크립토스포리디움증의 치료

배경: 방글라데시의 종적 출생 코호트 연구 보고서에 따르면 어린이의 77%가 생후 첫 2년 동안 적어도 한 번은 크립토스포리디움증 발병을 경험합니다. 크립토스포리디움증은 또한 영양실조의 발달과 관련이 있어 추가로 420만 년의 장애 조정 수명 손실을 초래합니다. icddr,b에서 수행된 크립토스포리디움증에 대한 여러 연구에서 크립토스포리디움 sp. 이환율 및 사망률과 관련된 설사의 가장 중요한 원인 인자 중 하나였습니다. icddr,b의 이전 연구는 또한 다음과 같은 여러 가지 다른 흥미로운 설명을 했습니다.

1. 크립토스포리디움 sp. Dhaka의 Mirpur에 있는 코호트에서 생후 1년 동안 대부분의 어린이를 감염시켰습니다. 조사관은 영아의 최대 64%가 생후 1년에 크립토스포리디움증 진단을 받았고 이 중 26%는 동시 감염을 동반한 것으로 관찰했습니다.
2. 크립토스포리디움 sp. 여러 다른 장 병원체와 함께 발생하는 감염과 함께 상위 10위 설사 병원균으로 확립되었습니다. 수사관들은 LMIC 환경에서 영아의 여러 장 병원체 감염 및 설사가 예외 없이 일반적이라는 사실을 발견했습니다. 평균적으로 방글라데시의 Mirpur에 있는 각 유아는 단일 시점에서 대변에 3-5개의 장 병원균이 있었습니다. 영아 설사의 주요 원인으로서 크립토스포리디움의 중요성은 8가지 낮은 중간 소득 사이트.
3. 생후 첫 해에 크립토스포리디움으로 인한 설사는 미래의 영양실조 발달과 독립적으로 연관되어 있습니다.
4. Bayley의 영아 발달 척도를 사용하여 척도로서 크립토스포리디움증 병력이 있는 영아에 대한 2세의 손상된 신경인지 발달.

현재 크립토스포리디움증에 대한 효과적인 백신은 없으며 크립토스포리디움 감염으로 인한 설사 치료에 승인된 유일한 약물은 nitazoxanide(NTZ)입니다(U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES 2003). NTZ가 유일한 치료법이지만 통제된 ​​임상 시험에서의 효능은 매우 다양했습니다. 이 약물은 일반적으로 >80%의 효능을 갖는 것으로 나타났지만, 영양 실조에 걸린 잠비아 어린이를 대상으로 한 이전 연구에서는 효능이 56%에 불과한 것으로 나타났습니다. 효과적인 치료법은 감염 부담이 높고 설사 없이도 장 병원균이 지속되어 영양 실조와 관련된 개발 도상국 어린이의 크립토스포리디움증에 호소력이 있습니다.

