Behandlung von Kryptosporidiose

Hintergrund: Berichte aus einer längsschnittlichen Geburtskohortenstudie in Bangladesch zeigen, dass 77 % der Kinder in den ersten zwei Lebensjahren mindestens einmal an Kryptosporidiose erkranken. Kryptosporidiose wird auch mit der Entwicklung von Unterernährung in Verbindung gebracht, was zu einem geschätzten Verlust von zusätzlichen 4,2 Millionen behinderungsbereinigten Lebensjahren führt. Mehrere am icddr,b durchgeführte Studien zur Kryptosporidiose zeigten, dass Cryptosporidium sp. war einer der wichtigsten Erreger von Durchfallerkrankungen, die mit Morbidität und Mortalität einhergingen. Frühere Studien am icddr,b lieferten auch eine Reihe anderer faszinierender Erläuterungen, darunter:

1. Cryptosporidium sp. infizierten die meisten Kinder im 1. Lebensjahr in einer Kohorte in Mirpur, Dhaka. Die Forscher beobachteten, dass bis zu 64 % der Säuglinge im 1. Lebensjahr mit Kryptosporidiose diagnostiziert wurden, während 26 % dieser Fälle begleitende Co-Infektionen aufwiesen.
2. Cryptosporidium sp. wurde als einer der Top 10 Durchfallerreger etabliert, wobei Infektionen mit mehreren anderen Enteropathogenen auftreten. Die Ermittler entdeckten, dass Infektionen und Durchfälle mit mehreren Entero-Pathogenen bei Säuglingen in einer LMIC-Umgebung ausnahmslos die Norm waren. Im Durchschnitt hatte jedes Kind in Mirpur, Bangladesch, zu jedem Zeitpunkt 3-5 enterische Krankheitserreger im Stuhl. Die Bedeutung von Cryptosporidium als einer der Hauptursachen für Durchfall bei Säuglingen wurde durch die MAL-ED-Studie bestätigt, die an 8 verschiedenen Nieder- bis durchgeführt wurde Websites mit mittlerem Einkommen.
3. Durchfall durch Cryptosporidium im ersten Lebensjahr wurde unabhängig mit der zukünftigen Entwicklung von Mangelernährung in Verbindung gebracht.
4. Beeinträchtigte neurokognitive Entwicklung im Alter von zwei Jahren für Säuglinge mit Kryptosporidiose in der Vorgeschichte als Maß unter Verwendung der Bayley-Skalen der Säuglingsentwicklung.

Gegenwärtig gibt es keinen wirksamen Impfstoff gegen Kryptosporidiose, und das einzige zugelassene Medikament zur Behandlung von Durchfall, der durch eine Cryptosporidium-Infektion verursacht wird, ist Nitazoxanid (NTZ) (U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES 2003). NTZ ist die einzige Behandlung, aber ihre Wirksamkeit in kontrollierten klinischen Studien war sehr unterschiedlich. Während dieses Medikament allgemein eine Wirksamkeit von >80 % gezeigt hat, wurde in früheren Studien mit unterernährten sambischen Kindern eine Wirksamkeit von nur 56 % gezeigt. Eine wirksame Therapie wäre für Kryptosporidiose bei Kindern in Entwicklungsländern attraktiv, wo die Infektionslast hoch ist und wo die Persistenz des Enteropathogens ohne Durchfall mit Mangelernährung einhergeht.

