Cardiometabolische gezondheid van kinderen die in de baarmoeder zijn blootgesteld aan antiretrovirale therapie (ART). (ARTMOMSBABES)

I. Berekening van de steekproefomvang Het aantal deelnemers dat nodig is om statistische significantie aan te tonen, is gebaseerd op eerder gepubliceerde onderzoeken waarin de vasculaire functie werd beoordeeld bij hiv-patiënten (Agu et al., 2019). Een foutkans (α) van 0,05, een power (1-β) van 0,80 en een gemiddelde effectgrootte (d) van 0,5 werden gebruikt om de steekproefomvang te berekenen (n=64 personen). Uitgaande van een uitvalpercentage van 25%, gebruiken we N = (64 + (64*25)/100) = 80 moeders/groep om ervoor te zorgen dat we voldoende steekproefomvang/groep hebben om statistische significantie aan te tonen. Het totale aantal deelnemende moeders zal dus 160 zijn (80 gevallen en 80 controles) en hun nakomelingen - 160.

II. Ethische goedkeuring Ethische toestemming en toestemming om het onderzoeksproject uit te voeren zal worden verkregen van de Onderzoeks- en Ethische Commissie (HRSEC) van de Faculteit der Gezondheidswetenschappen van de Walter Sisulu University (WSU). Het doel van de studie zal worden uitgelegd aan vrouwen die de prenatale kliniek bezoeken in de Umtata General en Nelson Mandela Academic Hospitals, Mthatha, provincie Oost-Kaap. Zwangere vrouwen die bereid zijn om deel te nemen, zullen geïnformeerde toestemmingsformulieren moeten ondertekenen om aan het onderzoek deel te nemen en om hun kinderen vanaf de geboorte aan het onderzoek te laten deelnemen.

III. Studieopzet In deze studie zal een prospectieve case-control studieopzet gebruikt worden.

IV. Selectiecriteria Sub-Sahara vrouwen met ongecompliceerde eenlingzwangerschappen van 11-14 weken oud, hiv-positief voor de casusgroep en hiv-negatief voor de controlegroep. Zwangere vrouwen met diabetes type 2, zwangerschapsdiabetes, nier- en hart- en vaatziekten of een kritieke gezondheidstoestand worden uitgesloten van het onderzoek

V. Experimenteel plan

Werkpakket 1 (Zwangere vrouwen):

Er zullen drie prenatale bezoeken worden geregistreerd voor deze studie - Deze bezoeken zullen worden afgelegd tijdens het eerste, tweede en derde trimester van de zwangerschap.

De volgende informatie en parameters zullen tijdens elk prenataal bezoek worden beoordeeld:

1. Baseline-informatie: demografische, verloskundige en familiegeschiedenis van cardiovasculaire aandoeningen bij de moeder tijdens het eerste bezoek met behulp van een vragenlijst - eenmalig aan het begin van het onderzoek.
2. Antropometrische metingen: lengte en gewicht worden bepaald volgens de aanbevelingen van de NHANES, aanbevelingen uit 2009. BMI wordt berekend met behulp van de formule gewicht/(lengte (m) x lengte (m)).
3. Bloeddrukmetingen: De bloeddruk op kantoor wordt gemeten zoals beschreven door Muntner et al., (2019) in drievoud met tussenpozen van drie minuten na 10 minuten rust in zittende positie. Dit wordt gevolgd door 24-uurs ambulante bloeddrukmeting voor het bepalen van de bloeddruk overdag/nacht en het dalende fenotype.
4. Placentale morfometrie, architectuur en vascularisatie: Baarmoederslagaders, navelstrengslagader en middelste hersenslagader en baarmoederslagader gemiddelde pulsatie-index zal worden bepaald door middel van echografie. Indien mogelijk wordt de foetale cerebroplacentale ratio berekend.
5. Endotheliale functietesten: de dikte van de intima-media van de halsslagader, de snelheid van de pulsgolf en de stromingsgemedieerde vertraging en beoordeling van de retinale slagader zullen worden gemeten met behulp van echografie en Vicorder (Ellins, 2017). Retinale microvasculatuur zal bestudeerd worden om de endotheliale functie te bepalen.
6. Markers van de endotheliale functie: Endocan, asymmetrisch dimethylarginine (ADMA) en stikstofmonoxide (NO) zullen worden getest met behulp van ELISA-kits volgens de instructies van de fabrikant.
7. Markers van oxidatieve stress: peroxidatie van lipiden, totale antioxidantcapaciteit en 8-hydoxyl-2-deoxyguanine (8-OHdG) zullen worden bepaald met behulp van ELISA-kits volgens de protocollen van de fabrikant.
8. Lipidenprofielindices: totaal cholesterol, triglyceride, LDL-cholesterol en HDL-cholesterol en geoxideerd LDL-cholesterol worden gemeten volgens het protocol van de fabrikant.
9. Insulineresistentie: nuchtere glucose-, geglyceerde hemoglobine- en insulineconcentraties worden bepaald met behulp van kits volgens de methoden van de fabrikant. De HOMA-IR-formule wordt gebruikt om de insulineresistentie te berekenen uit snelle glucose en insuline.
10. Nierfunctie-indices: glomerulaire filtratiesnelheid (GFR), creatinine en albumine zullen worden bepaald en albumine tot creatinine ratio berekend.