NTZ가 영양실조 아동에서 더 높은 실패율을 나타내는 정확한 이유는 불분명하지만 이 약물은 기생충과 혐기성 박테리아의 피루브산-페레독신 산화환원효소를 억제하는 것으로 나타났지만 크립토스포리디움증 퇴치 효과는 숙주의 면역 능력에 달려 있습니다. 장내 미세 환경은 환경 문제에 대한 숙주 반응의 핵심 구성 요소이며, 장내 미생물군은 면역 체계의 모든 측면을 촉진하고 조정하는 데 필수적인 역할을 중재하는 것으로 가정됩니다. 발효 제품(예: 요거트)은 오랫동안 건강을 증진시키는 것으로 여겨져 왔습니다. 그러나 대부분의 상업용 식품에서 유익한 미생물 또는 프로바이오틱스의 수준은 일정하지 않으며 원하는 생물학적 효과에 필요한 수준보다 낮습니다. Lactobacillus reuteri DSM 17938은 기능성 위장 장애가 있는 어린이와 성인에서 가장 광범위하게 연구된 생균제 중 하나입니다. 특히 Lactobacillus reuteri DSM 17938은 사람의 십이지장에 두 미생물이 존재하기 때문에 크립토스포리디움증에 효과적일 것입니다. icddr, b의 최근 연구에 따르면 일반적으로 사용되는 프로바이오틱이 안전하고 방글라데시 가정에서 잘 받아들여지는 것으로 나타났습니다. Lactobacillus reuteri는 임상 시험에서 테스트되었으며 어린이와 성인 모두에게 사용할 수 있는 "GRAS(일반적으로 안전한 것으로 간주됨)" 상태를 달성했으며 추가로 면역 조절 활동을 입증했습니다. 따라서 이 생균제는 크립토스포리디움 감염으로 인한 장 염증의 잠재적인 감소를 통해 크립토스포리디움증의 NTZ 치료에 유익한 보충제로 작용하는 것으로 가정됩니다. 또한 미생물군 치료가 기생충 제거를 촉진하고 부담을 줄인다면 더 빠른 질병 해결 및 더 나은 임상 결과와 관련이 있을 것입니다. Lactobacillus reuteri DSM 17938은 Th17 세포를 억제하는 RORα/y 활성을 억제하여 적절한 면역 반응을 촉진하여 약물 치료의 효능을 향상시키는 것으로 보고되었습니다. Lactobacillus reuteri DSM 17938 및 항염증 활성을 가진 다른 박테리아를 포함하는 Probiotic VSL#3은 동물 모델에서 염증성 설사의 중증도를 감소시키는 것으로 나타났으며 British Society에서 낭염 치료 옵션 중 하나로 포함되었습니다. 위장병학. 이 연구에서 연구자의 목표는 크립토스포리디움증에 대해 현재 사용되는 가장 효과적인 치료 체계를 개선하고 최적화하기 위한 반복적 접근 방식을 수행하는 것입니다.

실험 설계 및 방법론:

연구의 목적은 1) 크립토스포리디움증의 발병률 결정 2) 크립토스포리디움증에 대한 후천적 면역 반응의 평가 및 3) 크립토스포리디움증에 대한 감수성에 영향을 미치는 인간 유전자를 분석하는 것입니다. 제안된 연구는 부모 연구의 현장 설정을 활용할 것입니다. 이 제안된 파일럿 연구는 모 연구의 연구 참가자를 도울 뿐만 아니라 유사한 환경에서 크립토스포리디움증이 있는 다른 개인을 도울 크립토스포리디움증에 대한 효과적인 치료를 설명하는 데 도움이 될 것입니다. 나중에 모 연구 결과는 숙주 면역 메커니즘을 조사하는 데 도움이 되는 정보를 제공하고 프로바이오틱스 치료로 NTZ의 효능을 개선하는 적절한 면역 반응을 최적화할 수 있는 숙주 지향적 치료법을 통합하는 새로운 전략의 설계를 허용할 것입니다.

연구 제품: Nitazoxanide는 지역 상업용 Square Pharmaceuticals Ltd.에서 구입하고 프로바이오틱스는 스웨덴 건강 관리 회사인 Bio Gaia에서 구입합니다.

연구 세부 사항: 이것은 파일럿 규모로 전향적으로 수행되는 무작위 임상 시험이 될 것입니다. 이 연구는 Mirpur(방글라데시 다카) 빈민가 지역에서 실시될 것입니다. 상위 조직은 크립토스포리디움증에 대한 연구를 위한 현장 사이트를 유지합니다. 이곳은 크립토스포리디아증과 어린이 영양실조 발생률이 높은 지역입니다. 확인된 참가자는 엄격한 유지 관리 및 포함 및 제외 기준에 따라 선별됩니다. 연구 직원은 아동을 등록하기 위해 환자의 법적 보호자로부터 동의를 받을 것입니다. 조사관은 등록 전 마지막 달에 항생제 사용 이력이 없고 성별에 관계없이 12개월에서 36개월 사이의 어린이 975명을 선별할 것입니다. 해당 커뮤니티에서 제안된 연령 그룹의 크립토스포리디움 감염 유병률은 약 8%입니다. 조사관은 대변의 면역 분석을 사용하여 진단된 크립토스포리디움증 사례가 있는 78명의 참가자를 등록할 것입니다. 조사관은 증상이 있는 어린이와 무증상 어린이를 모두 등록합니다. 연구 주치의는 모든 인구통계학적, 사회경제적, 인체측정학적, 임상 및 치료 정보를 수집합니다. 난수 생성기를 사용하여 아동을 배정할 치료 그룹을 결정합니다. 4일(NTZ 치료 후), 8일(프로바이오틱스 치료 후), 90일(3개월 추적) 및 180일(추적- 최대 6개월). 4일 및 8일에 대변에서 qPCR에 의한 난포낭 부하 감소율을 시험할 것이다.

