Kasai 수술 당시 담도 폐쇄증을 가진 영아 림프절의 모체 미세키메라증 (K-LNMC)

비증후군성 담도 폐쇄증(BA, 가장 일반적인 형태)이 있는 영아의 수술 시, 외과의는 거의 변함없이 포도를 구성할 수 있는 간문과 소장 장간막에서 크기가 최대 2cm인 다발성 림프절 부종의 눈에 띄는 발견에 주목합니다. 콤플렉스처럼. 다른 병리를 위해 개복술을 받은 같은 나이의 영아는 일반적으로 그러한 결절을 나타내지 않습니다.

담도 폐쇄증은 치료하지 않고 방치하면 치명적인 신생아 질환입니다. 조직학적으로 그것은 부분적으로 특정한 염증성 침윤 및 진행성 간경변증 내에서 간내 및 간외 담관의 변성에 해당합니다.

이 드물지만 지속적인 질병(1:8-1:15.000)의 원인은 알려져 있지 않습니다. 현재 BA 병인 연구에서 두 가지 주요 방법이 추구됩니다.

1. 바이러스로 유발된 주산기 (자가) 면역 과정이 의심됩니다. BA의 실험적 형태는 dsRNA-바이러스로 뮤린 어미를 감염시킴으로써 유발될 수 있습니다. Rhesus-rotaviruses 또는 Reo-viruses는 생쥐에서 어머니의 백신 접종으로 실험적 BA를 예방했습니다. BA에 대한 γ/δ-T-세포 및 IL17/IL 23 경로의 중요성이 현재 조사되고 있습니다. 그러나 동일한 배치의 바이러스로 처리된 동계 동물 그룹에서는 BA가 일정하지 않은 경향이 있으며 이는 동물 모델의 유효성과 같은 간외 담관으로 제한됩니다.
2. 연구의 다른 방향은 주로 신생아 동물과 관련된 실험에 의존하지 않습니다. 임신 중에 태반 장벽이 모체 림프구에 대해 투과성이 될 수 있다는 징후가 있으며(예: 탈락 기질 세포에서 케모카인을 끌어들이는 T 세포의 잘못된 침묵에 의해) 이미 2008년 BA 유아의 간에서 모체 림프구가 입증되었습니다. 결과적으로 산모-태아 미세키메리즘 현상이 BA 병인학 연구의 초점이 되었습니다. 패션과 같은 접목 대 숙주.

최근 임신 중 면역 체계의 성숙을 위한 장간막 림프절과 문맥 림프절의 중요성이 보고되었습니다. 또한 간과 문맥 림프절 사이의 흐름이 양방향이라는 것이 입증되었습니다. In 마우스에서 CD4+ 및 FoxP3+ 조절 T 세포의 빈도는 어미의 면역 상태와 관련이 있는 것으로 밝혀졌습니다. 따라서 우리는 Kasai의 수술 중에 외과의가 지속적으로 만나는 BA 영아의 눈에 띄게 부어오른 림프절이 병태생리학적 중요한 림프구 밀매 메커니즘을 더 잘 이해하는 열쇠를 쥐고 있을 수 있다는 가설을 세웠습니다.

표준 수술에서는 간경변이 증가하는 경주에서 4개월까지 의미가 있는 Kasai 수술은 간문의 주요 담관(소위 "문문 판")의 저하된 나머지 부분을 절제합니다. , Roux y-loop가 절제 부위에 봉합됩니다. 남은 담관에서 우발적인 담즙 흐름을 배출해야 합니다. 기술적 복잡성과 침습성이 중간 정도인 이 잠정적인 외과적 치료의 장기 성공률은 ca. 15-20%. 나머지에서는 부분적으로 성공하면 간 이식의 필요성을 연기할 수 있습니다. 우리는 조직학적으로 입증된 담도 폐쇄증이 있는 7명의 연속 환자에서 문맥 주위 림프절에 모계 유전 물질에 대한 증거가 있는지 여부를 조사했습니다.

방법 :

BA로 수술 전 진단을 받은 7명의 환자가 연구에 포함되었습니다. 황달 연장의 다른 원인(α1 항트립신 결핍, Alagilles 증후군, PFIC 등)은 간내 담관이 없는 기술적 성공적인 ERCP(5/7 환자) 방법 중에서 제외되었습니다.

부모의 정보에 입각한 동의를 얻은 후 EDTA 전혈 2ml를 엄마와 아기에게서 채취했습니다. Kasai의 수술 중 하나의 포털과 하나의 장간막 림프절이 샘플링되었습니다(하노버 의과대학 윤리 위원회 투표 No.1650/11.12.2012. 양극성 절개 후 장간막 틈을 4-0 Vicryl 봉합사로 봉합했습니다.

이전에 기술된 바와 같이 림프절을 기계적으로 파괴하고 DNA를 효소적으로 추출하고(QIAmp Kit, Qiagen, Hilden/Germany) 30 ug/ml로 정규화했습니다.

마커 LIPOL, VWA, TH01, D19S253, CSF, PLA2A에 대한 다중 PCR로 짧은 탠덤 반복 분석을 실현했습니다. FGA, D21S11, D18S51은 설명된 대로입니다. 간략하게, 단편 길이 분석은 GeneScan 3.11을 사용하는 Abi Prism 310 시스템에서 수행되었습니다. 엄마와 아기의 혈액을 림프절 DNA와 비교하는 소프트웨어.

유전적 단일 뉴클레오티드 다형성(SNP)은 정량적 실시간 PCR 키메라 분석에 의해 추적되었습니다. iCycler iQ5 실시간 PCR 플랫폼(Bio-Rad)에서 ABsolute QPCR Rox Mix(Thermo Scientific)를 사용하여 반응을 실행했습니다. 맞춤 설계된 프라이머 및 프로브는 Sigma-Aldrich에서 제공했습니다. 알부민 유전자를 증폭하여 대조군 반응 및 샘플 DNA의 정규화를 수행하였다.