자궁에서 항레트로바이러스 요법(ART)에 노출된 어린이의 심혈관 대사 건강 (ARTMOMSBABES)

I. 샘플 크기 계산 통계적 유의성을 보여주기 위해 필요한 참가자 수는 HIV 환자에서 혈관 기능을 평가한 이전에 발표된 연구를 기반으로 합니다(Agu et al., 2019). 오차 확률(α) 0.05, 검정력(1-β) 0.80, 평균 효과 크기(d) 0.5를 사용하여 표본 크기(n=64명)를 계산했습니다. 탈락률이 25%라고 가정하면 N = (64 + (64*25)/100) = 80 어머니/그룹을 사용하여 통계적 유의성을 표시하기에 충분한 샘플 크기/그룹을 확보할 것입니다. 따라서 참여하는 어머니의 총 수는 160명(케이스 80개, 대조군 80개)이며 자손은 160명입니다.

II. 윤리적 승인 연구 프로젝트를 수행하기 위한 윤리적 동의 및 허가는 Walter Sisulu University(WSU)의 보건 과학 연구 및 윤리 위원회(HRSEC) 학부에서 얻습니다. 이 연구의 목적은 Umtata General과 Nelson Mandela Academic Hospitals, Mthatha, Eastern Cape Province의 산전 클리닉에 다니는 여성들에게 설명될 것입니다. 기꺼이 참여하고자 하는 임산부는 연구에 참여하고 자녀가 태어날 때부터 연구에 참여할 수 있도록 정보에 입각한 동의서에 서명해야 합니다.

III. 연구 설계 전향적 사례 통제 연구 설계가 이 연구에서 사용될 것입니다.

IV. 선택 기준 합병증이 없는 11-14주 된 임신을 가진 사하라 사막 이남 여성은 사례군에 대해 HIV 양성이고 대조군에 대해 HIV 음성입니다. 제2형 당뇨병, 임신성 당뇨병, 신장 및 심혈관 질환 또는 기타 중대한 건강 상태가 있는 임산부는 연구에서 제외됩니다.

V. 실험 계획

작업 패키지 1(임산부):

이 연구를 위해 3번의 산전 방문이 기록될 것입니다 - 이러한 방문은 임신 1, 2, 3분기 동안 이루어집니다.

각 산전 방문 동안 다음 정보 및 매개 변수가 평가됩니다.

1. 기본 정보: 설문지를 사용한 첫 번째 방문 동안 심혈관 질환의 산모의 인구 통계, 산과 및 가족력 - 연구 시작 시 한 번 꺼짐.
2. 인체 측정: 키와 몸무게는 NHANES, 2009 권장 사항에 따라 결정됩니다. BMI는 체중/(신장(m) x 신장(m)) 공식을 사용하여 계산됩니다.
3. 혈압 측정: 사무실 혈압은 Muntner et al., (2019)에 설명된 대로 앉은 자세에서 10분간 휴식을 취한 후 3분 간격으로 3회 측정됩니다. 이것은 주간/야간 혈압 및 디핑 표현형의 결정을 위한 24시간 외래 혈압 측정이 뒤따를 것입니다.
4. 태반 형태 측정, 구조 및 혈관 형성: 자궁 동맥, 제대 동맥 및 중대뇌 동맥 및 자궁 동맥 평균 맥동 지수는 초음파에 의해 결정됩니다. 가능한 경우 태아 뇌태반 비율을 계산합니다.
5. 내피 기능 검사: 초음파 검사 및 Vicorder를 사용하여 경동맥 내막 중막 두께, 맥파 속도 및 혈류 매개 둔화 및 망막 동맥 평가를 측정합니다(Ellins, 2017). 내피 기능을 결정하기 위해 망막 미세혈관계를 연구할 것이다.
6. 내피 기능 마커: 엔도칸, 비대칭 디메틸 아르기닌(ADMA) 및 산화질소(NO)는 제조업체의 지침에 따라 ELISA 키트를 사용하여 분석됩니다.
7. 산화 스트레스의 마커: 지질 과산화, 총 항산화 능력 및 8-하이드독실-2-데옥시구아닌(8-OHdG)은 제조업체의 프로토콜에 따라 ELISA 키트를 사용하여 결정됩니다.
8. 지질 프로파일 지수: 총 콜레스테롤, 트리글리세리드, LDL 콜레스테롤 및 HDL 콜레스테롤, 산화된 LDL-콜레스테롤은 제조업체의 프로토콜에 따라 측정됩니다.
9. 인슐린 저항성: 공복 혈당, 당화혈색소 및 인슐린 농도는 제조업체의 방법에 따라 키트를 사용하여 결정됩니다. HOMA-IR 공식은 빠른 포도당과 인슐린으로부터 인슐린 저항성을 계산하는 데 사용됩니다.
10. 신장 기능 지수: 사구체 여과율(GFR), 크레아티닌 및 알부민이 결정되고 알부민 대 크레아티닌 비율이 계산됩니다.

작업 패키지 2(신생아):

분만 중 산화 스트레스 및 내피 기능의 마커와 태아의 후생유전학적 마커를 평가하기 위해 제대혈을 수집합니다. 다음 데이터가 수집됩니다.