연구 일정: 연구 방문별로 나열된 전체 연구 일정 세부 사항은 아래에 설명되어 있습니다.

등록

• 정보에 입각한 동의
• 인체 측정
• 등록 설문지
• 기준선 기생충 로드에 대한 크립토스포리디움증 검출 및 정량적 PCR의 면역 분석을 위한 대변 수집

개입 시작(1일차)

• 입학자격심사
• 인체 측정
• 개입 시작

2일과 3일차 방문

• 개입 관리
• 부작용에 대한 스크리닝

4일차 방문

• 개입 관리
• 부작용에 대한 스크리닝
• q PCR을 위한 대변 수집

5, 6, 7일차 방문

• 개입 관리
• 부작용에 대한 스크리닝

8일차 방문

• 부작용에 대한 스크리닝
• q PCR을 위한 대변 수집

후속 방문 90일 및 180일

• 인체 측정
• 대변 ​​수집

개입:아동은 7일 동안 프로바이오틱스로 3일 동안 NTZ 치료를 받거나 7일 동안 위약으로 3일 동안 NTZ 치료를 받도록 무작위로 선택됩니다. NTZ의 용량은 3일 동안 하루에 두 번이고 L reuteri DSM 17938은 2×10^8 CFU로 경구 복용합니다. 치료 그룹은 연속 7일 동안 하루에 두 번 프로바이오틱스 5방울을 투여하고 위약 그룹은 프로바이오틱스 없이 3일 동안 NTZ를 투여받습니다. NTZ 용량은 음식과 함께 12시간마다 5ml입니다. NTZ 경구 현탁액은 100mg/5ml를 포함합니다.

이 약물 NTZ와 프로바이오틱스는 일반적으로 부작용이 없습니다. 이전 연구에서는 부작용이나 심각한 부작용이 없음을 시사합니다.

탈락 예상: 이전 경험에서 탈락률이 매우 낮습니다. 조사관은 각 그룹에서 10%의 탈락을 고려했습니다.

샘플 크기: 이것은 위에서 언급한 두 연구 부문에 균등하게 분포된 총 78명의 환자를 대상으로 하는 파일럿 연구입니다. N = 71명의 표본 크기(각 그룹에서 35명)는 그룹 간 차이의 양면 Z-테스트를 ​​사용하여 그룹 간 비율(최소) 24%의 임상적으로 중요한 차이를 감지하기에 충분합니다. 검정력 80%, 유의 수준 5%, 정밀도 0.10인 비율. 이 24%의 차이는 NTZ+위약 그룹의 56% 유병률과 NTZ+프로바이오틱스 그룹의 80% 사이의 차이를 나타냅니다. 10% 감소율을 고려하면 전체 표본 크기는 78명(각 그룹당 39명)입니다. 이것은 파일럿 연구이고 자금이 적기 때문에 정밀도 값은 0.10으로 간주됩니다.

데이터 분석 계획: 실험실 테스트 값을 얻은 후 데이터베이스가 생성됩니다. 데이터는 SPSS(버전 16)를 사용하여 분석됩니다. 치료 효능은 두 그룹으로 측정됩니다. 데이터 분포의 특성이 정상적으로 분포되어 있는지 여부를 확인합니다. 두 표본 평균 검정을 사용하여 그룹 간에 적용 가능한 경우 매개변수(t-검정) 또는 비모수(Mann-Whitney 검정)를 사용하여 비교합니다. 소아에서 NTZ+프로바이오틱스 치료와 비교하여 NTZ+위약 치료의 크립토스포리디움 감염 결과에 차이가 있는지 조사자가 조사한 후 데이터 분포에 따라 대응 모수 검정 또는 쌍 비모수 검정을 수행합니다. 조사관은 또한 영양 실조 아동의 치료 효과를 조사할 것입니다. 크립토스포리디움증에 대한 다양한 치료와 관련된 사회경제적 조건, 영양 및 기타 임상 조건의 영향을 조사하기 위해 다변량 로지스틱 회귀 분석을 수행합니다.