Metaboliska och immunsystemsvar på en blandad måltid

Syftet med denna forskning är att undersöka skillnader i metabolism och inflammation i fettvävnad och cirkulationen som svar på en måltid med ökande fetthalt. Det antas att deltagare med ökad fettmassa kommer att få ett mer uttalat inflammatoriskt svar på en måltid jämfört med deltagare med en "hälsosam" vikt. Det inflammatoriska svaret kommer att bedömas genom att mäta förändringar i genuttryck och proteinutsöndring i fettvävnaden och genom att mäta markörer för ämnesomsättning, insulinresistens, hjärt-kärlsjukdom och inflammation i blodet.

Efter annonsering av studien kommer intresserade potentiella deltagare att uppmanas att kontakta chefsutredaren för ytterligare information via e-post/telefonkorrespondens. Det kommer att göras en första bedömning av behörighet baserat på inklusions-/exkluderingskriterier och, om dessa krav är uppfyllda, kommer den potentiella deltagaren att bjudas in till ett möte för att ytterligare diskutera försöket. Efter att de har läst deltagarinformationsbladet och sett flödesschemat som beskriver tidslinjen för studien, om de skulle vilja delta, kommer de att bli ombedda att underteckna ett samtyckesformulär. Datum kommer sedan att schemaläggas för vissa preliminära antropometriska mätningar, 9 dagars övervakning av fysisk aktivitet och provdatum (endast 1 hel dag i laboratoriet).

Preliminära mått:

Preliminära tester kommer att omfatta antropometriska mätningar av längd, vikt, midje- och höftomkrets, sagittal midjehöjd och blodtryck. Dessa mätningar kommer att ske vid University of Bath Physiology Laboratories.

Övervakning av fysisk aktivitet:

Under 9 dagar kommer deltagarna att utrustas med en fysisk aktivitetsmonitor (Actiheart™) och ombeds att registrera en motsvarande dagbok över sin fysiska aktivitet under denna period för att underlätta tolkningen och möjliggöra en mer exakt beräkning av den genomsnittliga dagliga aktivitetens energiförbrukning. Deltagarna bör inte göra några medvetna förändringar av sina normala livsstilsvanor/rutiner under denna period. De första 2 dagarna av aktivitetsövervakning kommer att exkluderas från analys för att ta hänsyn till reaktivitet.

Huvudprovdag:

Under de 3 dagarna före den huvudsakliga provdagen kommer deltagarna att bli ombedda att registrera sitt intag av mat och dryck och 48 timmar innan de ska avstå från att utföra någon ansträngande fysisk aktivitet. Under 24 timmar innan bör deltagarna också avstå från att konsumera alkohol eller koffein.

Deltagarna bör anlända till Sports Training Village, University of Bath på morgonen efter en 10 timmars fasta där de kommer att få sin kroppssammansättning noggrant bedömd med hjälp av en dubbelenergi röntgenabsorptiometer (DEXA). De kommer sedan att föras till Physiology Resting Laboratory där gaser som utgått från baslinjen samlas upp för bedömning av vilometabolisk hastighet (RMR). En kanyl kommer att sättas in i en underarmsven och baslinjeblodprov(er) tas för analys av metabola/inflammatoriska markörer och isolering av T-celler. Ett fettprov kommer också att tas med hjälp av en nålspirationsteknik.

Deltagaren kommer sedan att bli ombedd att konsumera en frukosttyp måltid med hög kolhydrat- och fetthalt bestående av brioche, sylt, smör och milkshake som har anpassats från en måltid som användes av Rijkelijkhuizen J. et al, 2008, vilket inducerade starkare betacellsvar (dvs insulin) jämfört med en glukosbelastning och visade skillnader med insulinkänslighet, så denna måltidstyp bör identifiera skillnader i metabolism baserat på fett.

Dessutom finns det vissa bevis för att livsmedel med hög stärkelse/lågt fiber kan inducera större inflammation (Manning, Sutherland et al. 2008). Måltidssammansättningen för alla individer kommer att vara identisk men energiinnehållet från kolhydrater kommer att beräknas som en del av individens vilande ämnesomsättning. Detta möjliggör standardisering av energiintag för skillnader i kroppsvikt/sammansättning och kommer att återspegla energibehovet hos individen under vila.

Måltiden ska intas inom 15 minuter och blodprov tas från kanylen vid 15, 30, 60 och 90 minuter och sedan varje timme i 6 timmar efter måltiden för att övervaka förändringar i metabola och inflammatoriska markörer. Ytterligare blodprov kommer att tas 2 och 6 timmar efter måltid genom venpunktion för analys av inflammatoriska markörer eftersom det finns bevis för att kanylen kan stimulera lokal inflammation som stör det verkliga resultatet.

Utgångna gasprover för RMR kommer också att tas varje timme och indirekt kalorimetri kommer att användas för att uppskatta relativ fett- och kolhydratmetabolism som svar på måltiden.

Ett andra fettprov kommer att tas efter 6 timmar för att undersöka inflammatoriska och metaboliska svar på måltiden i fettvävnaden. Ett andra blodprov för T-cellisolering kommer också att tas vid denna tidpunkt för att undersöka motsvarande metaboliska/inflammatoriska svar i T-celler.

Analys:

På försöksdagen kommer helblod att analyseras för antal vita blodkroppar, glukos och laktat. Plasma- och serumprover kommer att extraheras från helblodet via centrifugering och lagras vid -80°C. Monocyter och T-lymfocyter (populationer av vita blodkroppar) kommer också att isoleras från helblod för senare bedömning av insulinkänslighet och odlingsexperiment.

I varje fettprov kommer separata delar av antingen fettvävnad eller fettceller (isolerade från de andra cellerna i fettvävnaden med en nedbrytningsmetod) att odlas och media samlas in för senare undersökningar. mRNA-uttryck kommer också att undersökas i fettvävnad och isolerade fettceller. De återstående cellerna från fettvävnaden (SVF) kommer också att lagras för senare analys av cellpopulationer med hjälp av flödescytometri och expressions-/sekretionsanalys.