Santé cardiométabolique des enfants exposés à la thérapie antirétrovirale (TAR) in utero (ARTMOMSBABES)

I. Calcul de la taille de l'échantillon Le nombre de participants requis pour montrer la signification statistique est basé sur des études publiées précédemment dans lesquelles la fonction vasculaire a été évaluée chez des patients atteints du VIH (Agu et al., 2019). Une probabilité d'erreur (α) de 0,05, une puissance (1-β) de 0,80 et une taille d'effet moyenne (d) de 0,5 ont été utilisées pour calculer la taille de l'échantillon (n = 64 personnes). En supposant un taux d'abandon de 25 %, nous utiliserons N = (64 + (64*25)/100) = 80 mères/groupe pour nous assurer que nous aurons suffisamment de taille d'échantillon/groupe pour montrer une signification statistique. Le nombre total de mères participantes sera donc de 160 (80 cas et 80 témoins) et leur progéniture de 160.

II. Approbation éthique Le consentement éthique et la permission de mener à bien le projet de recherche seront obtenus auprès du Comité de recherche et d'éthique de la Faculté des sciences de la santé (HRSEC) de l'Université Walter Sisulu (WSU). Le but de l'étude sera expliqué aux femmes qui fréquentent la clinique prénatale des hôpitaux universitaires Umtata General et Nelson Mandela, à Mthatha, dans la province du Cap oriental. Les femmes enceintes qui accepteront de participer devront signer des formulaires de consentement éclairé pour participer à l'étude et permettre à leurs enfants de participer à l'étude dès la naissance.

III. Conception de l'étude Une étude prospective cas-témoins sera utilisée dans cette étude.

IV. Critères de sélection Femmes subsahariennes avec des grossesses simples non compliquées de 11 à 14 semaines, être séropositives pour le groupe cas et séronégatives pour le groupe témoin. Les femmes enceintes atteintes de diabète de type 2, de diabète gestationnel, de maladies rénales et cardiovasculaires ou de tout état de santé critique seront exclues de l'étude

V. Plan expérimental

Work Package 1 (femmes enceintes):

Trois visites prénatales seront enregistrées pour cette étude - Ces visites seront effectuées au cours des premier, deuxième et troisième trimestres de gestation.

Les informations et paramètres suivants seront évalués lors de chaque visite prénatale :

1. Informations de base : Antécédents démographiques maternels, obstétricaux et familiaux de maladies cardiovasculaires lors de la première visite à l'aide d'un questionnaire - une fois au début de l'étude.
2. Mesures anthropométriques : la taille et le poids seront déterminés conformément aux recommandations de la NHANES, recommandations de 2009. L'IMC sera calculé à l'aide de la formule poids/(taille (m) x taille (m)).
3. Mesures de la pression artérielle : la pression artérielle au bureau sera mesurée comme décrit par Muntner et al., (2019) en trois exemplaires à trois minutes d'intervalle après 10 minutes de repos en position assise. Cela sera suivi d'une mesure ambulatoire de la pression artérielle sur 24 h pour déterminer la pression artérielle diurne/nocturne et le phénotype de trempage.
4. Morphométrie placentaire, architecture et vascularisation : les artères utérines, l'artère ombilicale et l'artère cérébrale moyenne et l'indice de pulsation moyen de l'artère utérine seront déterminés par échographie. Le rapport cérébroplacentaire fœtal sera calculé dans la mesure du possible.
5. Tests de la fonction endothéliale : l'épaisseur de l'intima média carotidienne, la vitesse de l'onde de pouls et le ralentissement médié par le débit et l'évaluation de l'artère rétinienne seront mesurés à l'aide de l'échographie et du Vicorder (Ellins, 2017). La microvasculature rétinienne sera étudiée pour déterminer la fonction endothéliale.
6. Marqueurs de la fonction endothéliale : Endocan, la diméthyl arginine asymétrique (ADMA) et l'oxyde nitrique (NO) seront dosés à l'aide de kits ELISA conformément aux instructions des fabricants.
7. Marqueurs de stress oxydatif : la peroxydation lipidique, la capacité antioxydante totale et la 8-hydroxyl-2-désoxyguanine (8-OHdG) seront déterminées à l'aide de kits ELISA selon les protocoles du fabricant.
8. Indices du profil lipidique : Le cholestérol total, les triglycérides, le cholestérol LDL et le cholestérol HDL, ainsi que le cholestérol LDL oxydé seront mesurés conformément au protocole du fabricant.
9. Résistance à l'insuline : La glycémie à jeun, les concentrations d'hémoglobine glyquée et d'insuline seront déterminées à l'aide de trousses selon les méthodes du fabricant. La formule HOMA-IR sera utilisée pour calculer la résistance à l'insuline à partir du glucose rapide et de l'insuline.
10. Les indices de la fonction rénale : le débit de filtration glomérulaire (DFG), la créatinine et l'albumine seront déterminés et le rapport albumine/créatinine calculé.

