Réponses du système métabolique et immunitaire à un repas composé

L'objectif de cette recherche est d'étudier les différences de métabolisme et d'inflammation dans le tissu adipeux et la circulation en réponse à un repas avec augmentation de l'adiposité. Il est supposé que les participants ayant une masse grasse accrue auront une réponse inflammatoire plus prononcée à un repas par rapport aux participants ayant un poids « sain ». La réponse inflammatoire sera évaluée en mesurant les changements dans l'expression des gènes et la sécrétion de protéines dans le tissu adipeux et en mesurant les marqueurs du métabolisme, de la résistance à l'insuline, des maladies cardiovasculaires et de l'inflammation dans le sang.

Suite à l'annonce de l'étude, les participants potentiels intéressés seront invités à contacter l'investigateur en chef pour plus d'informations par e-mail/téléphone. Il y aura une évaluation initiale de l'éligibilité basée sur les critères d'inclusion/exclusion et, si ces exigences sont remplies, le participant potentiel sera invité à une réunion pour discuter plus en détail de l'essai. Après avoir lu la fiche d'information du participant et vu l'organigramme décrivant le calendrier de l'étude, s'il souhaite participer, il lui sera demandé de signer un formulaire de consentement. Seront ensuite programmées des dates pour quelques mesures anthropométriques préliminaires à effectuer, 9 jours de suivi de l'activité physique et la date d'essai (1 journée complète en laboratoire uniquement).

Mesures préliminaires :

Les tests préliminaires comprendront des mesures anthropométriques de la taille, du poids, du tour de taille et des hanches, du tour de taille sagittal et de la tension artérielle. Ces mesures auront lieu aux laboratoires de physiologie de l'Université de Bath.

Suivi de l'activité physique :

Pendant 9 jours, les participants seront équipés d'un moniteur d'activité physique (Actiheart ™) et invités à enregistrer un journal correspondant de leur activité physique pendant cette période pour faciliter son interprétation et permettre un calcul plus précis de la dépense énergétique moyenne d'activité quotidienne. Les participants ne doivent apporter aucun changement conscient à leurs habitudes/routines de vie normales pendant cette période. Les 2 premiers jours de suivi d'activité seront exclus de l'analyse pour tenir compte de la réactivité.

Jour d'essai principal :

Dans les 3 jours précédant le jour principal de l'essai, les participants seront invités à enregistrer leur consommation de nourriture et de boisson et 48 heures avant de s'abstenir d'effectuer toute activité physique intense. Au cours des 24 heures précédentes, les participants doivent également s'abstenir de consommer de l'alcool ou de la caféine.

Les participants doivent arriver au Sports Training Village de l'Université de Bath le matin après un jeûne de 10 heures où leur composition corporelle sera évaluée avec précision à l'aide d'un absorptiomètre à rayons X à double énergie (DEXA). Ils seront ensuite emmenés au laboratoire de physiologie au repos où les gaz expirés de base seront collectés pour l'évaluation du taux métabolique au repos (RMR). Une canule sera insérée dans une veine de l'avant-bras et un ou plusieurs échantillons sanguins de référence seront prélevés pour l'analyse des marqueurs métaboliques/inflammatoires et l'isolement des lymphocytes T. Un échantillon de graisse sera également obtenu à l'aide d'une technique d'aspiration à l'aiguille.

Le participant sera ensuite invité à consommer un repas de type petit-déjeuner riche en glucides et en matières grasses composé de brioche, de confiture, de beurre et de milk-shake qui a été adapté d'un repas utilisé par Rijkelijkhuizen J. et al, 2008, qui induit une plus forte les réponses des cellules bêta (c'est-à-dire de l'insuline) par rapport à une charge de glucose et ont montré des différences avec la sensibilité à l'insuline, ce type de repas devrait donc identifier les différences de métabolisme en fonction de l'adiposité.

De plus, il existe des preuves que les aliments riches en amidon/faibles en fibres peuvent induire une plus grande inflammation (Manning, Sutherland et al. 2008). La composition des repas pour tous les individus sera identique mais la teneur énergétique des glucides sera calculée comme une partie du taux métabolique au repos des individus. Cela permet de standardiser l'apport énergétique pour les différences de poids/composition corporelle et reflétera les besoins énergétiques de l'individu au repos.

Le repas doit être consommé dans les 15 minutes et des échantillons de sang seront prélevés de la canule à 15, 30, 60 et 90 minutes puis toutes les heures pendant 6 heures après la consommation du repas pour surveiller l'évolution des marqueurs métaboliques et inflammatoires. Des échantillons de sang supplémentaires seront obtenus 2 et 6 heures après le repas par ponction veineuse pour l'analyse des marqueurs inflammatoires car il est prouvé que la canule peut stimuler une inflammation locale qui interfère avec le vrai résultat.

Des échantillons de gaz expirés pour RMR seront également prélevés toutes les heures et une calorimétrie indirecte sera utilisée pour estimer le métabolisme relatif des graisses et des glucides en réponse au repas.

Un deuxième échantillon de graisse sera prélevé à 6 heures pour examiner les réponses inflammatoires et métaboliques au repas au sein du tissu adipeux. Un deuxième échantillon de sang pour l'isolement des lymphocytes T sera également obtenu à ce moment-là pour examiner les réponses métaboliques/inflammatoires correspondantes dans les lymphocytes T.

Analyse:

Le jour de l'essai, le sang total sera analysé pour le nombre de globules blancs, le glucose et le lactate. Des échantillons de plasma et de sérum seront extraits du sang total par centrifugation et stockés à -80. Les monocytes et les lymphocytes T (populations de globules blancs) seront également isolés du sang total pour une évaluation ultérieure de la sensibilité à l'insuline et des expériences de culture.

Dans chaque échantillon de graisse, des portions séparées de tissu adipeux ou d'adipocytes (isolées des autres cellules du tissu adipeux à l'aide d'une méthode de digestion) seront cultivées et des milieux collectés pour des investigations ultérieures. L'expression de l'ARNm sera également examinée dans le tissu adipeux et les adipocytes isolés. Les cellules restantes du tissu adipeux (SVF) seront également stockées pour une analyse ultérieure des populations cellulaires à l'aide de la cytométrie en flux et de l'analyse de l'expression/sécrétion.