Kryptosporidioosin hoito

Taustaa: Bangladeshissa tehdyn pitkittäisen syntymäkohorttitutkimuksen raportit osoittavat, että 77 %:lla lapsista on vähintään yksi kryptosporidioositapaus kahden ensimmäisen elinvuoden aikana. Kryptosporidioosi liittyy myös aliravitsemuksen kehittymiseen, mikä johtaa arviolta 4,2 miljoonan työkyvyttömyyskorjatun elinvuoden menetykseen. Useat kryptosporidioosia koskevat tutkimukset, jotka suoritettiin icddr,b:ssä, osoittivat, että Cryptosporidium sp. oli yksi tärkeimmistä sairastuvuuteen ja kuolleisuuteen liittyvän ripulin aiheuttajista. Aiemmat icddr,b:n tutkimukset tekivät myös useita muita kiehtovia selvennyksiä, jotka sisältävät:

1. Cryptosporidium sp. tartunnan saaneet useimmat lapset ensimmäisenä elinvuotena kohortissa Mirpurissa Dhakassa. Tutkijat havaitsivat, että jopa 64 %:lla pikkulapsista diagnosoitiin kryptosporidioosi ensimmäisenä elinvuotena, kun taas 26 %:lla näistä tapauksista oli mukana muita infektioita.
2. Cryptosporidium sp. vakiintui kymmenen parhaan ripulin patogeenin joukkoon, ja infektioita esiintyi useiden muiden enteropatogeenien kanssa. Tutkijat havaitsivat, että useiden enteropatogeenien aiheuttama infektio ja ripuli pikkulapsilla LMIC-ympäristössä olivat normaalia poikkeuksetta. Keskimäärin jokaisella lapsella Mirpurissa, Bangladeshissa, oli ulosteessa 3–5 suolistossa hajoavaa taudinaiheuttajaa kerrallaan. Cryptosporidiumin merkitys vauvojen ripulin yleisenä syynä vahvistettiin MAL-ED-tutkimuksessa, joka suoritettiin kahdeksassa eri alhaisessa vaiheessa. keskituloiset sivustot.
3. Cryptosporidiumin aiheuttama ripuli ensimmäisen elinvuoden aikana liittyi itsenäisesti aliravitsemuksen tulevaan kehitykseen.
4. Neurokognitiivisen kehityksen heikkeneminen kahden vuoden iässä pikkulapsilla, joilla on ollut kryptosporidioosi, mitattuna Bayleyn vauvan kehitysasteikolla.

Tällä hetkellä ei ole olemassa tehokasta rokotetta kryptosporidioosiin, ja ainoa hyväksytty lääke Cryptosporidium-infektion aiheuttaman ripulin hoitoon on nitatsoksanidi (NTZ) (Yhdysvaltain TERVEYS- JA HUMANPALVELUT 2003). NTZ on ainoa hoitomuoto, mutta sen tehokkuus kontrolloiduissa kliinisissä tutkimuksissa on vaihdellut suuresti. Vaikka tämän lääkkeen tehon on yleensä osoitettu olevan yli 80 %, aiemmissa tutkimuksissa, joissa oli mukana aliravittuja sambialaisia ​​lapsia, sen on osoitettu olevan vain 56 %. Tehokas hoito olisi houkutteleva kryptosporidioosiin lapsilla kehitysmaissa, joissa infektiotaakka on korkea ja missä enteropatogeenin pysyvyys ripulin puuttuessa liittyy aliravitsemukseen.