Werkpakket 2 (Pasgeborenen):

Tijdens de bevalling wordt navelstrengbloed afgenomen voor de beoordeling van markers van oxidatieve stress en endotheliale functie en epigenetische markers bij de foetus. De volgende gegevens worden verzameld:

1. Antropometrische metingen: het gewicht, de lengte en de schedelomtrek van het kind worden gemeten.
2. Bloeddrukmetingen: Casual bloeddruk zal worden gemeten door middel van oscillometrie met behulp van wegwerpmanchetten die geschikt zijn voor de arm. De bloeddruk wordt in drievoud gemeten met intervallen van vijf minuten, ten minste een uur na de maaltijd van de baby en wanneer de baby slaapt (Samantha et al, 2015).
3. Markers van de endotheliale functie: Endocan, asymmetrisch dimethylarginine (ADMA) en stikstofmonoxide (NO) zullen worden getest met behulp van ELISA-kits volgens de instructies van de fabrikant.
4. Markers van oxidatieve stress: peroxidatie van lipiden, totale antioxidantcapaciteit en 8-hydoxyl-2-deoxyguanine (8-OHdG) zullen worden bepaald met behulp van ELISA-kits volgens de protocollen van de fabrikant.
5. Lipidenprofielindices: totaal cholesterol, triglyceride, LDL-cholesterol en HDL-cholesterol en geoxideerd LDL-cholesterol worden gemeten volgens het protocol van de fabrikant.
6. Insulineresistentie: Navelstrengbloedglucose en insulineconcentraties worden bepaald volgens de methoden van de fabrikant. De HOMA-IR-formule wordt gebruikt om de insulineresistentie te berekenen.
7. Nierfunctie-indices: glomerulaire filtratiesnelheid (GFR), creatinine en albumine worden bepaald. De verhouding albumine tot creatinine zal ook worden bepaald.
8. Epigenetische markers: Urineconcentraties van 5-methyl-2-deoxycytidine en trimethylhiston H3K9 met behulp van Elisa-kit volgens de methoden van de fabrikant.

Werkpakket 3 (Moeders na 3 maanden postnatale follow-up)

Moeders worden drie maanden na de bevalling opgevolgd. Tijdens dit bezoek wordt er geen bloed of urine afgenomen bij de moeders. Urinemonsters zullen worden verzameld van baby's voor het meten van CVD-risicomakers. De volgende gegevens worden verzameld:

1. Antropometrische metingen: lengte en gewicht worden bepaald volgens de aanbevelingen van de NHANES, aanbevelingen uit 2009. De BMI wordt berekend aan de hand van de formule gewicht/(lengte (m) x lengte (m)) voor zowel moeder als baby.
2. Bloeddrukmetingen: De bloeddruk op kantoor wordt gemeten zoals beschreven door Puntner et al., (2019) in drievoud met tussenpozen van drie minuten na 10 minuten rust in zittende positie. Dit wordt gevolgd door 24-uurs ambulante bloeddrukmeting voor bepaling van de bloeddruk overdag/nacht en het dalende fenotype - moeder
3. De bloeddruk wordt gemeten bij de baby in rugligging.
4. Endotheliale functietesten: de dikte van de intima-media van de halsslagader, de snelheid van de pulsgolf en de stromingsgemedieerde vertraging en beoordeling van de retinale slagader zullen worden gemeten met behulp van echografie en Vicorder (Ellins, 2017). Retinale microvasculatuur zal worden bestudeerd om de endotheliale functie bij de moeder te bepalen.
5. Endotheliale functietesten: pulsgolfsnelheid en stroomgemedieerde vertraging met behulp van de Vicorder bij de baby (Ng et al, 2018).

Werkpakket 4 (Kind):

Gegevens van kinderen op drie, twaalf en vierentwintig maanden na de geboorte worden als volgt verzameld:

1. Antropometrische metingen: het gewicht, de lengte en de schedelomtrek van het kind worden gemeten.
2. Bloeddrukmetingen: Casual bloeddruk zal worden gemeten door middel van oscillometrie met behulp van wegwerpmanchetten die geschikt zijn voor de arm. De bloeddruk wordt in drievoud gemeten met intervallen van vijf minuten, ten minste een uur na de maaltijd van de baby en wanneer de baby slaapt (Samantha et al, 2015).
3. Endotheliale functietesten: pulsgolfsnelheid en stroomgemedieerde vertraging met behulp van de Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Markers van endotheliale functie: Urinemonsters worden verzameld voor Endocan-, asymmetrische dimethylarginine (ADMA) en stikstofmonoxide (NO)-assays met behulp van ELISA-kits volgens de instructies van de fabrikant.
5. Markers van oxidatieve stress: lipideperoxidatie, totale antioxidantcapaciteit en 8-hydoxyl-2-deoxyguanine (8-OHdG) zullen worden bepaald in urinemonsters met behulp van ELISA-kits volgens de protocollen van de fabrikant.
6. Nierfunctie-indices: Urinecreatinine en albumine worden bepaald. De verhouding albumine tot creatinine zal ook worden bepaald.
7. Epigenetische markers: Urineconcentraties van 5-methyl-2-deoxycytidine en trimethyl Histone H3K9 met behulp van elisa-kit volgens de methoden van de fabrikant.
8. Endotheliale functietesten: pulsgolfsnelheid en stroomgemedieerde vertraging met behulp van de Vicorder (Ng et al, 2018).