혼합 식사에 대한 대사 및 면역계 반응

이 연구의 목적은 지방이 증가하는 식사에 대한 반응으로 지방 조직의 대사 및 염증과 순환의 차이를 조사하는 것입니다. 체지방이 증가한 참가자는 '건강한' 체중을 가진 참가자에 비해 식사에 대해 더 뚜렷한 염증 반응을 보일 것이라는 가설이 있습니다. 염증 반응은 지방 조직에서 유전자 발현 및 단백질 분비의 변화를 측정하고 혈액 내 대사, 인슐린 저항성, 심혈관 질환 및 염증의 마커를 측정하여 평가됩니다.

연구 광고 후, 관심 있는 잠재적 참여자는 이메일/전화 서신을 통해 추가 정보를 위해 수석 조사관에게 연락하도록 요청받을 것입니다. 포함/제외 기준에 따라 적격성에 대한 초기 평가가 있을 것이며, 이러한 요구 사항이 충족되면 잠재적 참가자가 회의에 초대되어 시험에 대해 더 논의하게 됩니다. 참가자 정보 시트를 읽고 연구 일정을 설명하는 흐름도를 본 후 참여를 원하는 경우 동의서에 서명하라는 요청을 받게 됩니다. 그런 다음 몇 가지 예비 인체측정 측정, 9일 간의 신체 활동 모니터링 및 시험 날짜(실험실에서만 1일)에 대한 날짜가 예약됩니다.

예비 측정:

예비 테스트에는 신장, 체중, 허리 및 엉덩이 둘레, 시상 허리 높이 및 혈압의 인체 측정이 포함됩니다. 이러한 측정은 University of Bath Physiology Laboratories에서 이루어집니다.

신체 활동 모니터링:

9일 동안 참가자는 신체 활동 모니터(Actiheart™)를 착용하고 해석을 돕고 평균 일일 활동 에너지 소비량을 보다 정확하게 계산할 수 있도록 이 기간 동안 해당 신체 활동 일지를 기록하도록 요청받습니다. 참가자는 이 기간 동안 정상적인 생활 습관/루틴을 의식적으로 변경해서는 안 됩니다. 활동 모니터링의 처음 2일은 반응성을 설명하기 위해 분석에서 제외됩니다.

주요 시험일:

주요 시험일 3일 전에 참가자는 음식과 음료 섭취량을 기록하고 격렬한 신체 활동을 삼가야 하는 48시간 전에 기록해야 합니다. 참가자는 24시간 전에는 알코올이나 카페인 섭취도 삼가야 합니다.

참가자는 10시간 금식 후 아침에 University of Bath의 Sports Training Village에 도착하여 이중 에너지 X선 흡수계(DEXA)를 사용하여 신체 구성을 정확하게 평가해야 합니다. 그런 다음 생리학 휴식 실험실로 이동하여 휴식 대사율(RMR) 평가를 위해 기본 호기 가스를 수집합니다. 팔뚝 정맥에 캐뉼라를 삽입하고 대사/염증 마커 분석 및 T 세포 분리를 위해 기준 혈액 샘플을 채취합니다. 바늘 흡인 기술을 사용하여 지방 샘플도 얻습니다.

그런 다음 참가자는 Rijkelijkhuizen J. et al, 2008이 사용한 식사에서 개조한 브리오슈, 잼, 버터 및 밀크셰이크로 구성된 탄수화물과 지방 함량이 높은 아침 식사 유형의 식사를 하도록 요청받게 됩니다. 베타 세포 반응(즉, 인슐린)은 포도당 부하와 비교하여 인슐린 감수성에 차이를 보였으므로 이 식사 유형은 지방에 기반한 대사의 차이를 식별해야 합니다.

게다가, 고 전분/저 섬유질 식품이 더 큰 염증을 유발할 수 있다는 일부 증거가 있습니다(Manning, Sutherland et al. 2008). 모든 개인의 식사 구성은 동일하지만 탄수화물의 에너지 함량은 개인의 휴식 대사율의 일부로 계산됩니다. 이를 통해 체중/구성 차이에 대한 에너지 섭취량을 표준화할 수 있으며 휴식 시 개인의 에너지 요구 사항을 반영합니다.

식사는 15분 이내에 섭취해야 하며 혈액 샘플은 식사 섭취 후 15, 30, 60, 90분에 캐뉼라에서 채취한 다음 매시간 6시간 동안 대사 및 염증 마커의 변화를 모니터링합니다. 캐뉼라가 진정한 결과를 방해하는 국소 염증을 자극할 수 있다는 증거가 있기 때문에 염증 마커 분석을 위해 정맥 천자에 의해 식후 2시간 및 6시간에 추가 혈액 샘플을 얻을 것입니다.

RMR을 위한 만료 가스 샘플도 매시간 채취하고 간접 열량계를 사용하여 식사에 대한 상대적인 지방 및 탄수화물 대사를 추정합니다.

두 번째 지방 샘플은 지방 조직 내에서 식사에 대한 염증 및 대사 반응을 검사하기 위해 6시간에 채취됩니다. T 세포 분리를 위한 두 번째 혈액 샘플도 이 시점에서 얻어 T 세포에서 상응하는 대사/염증 반응을 검사합니다.

분석:

시험 당일 전혈은 백혈구 수, 포도당 및 젖산염에 대해 분석됩니다. 혈장 및 혈청 샘플은 원심분리를 통해 전혈에서 추출되어 -80에 저장됩니다. 단핵구와 T 림프구(백혈구 집단)는 나중에 인슐린 감수성과 배양 실험을 평가하기 위해 전혈에서 분리됩니다.

각 지방 샘플에서 지방 조직 또는 지방 세포(소화 방법을 사용하여 지방 조직 내의 다른 세포로부터 분리됨)의 별도 부분을 배양하고 나중에 조사하기 위해 배지를 수집합니다. mRNA 발현은 또한 지방 조직 및 분리된 지방세포에서 조사될 것이다. 지방 조직(SVF)의 나머지 세포는 유세포 분석 및 발현/분비 분석을 사용하여 세포 집단의 추후 분석을 위해 저장됩니다.