Vaikka tarkka syy NTZ:n korkeampaan epäonnistumisprosenttiin aliravituilla lapsilla on epäselvä, tämän lääkkeen on osoitettu estävän loisten ja anaerobisten bakteerien pyruvaatti-ferredoksiinioksidoreduktaasia, mutta sen tehokkuus kryptosporidioosia vastaan ​​on riippuvainen isännän immuunikyvystä. Suoliston mikroympäristö on keskeinen osa isännän vastetta ympäristöhaasteisiin, ja suoliston mikrobiston oletetaan välittävän olennaisia ​​rooleja immuunijärjestelmän kaikkien näkökohtien edistämisessä ja kalibroinnissa. Fermentoitujen tuotteiden (kuten jogurtin) on pitkään ajateltu edistävän terveyttä. Useimmissa kaupallisissa elintarviketuotteissa hyödyllisten mikro-organismien tai probioottien tasot eivät kuitenkaan ole yhdenmukaisia ​​ja alhaisemmilla tasoilla kuin vaaditaan halutun biologisen vaikutuksen saavuttamiseksi. Lactobacillus reuteri DSM 17938 on ollut yksi laajimmin tutkituista probiooteista lapsilla ja aikuisilla, joilla on toiminnallisia maha-suolikanavan häiriöitä. Erityisesti Lactobacillus reuteri DSM 17938 olisi tehokas kryptosporidioosia vastaan, koska molemmat mikro-organismit ovat läsnä ihmisen pohjukaissuolessa. Äskettäinen tutkimus icddr, b:ssä on osoittanut, että tämä yleisesti käytetty probiootti vaikutti turvalliselta ja bangladeshilaisten perheiden hyväksymältä. Lactobacillus reuteri on testattu kliinisissä tutkimuksissa, ja se on saavuttanut "GRAS (yleisesti katsottu turvalliseksi)" -statuksen käytettäväksi sekä lapsille että aikuisille, ja se on lisäksi osoittanut immunomodulatorisia vaikutuksia. Tämän probiootin oletetaan siten toimivan hyödyllisenä lisänä NTZ-hoidolle kryptosporidioosissa vähentämällä mahdollista Cryptosporidium-infektiosta johtuvaa suolistotulehdusta. Lisäksi, jos mikrobiotahoito edistää loisten puhdistumista ja vähentää taakkaa, se liittyy taudin nopeampaan paranemiseen ja parempiin kliinisiin tuloksiin. Lactobacillus reuteri DSM 17938:n on raportoitu inhiboivan RORa/y-aktiivisuutta Th17-solujen suppressoimiseksi, mikä edistää asianmukaista immuunivastetta lääkehoidon tehokkuuden parantamisessa. Probiootin VSL#3, joka sisältää Lactobacillus reuteri DSM 17938:aa sekä muita anti-inflammatorisia bakteereja, on osoitettu vähentävän tulehduksellisen ripulin vakavuutta eläinmalleissa, ja British Society on sisällyttänyt sen yhdeksi pussitulehduksen hoitovaihtoehdoista. gastroenterologiasta. Tutkijan tavoitteena tässä tutkimuksessa on toteuttaa iteratiivinen lähestymistapa parantaakseen ja optimoidakseen tällä hetkellä käytössä olevaa tehokkainta hoitojärjestelmää kryptosporidioosille.

Kokeellinen suunnittelu ja menetelmät:

Tutkimuksen tavoitteena on selvittää 1) Kryptosporidioosin ilmaantuvuus 2) Kryptosporidioosille hankitun immuunivasteen arviointi ja 3) Kryptosporidioosi-alttiuteen vaikuttavien ihmisen geenien analysointi. Ehdotetussa tutkimuksessa hyödynnetään emotutkimuksen kenttäasetusta. Tämä ehdotettu pilottitutkimus auttaa selvittämään kryptosporidioosin tehokkaan hoidon, joka ei auta vain emotutkimuksen osallistujia, vaan myös muita henkilöitä, joilla on kryptosporidioosi samanlaisissa olosuhteissa. Myöhemmin emotutkimuksen tulokset tarjoavat tietoa, joka auttaa tutkimaan isännän immuunimekanismia ja mahdollistamaan uusien strategioiden suunnittelun, jotka sisältävät isäntäohjattuja hoitoja, jotka voivat optimoida asianmukaisen immuunivasteen parantaen NTZ:n tehokkuutta probioottihoidolla.

Tutkimustuotteet: Nitatsoksanidia ostetaan paikalliselta kaupalliselta Square Pharmaceutical Ltd.:ltä ja probiootit ostetaan ruotsalaiselta terveydenhuoltoyhtiöltä Bio Gaialta.

Tutkimuksen yksityiskohdat: Tämä on satunnaistettu kliininen tutkimus, joka suoritetaan prospektiivisesti pilottimittakaavassa. Tutkimus tehdään Mirpurin (Dhaka, Bangladesh) slummialueilla. Emoorganisaatio ylläpitää kenttäsivustoa kryptosporidioositutkimuksille. Tämä on alue, jolla on korkea sekä kryptosporidioosi että lasten aliravitsemus. Tunnistetut osallistujat seulotaan noudattamalla tiukasti osallistumis- ja poissulkemiskriteerejä. Tutkimushenkilöstö ottaa potilaan laillisen huoltajan suostumuksen lapsen rekisteröintiin. Tutkijat seulovat 975 lasta, joiden ikä on 12–36 kuukautta, kumpaakaan sukupuolta ja jotka eivät ole käyttäneet antibiootteja viimeisen kuukauden aikana ennen ilmoittautumista. Cryptosporidium-infektion esiintyvyys ehdotetussa ikäryhmässä kyseisessä yhteisössä on noin 8 %. Tutkijat rekisteröivät 78 osallistujaa, joilla on kryptosporidioositapauksia, jotka diagnosoidaan käyttämällä ulosteesta tehtyä eläinperäistä määritystä. Tutkijat ottavat mukaan sekä oireettomia että oireettomia lapsia. Tutkimuslääkäri kerää kaikki demografiset, sosioekonomiset, antropometriset, kliiniset ja hoitotiedot. Satunnaislukugeneraattoria käytetään määrittämään, mihin hoitoryhmään lapsi määrätään. Uloste- ja antropometriset tiedot kerätään kaikista ryhmistä ilmoittautumisen yhteydessä, päivänä 4 (päivä NTZ-hoidon jälkeen), päivänä 8 (päivä probioottihoidon jälkeen), päivänä 90 (seuranta 3 kuukauden kuluttua) ja päivänä 180 (seuranta) yli 6 kuukautta). Ookystakuorman vähenemisnopeus ulosteessa qPCR:llä päivinä 4 ja 8 testataan.