Lot de travail 2 (nouveau-nés) :

Pendant l'accouchement, du sang de cordon sera prélevé pour l'évaluation des marqueurs du stress oxydatif et de la fonction endothéliale et des marqueurs épigénétiques chez le fœtus. Les données suivantes seront collectées :

1. Mesures anthropométriques : Le poids, la longueur, la circonférence crânienne de l'enfant seront mesurés.
2. Mesures de la pression artérielle : la pression artérielle occasionnelle sera mesurée par oscillométrie à l'aide de brassards jetables adaptés à la taille du bras. La tension artérielle sera mesurée en trois exemplaires à cinq minutes d'intervalle au moins une heure après le repas du bébé et pendant son sommeil (Samantha et al, 2015).
3. Marqueurs de la fonction endothéliale : Endocan, la diméthyl arginine asymétrique (ADMA) et l'oxyde nitrique (NO) seront dosés à l'aide de kits ELISA conformément aux instructions des fabricants.
4. Marqueurs de stress oxydatif : la peroxydation lipidique, la capacité antioxydante totale et la 8-hydroxyl-2-désoxyguanine (8-OHdG) seront déterminées à l'aide de kits ELISA selon les protocoles du fabricant.
5. Indices du profil lipidique : Le cholestérol total, les triglycérides, le cholestérol LDL et le cholestérol HDL, ainsi que le cholestérol LDL oxydé seront mesurés conformément au protocole du fabricant.
6. Résistance à l'insuline : la glycémie du cordon ombilical et les concentrations d'insuline seront déterminées selon les méthodes du fabricant. La formule HOMA-IR sera utilisée pour calculer la résistance à l'insuline.
7. Les indices de la fonction rénale : débit de filtration glomérulaire (DFG), créatinine et albumine seront déterminés. Le rapport albumine/créatinine sera également déterminé.
8. Marqueurs épigénétiques : Concentrations urinaires de 5-méthyl-2-désoxycytidine et de triméthylhistone H3K9 à l'aide du kit Elisa selon les méthodes du fabricant.

Work Package 3 (Mères à 3 mois de suivi post-natal)

Les mères seront suivies trois mois après l'accouchement. Au cours de cette visite, aucun échantillon de sang ni d'urine ne sera prélevé sur les mères. Des échantillons d'urine seront prélevés sur des bébés pour mesurer les facteurs de risque de MCV. Les données suivantes seront collectées :

1. Mesures anthropométriques : la taille et le poids seront déterminés conformément aux recommandations de la NHANES, recommandations de 2009. L'IMC sera calculé à l'aide de la formule poids/(taille (m) x taille (m)) pour la mère et le bébé.
2. Mesures de la pression artérielle : la pression artérielle au bureau sera mesurée comme décrit par Puntner et al., (2019) en trois exemplaires à trois minutes d'intervalle après 10 minutes de repos en position assise. Ceci sera suivi d'une mesure de la pression artérielle ambulatoire sur 24 h pour déterminer la pression artérielle diurne/nocturne et le phénotype de trempage - mère
3. La tension artérielle sera mesurée chez le bébé en décubitus dorsal.
4. Tests de la fonction endothéliale : l'épaisseur de l'intima média carotidienne, la vitesse de l'onde de pouls et le ralentissement médié par le débit et l'évaluation de l'artère rétinienne seront mesurés à l'aide de l'échographie et du Vicorder (Ellins, 2017). La microvasculature rétinienne sera étudiée pour déterminer la fonction endothéliale chez la mère.
5. Tests de la fonction endothéliale : vitesse de l'onde de pouls et ralentissement médié par le débit à l'aide du Vicorder chez le bébé (Ng et al, 2018).

Work Package 4 (Enfant):

Les données seront collectées auprès des enfants à trois, douze et vingt-quatre mois après la naissance comme suit :

1. Mesures anthropométriques : Le poids, la longueur, la circonférence crânienne de l'enfant seront mesurés.
2. Mesures de la pression artérielle : la pression artérielle occasionnelle sera mesurée par oscillométrie à l'aide de brassards jetables adaptés à la taille du bras. La tension artérielle sera mesurée en trois exemplaires à cinq minutes d'intervalle au moins une heure après le repas du bébé et pendant son sommeil (Samantha et al, 2015).
3. Tests de la fonction endothéliale : vitesse de l'onde de pouls et ralentissement médié par le débit à l'aide du Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Marqueurs de la fonction endothéliale : Des échantillons d'urine seront prélevés pour les dosages Endocan, diméthyl arginine asymétrique (ADMA) et monoxyde d'azote (NO) à l'aide de kits ELISA conformément aux instructions du fabricant.
5. Marqueurs de stress oxydatif : la peroxydation lipidique, la capacité antioxydante totale et la 8-hydroxyl-2-désoxyguanine (8-OHdG) seront déterminées dans des échantillons d'urine à l'aide de kits ELISA conformément aux protocoles du fabricant.
6. Indices de la fonction rénale : la créatinine et l'albumine urinaires seront déterminées. Le rapport albumine/créatinine sera également déterminé.
7. Marqueurs épigénétiques : Concentrations urinaires de 5-méthyl-2-désoxycytidine et de triméthylhistone H3K9 à l'aide du kit elisa selon les méthodes du fabricant.
8. Tests de la fonction endothéliale : vitesse de l'onde de pouls et ralentissement médié par le débit à l'aide du Vicorder (Ng et al, 2018).