Metabolske og immunsystemresponser på et blandet måltid

Målet med denne forskningen er å undersøke forskjeller i metabolisme og betennelse i fettvev og sirkulasjonen som respons på et måltid med økende fett. Det antas at deltakere med økt fettmasse vil ha en mer uttalt inflammatorisk respons på et måltid sammenlignet med deltakere med "sunn" vekt. Den inflammatoriske responsen vil bli vurdert ved å måle endringer i genuttrykk og proteinsekresjon i fettvevet og ved å måle markører for metabolisme, insulinresistens, hjerte- og karsykdommer og betennelser i blodet.

Etter annonsering av studien vil interesserte potensielle deltakere bli bedt om å kontakte hovedetterforskeren for ytterligere informasjon via e-post/telefonkorrespondanse. Det vil være en innledende vurdering av kvalifisering basert på inkluderings-/eksklusjonskriterier, og hvis disse kravene er oppfylt, vil den potensielle deltakeren bli invitert til et møte for å diskutere prøven videre. Etter at de har lest deltakerinformasjonsarket og sett flytskjemaet som skisserer tidslinjen for studien, hvis de ønsker å delta, vil de bli bedt om å signere et samtykkeskjema. Datoer vil da bli planlagt for noen foreløpige antropometriske målinger, 9 dager med fysisk aktivitetsovervåking og prøvedatoen (kun 1 hel dag i laboratoriet).

Foreløpige mål:

Foreløpig testing vil omfatte antropometriske målinger av høyde, vekt, midje- og hofteomkrets, sagittal midjehøyde og blodtrykk. Disse målingene vil finne sted ved University of Bath Physiology Laboratories.

Overvåking av fysisk aktivitet:

I 9 dager vil deltakerne bli utstyrt med en fysisk aktivitetsmonitor (Actiheart™) og bedt om å registrere en tilsvarende dagbok over deres fysiske aktivitet i løpet av denne perioden for å hjelpe til med tolkningen og tillate en mer nøyaktig beregning av gjennomsnittlig daglig aktivitetsenergiforbruk. Deltakere bør ikke gjøre noen bevisste endringer i sine vanlige livsstilsvaner/rutiner i denne perioden. De første 2 dagene med aktivitetsovervåking vil bli ekskludert fra analyse for å ta hensyn til reaktivitet.

Hovedprøvedag:

I løpet av de 3 dagene før hovedprøvedagen vil deltakerne bli bedt om å registrere mat- og drikkeinntaket og 48 timer før de bør avstå fra å utføre anstrengende fysisk aktivitet. I løpet av 24 timer før bør deltakerne også avstå fra å innta alkohol eller koffein.

Deltakerne bør ankomme Sports Training Village, University of Bath om morgenen etter en 10 timers faste, hvor de vil få nøyaktig vurdert kroppssammensetningen ved hjelp av et dobbeltenergi røntgenabsorptiometer (DEXA). De vil deretter bli ført til Physiology Resting Laboratory hvor baseline utløpte gasser vil bli samlet for vurdering av hvilemetabolsk hastighet (RMR). En kanyle vil bli satt inn i en underarmsvene og baseline blodprøve(r) tatt for analyse av metabolske/inflammatoriske markører og isolering av T-celler. En fettprøve vil også bli tatt med en nålespirasjonsteknikk.

Deltakeren vil deretter bli bedt om å innta et frokost-måltid med høyt karbohydrat- og fettinnhold bestående av brioche, syltetøy, smør og milkshake som er tilpasset fra et måltid brukt av Rijkelijkhuizen J. et al, 2008, som induserte sterkere beta-celleresponser (dvs. av insulin) sammenlignet med en glukosebelastning og viste forskjeller med insulinfølsomhet, så denne måltidstypen bør identifisere forskjeller i metabolisme basert på fett.

Videre er det noen bevis for at mat med mye stivelse/fiberfattig kan indusere større betennelse (Manning, Sutherland et al. 2008). Måltidssammensetningen for alle individer vil være identisk, men energiinnholdet fra karbohydrater vil bli beregnet som en del av individenes hvilestoffskifte. Dette tillater standardisering av energiinntaket for forskjeller i kroppsvekt/sammensetning og vil reflektere energibehovet til individet i hvile.

Måltidet bør inntas innen 15 minutter og blodprøver tas fra kanylen etter 15, 30, 60 og 90 minutter og deretter hver time i 6 timer etter inntak av måltidet for å overvåke endringer i metabolske og inflammatoriske markører. Ytterligere blodprøver vil bli tatt 2 og 6 timer etter måltid ved venepunktur for analyse av inflammatoriske markører da det er bevis på at kanylen kan stimulere lokal betennelse som forstyrrer det sanne resultatet.

Utgåtte gassprøver for RMR vil også bli tatt hver time og indirekte kalorimetri vil bli brukt for å estimere relativ fett- og karbohydratmetabolisme som respons på måltidet.

En andre fettprøve vil bli tatt etter 6 timer for å undersøke inflammatoriske og metabolske reaksjoner på måltidet i fettvevet. En andre blodprøve for T-celleisolering vil også bli tatt på dette tidspunktet for å undersøke tilsvarende metabolske/inflammatoriske responser i T-celler.

Analyse:

På prøvedagen vil fullblod bli analysert for antall hvite blodlegemer, glukose og laktat. Plasma- og serumprøver vil bli ekstrahert fra fullblodet via sentrifugering og lagret ved -80. Monocytter og T-lymfocytter (populasjoner av hvite blodceller) vil også bli isolert fra fullblod for senere vurdering av insulinfølsomhet og dyrkingsforsøk.

I hver fettprøve vil separate porsjoner av enten fettvev eller adipocytter (isolert fra de andre cellene i fettvevet ved hjelp av en fordøyelsesmetode) dyrkes og media samles inn for senere undersøkelser. mRNA-ekspresjon vil også bli undersøkt i fettvev og isolerte adipocytter. De gjenværende cellene fra fettvevet (SVF) vil også bli lagret for senere analyse av cellepopulasjoner ved bruk av flowcytometri, og ekspresjons/sekresjonsanalyse.