Opinto-aikataulu: Opintovierailuittain luetellut täydelliset opiskeluaikataulut on kuvattu alla.

Ilmoittautuminen

• Tietoisen suostumuksen ottaminen
• Antropometrinen mittaus
• Ilmoittautumislomake
• Ulostekeräys immuunimääritystä varten kryptosporidioosin havaitsemiseksi ja kvantitatiivinen PCR loisten perustason määrittämiseksi

Intervention alku (päivä 1)

• Ilmoittautumiskelpoisuuden tarkistus
• Antropometrinen mittaus
• Aloita interventio

Vieraile päivät 2 ja 3

• Intervention hallinto
• Haitallisten tapahtumien seulonta

Vierailu päivä 4

• Intervention hallinto
• Haitallisten tapahtumien seulonta
• Ulosteiden keräys q PCR:ää varten

Vieraile päivät 5, 6 ja 7

• Intervention hallinto
• Haitallisten tapahtumien seulonta

Vierailu päivä 8

• Haitallisten tapahtumien seulonta
• Ulosteiden keräys q PCR:ää varten

Seurantakäynti päivät 90 ja 180

• Antropometrinen mittaus
• Jakkarakokoelma

Interventio: Lapsi valitaan satunnaisesti saamaan joko NTZ-hoitoa 3 päivän ajan probiooteilla 7 päivän ajan tai NTZ-hoitoa 3 päivää lumelääkettä 7 päivän ajan. NTZ:n annokset ovat kahdesti päivässä 3 päivän ajan ja L reuteri DSM 17938:aa 2 × 10^8 CFU otetaan suun kautta. Hoitoryhmä saa 5 tippaa probioottia kahdesti päivässä 7 peräkkäisenä päivänä ja lumeryhmä saa NTZ:tä 3 päivän ajan ilman probioottia. NTZ-annos on 5 ml 12 tunnin välein ruoan kanssa. NTZ-oraalisuspensio sisältää 100 mg/5 ml.

Tällä lääkkeellä NTZ ja probiootit eivät yleensä ole sivuvaikutuksia. Aikaisempi tutkimus viittaa siihen, ettei haittatapahtumaa tai vakavaa haittatapahtumaa ole.

Odotettu keskeyttäminen: Aiemman kokemuksen perusteella keskeyttämisprosentti on erittäin alhainen. Tutkija arvioi 10 %:n putoavan kussakin ryhmässä.

Otoskoko: Tämä on pilottitutkimus, jossa yhteensä 78 potilasta jakautuu tasaisesti kahteen edellä mainittuun tutkimusryhmään. Otoskoko N = 71 yksilöä (35 kussakin ryhmässä) riittää havaitsemaan kliinisesti tärkeän eron osuuden (vähintään) 24 % välillä ryhmien välillä käyttämällä kaksipuolista Z-testiä. mittasuhteet 80 % teholla ja 5 %:n merkitystasolla ja tarkkuudella 0,10. Tämä 24 %:n ero edustaa eroa NTZ+plasebo-ryhmän 56 %:n ja NTZ+probioottien ryhmän 80 %:n esiintyvyyden välillä. Ottaen huomioon 10 %:n poistumisaste, kokonaisotoskoko on 78 yksilöä (39 kussakin ryhmässä). Koska kyseessä on pilottitutkimus ja pienestä rahoituksesta johtuen, tarkkuusarvoksi otettiin 0,10.

Tietojen analysointisuunnitelma: Tietokanta luodaan laboratoriotestiarvojen saamisen jälkeen. Tiedot analysoidaan SPSS:n (versio 16) avulla. Hoidon tehokkuutta mitataan kahdessa ryhmässä. Tietojen jakelun luonne tarkistetaan, onko se normaalijakaumaa vai ei. Käyttäen kahta otosta keskiarvotestiä ryhmiä verrataan käyttäen parametrista (t-testi) tai ei-parametrista (Mann-Whitney-testi) soveltuvin osin. Tutkijalle tutkitaan, onko NTZ+plasebohoidon cryptosporidium-infektion tuloksissa eroja verrattuna lasten NTZ+probioottihoitoon ja sitten tehdään pariparametrinen testi tai parillinen ei-parametrinen testi tietojen jakautumisesta riippuen. Tutkija tutkii myös hoidon tehokkuutta aliravituilla lapsilla. Monimuuttujalogistisella regressiolla tutkitaan sosioekonomisen tilan, ravinnon ja muiden eri hoitoon liittyvien kliinisten tilojen vaikutusta kryptosporidioosiin.