Obwohl der genaue Grund für die höhere Ausfallrate von NTZ bei unterernährten Kindern unklar ist, wurde gezeigt, dass dieses Medikament die Pyruvat-Ferredoxin-Oxidoreduktase von Parasiten und anaeroben Bakterien hemmt, aber seine Wirksamkeit bei der Bekämpfung von Kryptosporidiose hängt von der Immunkompetenz des Wirts ab. Die Darmmikroumgebung ist eine Schlüsselkomponente der Wirtsantwort auf Umweltbelastungen, wobei postuliert wird, dass die Darmmikrobiota eine integrale Rolle bei der Förderung und Kalibrierung aller Aspekte des Immunsystems spielt. Fermentierte Produkte (wie Joghurt) gelten seit langem als gesundheitsfördernd. In den meisten kommerziellen Lebensmittelprodukten sind die Gehalte an nützlichen Mikroorganismen oder Probiotika jedoch nicht konsistent und auf niedrigeren Niveaus als für die gewünschte biologische Wirkung erforderlich. Lactobacillus reuteri DSM 17938 ist eines der am ausführlichsten untersuchten Probiotika bei Kindern und Erwachsenen mit funktionellen Magen-Darm-Erkrankungen. Insbesondere Lactobacillus reuteri DSM 17938 wäre aufgrund der Anwesenheit beider Mikroorganismen im Zwölffingerdarm des Menschen gegen Kryptosporidiose wirksam. Eine kürzlich bei icddr, b durchgeführte Studie hat gezeigt, dass dieses häufig verwendete Probiotikum von bangladeschischen Familien sicher und gut angenommen wird. Lactobacillus reuteri wurde in klinischen Studien getestet und hat den Status „GRAS (allgemein als sicher angesehen)“ für die Anwendung bei Kindern und Erwachsenen erhalten und hat zusätzlich immunmodulatorische Aktivitäten gezeigt. Es wird daher die Hypothese aufgestellt, dass dieses Probiotikum als vorteilhafte Ergänzung zur NTZ-Behandlung bei Kryptosporidiose wirkt, indem es die durch eine Cryptosporidium-Infektion verursachte Darmentzündung potenziell reduziert. Wenn die Behandlung mit Mikrobiota die Parasitenbeseitigung fördert und die Belastung verringert, wird sie außerdem mit einer schnelleren Krankheitsheilung und besseren klinischen Ergebnissen in Verbindung gebracht. Von Lactobacillus reuteri DSM 17938 wurde berichtet, dass es die RORa/y-Aktivität zur Unterdrückung von Th17-Zellen hemmt und somit eine angemessene Immunantwort zur Verbesserung der Wirksamkeit der Arzneimittelbehandlung fördert. Das Probiotikum VSL#3, das Lactobacillus reuteri DSM 17938 sowie andere Bakterien mit entzündungshemmender Wirkung enthält, reduziert in Tiermodellen nachweislich die Schwere von entzündlichem Durchfall und wurde von der British Society als eine der Behandlungsoptionen für Pouchitis aufgenommen der Gastroenterologie. Das Ziel des Forschers in dieser Studie ist es, einen iterativen Ansatz zu verfolgen, um das derzeit verwendete wirksamste Behandlungsschema gegen Kryptosporidiose zu verbessern und zu optimieren.

Experimentelles Design und Methodik:

Die Ziele der Studie sind die Untersuchung 1) der Bestimmung der Inzidenz von Kryptosporidiose, 2) der Bewertung der erworbenen Immunantwort auf Kryptosporidiose und 3) der Analyse der menschlichen Gene, die die Anfälligkeit für Kryptosporidiose beeinflussen. Die vorgeschlagene Studie wird die Feldumgebung der übergeordneten Studie nutzen. Diese vorgeschlagene Pilotstudie wird dazu beitragen, die wirksame Behandlung von Kryptosporidiose aufzuklären, die nicht nur den Studienteilnehmern der Elternstudie helfen wird, sondern auch anderen Personen mit Kryptosporidiose aus ähnlichen Umgebungen. Später werden die Ergebnisse der Elternstudie Informationen liefern, die helfen werden, den Immunmechanismus des Wirts zu untersuchen und die Entwicklung neuer Strategien zu ermöglichen, die auf den Wirt gerichtete Therapien beinhalten, die eine angemessene Immunantwort optimieren und die Wirksamkeit der NTZ mit Probiotika-Behandlung verbessern könnten.

Studienprodukte: Nitazoxanid wird von Square Pharmaceuticals Ltd. vor Ort bezogen, und Probiotika werden von Bio Gaia, einem schwedischen Gesundheitsunternehmen, bezogen.

Studiendetails: Dies wird eine randomisierte klinische Studie sein, die prospektiv im Pilotmaßstab durchgeführt werden soll. Die Studie wird in den Slumgebieten von Mirpur (Dhaka, Bangladesch) durchgeführt. Die Mutterorganisation unterhält eine Feldstelle für Studien zur Kryptosporidiose. Dies ist ein Gebiet mit einer hohen Inzidenz sowohl von Kryptosporidiose als auch von Unterernährung bei Kindern. Identifizierte Teilnehmer werden durch strenge Einhaltung und Einhaltung der Einschluss- und Ausschlusskriterien überprüft. Das Studienpersonal holt die Zustimmung des Erziehungsberechtigten des Patienten ein, um das Kind aufzunehmen. Die Ermittler werden 975 Kinder im Alter von 12 bis 36 Monaten beiderlei Geschlechts untersuchen, die im letzten Monat vor der Einschreibung keine Antibiotika in der Vorgeschichte verwendet haben. Die Prävalenz der Cryptosporidium-Infektion in der vorgeschlagenen Altersgruppe in dieser Gemeinde beträgt ungefähr 8 %. Die Ermittler werden 78 Teilnehmer mit Fällen von Kryptosporidiose einschreiben, die mit einem Immuntest aus Stuhl diagnostiziert wurde. Die Ermittler werden sowohl symptomatische als auch asymptomatische Kinder einschreiben. Der Studienarzt sammelt alle demografischen, sozioökonomischen, anthropometrischen, klinischen und Behandlungsinformationen. Über einen Zufallszahlengenerator wird bestimmt, welcher Behandlungsgruppe das Kind zugeordnet wird. Stuhl- und anthropometrische Informationen werden von allen Gruppen bei der Registrierung gesammelt, am Tag 4 (Tag nach der NTZ-Behandlung), am Tag 8 (Tag nach der Probiotika-Behandlung), am Tag 90 (Follow-up nach 3 Monaten) und am Tag 180 (Follow-up) bis 6 Monate). Die Abnahmerate der Oozystenlast durch qPCR im Stuhl an Tag 4 und Tag 8 wird getestet.

