 수 있다고 추측했습니다.

낮은 MRD 수준을 달성한 AML 환자는 재발률이 극히 낮다고 보고되었습니다. 또한 IA 요법으로 치료받은 환자는 DA 요법을 받은 환자보다 장기 생존율이 훨씬 더 높았다고 보고되었습니다.22-24 따라서 우리는 IA 그룹에서 더 유리한 결과가 낮은 MRD 수준 및 높은 관해 품질과 관련이 있을 수 있다고 추측했습니다. 또한 본 연구는 IA 요법과 DA 요법에 의한 유도 요법이 DA 요법보다 MRD 수준이 낮고 관해 품질이 높은지 여부를 개별적으로 IA 또는 DA로 유도 요법 후 WT1 및 MDR1 유전자 발현 수준의 변화에 ​​대한 전향적 분석을 수행하는 것이다. .