1. 인체 측정: 아동의 체중, 길이, 두개골 둘레를 측정합니다.
2. 혈압 측정: 일회용 팔 크기의 적절한 커프를 사용하여 오실로메트리로 캐주얼 혈압을 측정합니다. 혈압은 적어도 아기의 식사 후 1시간과 아기가 자고 있을 때 5분 간격으로 3회 측정됩니다(Samantha et al, 2015).
3. 내피 기능 마커: 엔도칸, 비대칭 디메틸 아르기닌(ADMA) 및 산화질소(NO)는 제조업체의 지침에 따라 ELISA 키트를 사용하여 분석됩니다.
4. 산화 스트레스의 마커: 지질 과산화, 총 항산화 능력 및 8-하이드독실-2-데옥시구아닌(8-OHdG)은 제조업체의 프로토콜에 따라 ELISA 키트를 사용하여 결정됩니다.
5. 지질 프로파일 지수: 총 콜레스테롤, 트리글리세리드, LDL 콜레스테롤 및 HDL 콜레스테롤, 산화된 LDL-콜레스테롤은 제조업체 프로토콜에 따라 측정됩니다.
6. 인슐린 저항성: 제대혈 포도당 및 인슐린 농도는 제조업체의 방법에 따라 결정됩니다. HOMA-IR 공식은 인슐린 저항성을 계산하는 데 사용됩니다.
7. 신장 기능 지수: 사구체 여과율(GFR), 크레아티닌 및 알부민이 결정됩니다. 알부민 대 크레아티닌 비율도 결정됩니다.
8. 후생유전학적 마커: 제조업체의 방법에 따라 Elisa 키트를 사용한 5-메틸-2-데옥시시티딘 및 트리메틸 히스톤 H3K9의 소변 농도.

작업 패키지 3(산후 3개월 산모 추적 관찰)

산모는 분만 후 3개월 후에 후속 조치를 취하게 됩니다. 이 방문 동안 산모로부터 혈액이나 소변 샘플을 채취하지 않습니다. CVD 위험 요인을 측정하기 위해 아기에게서 소변 샘플을 채취합니다. 다음 데이터가 수집됩니다.

1. 인체 측정: 키와 몸무게는 NHANES, 2009 권장 사항에 따라 결정됩니다. BMI는 엄마와 아기의 체중/(키(m) x 키(m)) 공식을 사용하여 계산됩니다.
2. 혈압 측정: 사무실 혈압은 Puntner et al., (2019)에 설명된 대로 앉은 자세에서 10분간 휴식을 취한 후 3분 간격으로 3회 측정됩니다. 이것은 주간/야간 혈압 및 담그는 표현형 - 어머니의 결정을 위한 24시간 외래 혈압 측정이 뒤따를 것입니다.
3. 혈압은 앙와위 자세에서 아기에게 측정됩니다.
4. 내피 기능 검사: 초음파 검사 및 Vicorder를 사용하여 경동맥 내막 중막 두께, 맥파 속도 및 혈류 매개 둔화 및 망막 동맥 평가를 측정합니다(Ellins, 2017). 어머니의 내피 기능을 결정하기 위해 망막 미세혈관계를 연구할 것입니다.
5. 내피 기능 테스트: 아기의 Vicorder를 사용하여 맥파 속도 및 흐름 매개 감속(Ng et al, 2018).

작업 패키지 4(아동):

데이터는 출생 후 3개월, 12개월 및 24개월의 어린이로부터 다음과 같이 수집됩니다.

1. 인체 측정: 아동의 체중, 길이, 두개골 둘레를 측정합니다.
2. 혈압 측정: 일회용 팔 크기의 적절한 커프를 사용하여 오실로메트리로 캐주얼 혈압을 측정합니다. 혈압은 적어도 아기의 식사 후 1시간과 아기가 자고 있을 때 5분 간격으로 3회 측정됩니다(Samantha et al, 2015).
3. 내피 기능 테스트: Vicorder를 사용하여 맥파 속도 및 흐름 매개 감속(Ng et al, 2018).
4. 내피 기능 마커: 제조업체의 지침에 따라 ELISA 키트를 사용하여 Endocan, 비대칭 디메틸 아르기닌(ADMA) 및 산화질소(NO) 분석을 위해 소변 샘플을 수집합니다.
5. 산화 스트레스의 마커: 지질 과산화, 총 항산화 능력 및 8-하이드옥실-2-데옥시구아닌(8-OHdG)은 제조업체의 프로토콜에 따라 ELISA 키트를 사용하여 소변 샘플에서 결정됩니다.
6. 신장 기능 지수: 소변 크레아티닌 및 알부민이 결정됩니다. 알부민 대 크레아티닌 비율도 결정됩니다.
7. 후생유전학적 마커: 제조업체의 방법에 따라 elisa 키트를 사용한 5-메틸-2-데옥시시티딘 및 트리메틸 히스톤 H3K9의 소변 농도.
8. 내피 기능 테스트: Vicorder를 사용하여 맥파 속도 및 흐름 매개 감속(Ng et al, 2018).