Studienplan: Die vollständigen Details des Studienplans, die nach Studienbesuch aufgelistet sind, sind unten beschrieben.

Einschreibung

• Einverständniserklärung einholen
• Anthropometrische Messung
• Anmeldefragebogen
• Stuhlentnahme für Immunassay zum Nachweis von Kryptosporidiose und quantitative PCR für die Baseline-Parasitenbelastung

Beginn der Intervention (Tag 1)

• Überprüfung der Berechtigung zur Immatrikulation
• Anthropometrische Messung
• Starten Sie den Eingriff

Besuchen Sie Tag 2 und 3

• Verwaltung der Intervention
• Screening auf unerwünschte Ereignisse

Besuchen Sie Tag 4

• Verwaltung der Intervention
• Screening auf unerwünschte Ereignisse
• Stuhlsammlung für q PCR

Besuche Tag 5, 6 und 7

• Verwaltung der Intervention
• Screening auf unerwünschte Ereignisse

Besuchen Sie Tag 8

• Screening auf unerwünschte Ereignisse
• Stuhlsammlung für q PCR

Folgebesuch Tag 90 und 180

• Anthropometrische Messung
• Stuhlsammlung

Intervention: Das Kind wird nach dem Zufallsprinzip ausgewählt, um entweder die NTZ-Behandlung für 3 Tage mit Probiotika für 7 Tage oder die NTZ-Behandlung für 3 Tage mit Placebo für 7 Tage zu erhalten. Die Dosen von NTZ werden 3 Tage lang zweimal täglich sein und L reuteri DSM 17938 wird 2 × 10 8 KBE sein und wird oral eingenommen. Die Behandlungsgruppe erhält 5 Tropfen Probiotikum zweimal täglich für aufeinanderfolgende 7 Tage und die Placebogruppe erhält NTZ für 3 Tage ohne Probiotikum. Die NTZ-Dosierung beträgt 5 ml alle 12 Stunden mit Nahrung. Die NTZ-Suspension zum Einnehmen enthält 100 mg/5 ml.

Dieses Medikament NTZ und Probiotika hat normalerweise keine Nebenwirkungen. Frühere Studien weisen auf kein unerwünschtes Ereignis oder schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis hin.

Erwarteter Studienabbruch: Die Abbruchquote ist erfahrungsgemäß sehr gering. Der Ermittler rechnete mit 10 % Drop-out in jeder Gruppe.

Stichprobengröße: Dies wird eine Pilotstudie mit insgesamt 78 Patienten sein, die gleichmäßig auf die beiden oben genannten Studienarme verteilt sind. Eine Stichprobengröße von N = 71 Personen (35 in jeder der Gruppen) reicht aus, um einen klinisch bedeutsamen Unterschied des Anteils von (mindestens) 24 % zwischen den Gruppen zu erkennen, wobei ein zweiseitiger Z-Test der Differenz zwischen verwendet wird Proportionen mit 80 % Trennschärfe und 5 % Signifikanzniveau und einer Genauigkeit von 0,10. Dieser Unterschied von 24 % entspricht der Differenz zwischen der Prävalenz von 56 % in der NTZ+Placebo-Gruppe und 80 % in der NTZ+Probiotika-Gruppe. Unter Berücksichtigung einer Fluktuationsrate von 10 % beträgt die Gesamtstichprobengröße 78 Personen (39 in jeder Gruppe). Da es sich um eine Pilotstudie handelt und aufgrund geringer Fördermittel, wird der Präzisionswert mit 0,10 betrachtet.

Datenanalyseplan: Die Datenbank wird nach Erhalt der Labortestwerte erstellt. Die Daten werden mit SPSS (Version 16) analysiert. Die Wirksamkeit der Behandlung wird in zwei Gruppen gemessen. Die Art der Datenverteilung wird überprüft, ob sie normalverteilt ist oder nicht. Unter Verwendung von Zwei-Stichproben-Durchschnittstests zwischen Gruppen wird gegebenenfalls unter Verwendung von Parametern (t-Test) oder Nicht-Parametern (Mann-Whitney-Test) verglichen. Der Prüfarzt wird untersucht, ob es einen Unterschied im Ergebnis der Kryptosporidium-Infektion der Behandlung mit NTZ + Placebo im Vergleich zur Behandlung mit NTZ + Probiotika bei Kindern gibt, und dann wird je nach Datenverteilung ein gepaarter parametrischer Test oder ein gepaarter nicht-parametrischer Test durchgeführt. Der Prüfarzt wird auch die Wirksamkeit der Behandlung bei unterernährten Kindern untersuchen. Es wird eine multivariate logistische Regression durchgeführt, um die Auswirkungen des sozioökonomischen Zustands, der Ernährung und anderer klinischer Zustände zu untersuchen, die mit einer unterschiedlichen Behandlung der Kryptosporidiose verbunden sind.