Salud cardiometabólica de niños expuestos a terapia antirretroviral (TAR) en el útero (ARTMOMSBABES)

I. Cálculo del tamaño de la muestra El número de participantes requerido para mostrar significación estadística se basa en estudios publicados previamente en los que se evaluó la función vascular en pacientes con VIH (Agu et al., 2019). Para calcular el tamaño de la muestra (n= 64 personas) se utilizó una probabilidad de error (α) de 0,05, una potencia (1-β) de 0,80 y un tamaño medio del efecto (d) de 0,5. Suponiendo una tasa de abandono del 25 %, utilizaremos N = (64 + (64*25)/100) = 80 madres/grupo para asegurarnos de que tendremos suficiente tamaño de muestra/grupo para mostrar significancia estadística. Por lo tanto, el número total de madres participantes será 160 (80 casos y 80 controles) y su descendencia, 160.

II. Aprobación ética El consentimiento ético y el permiso para llevar a cabo el proyecto de investigación se obtendrán del Comité de Ética e Investigación de la Facultad de Ciencias de la Salud (HRSEC) de la Universidad Walter Sisulu (WSU). El propósito del estudio se explicará a las mujeres que asisten a la clínica prenatal en los Hospitales Académicos General Umtata y Nelson Mandela, Mthatha, Provincia del Cabo Oriental. Las mujeres embarazadas que deseen participar deberán firmar formularios de consentimiento informado para participar en el estudio y permitir que sus hijos participen en el estudio desde el nacimiento.

tercero Diseño del estudio En este estudio se utilizará un diseño prospectivo de estudio de casos y controles.

IV. Criterios de selección Mujeres subsaharianas con embarazos de 11 a 14 semanas sin complicaciones, ser VIH positivas para el grupo de casos y VIH negativas para el grupo de control. Las mujeres embarazadas con diabetes tipo 2, diabetes gestacional, enfermedades renales y cardiovasculares o cualquier condición de salud crítica serán excluidas del estudio.

V. Plan Experimental

Paquete de trabajo 1 (Mujeres embarazadas):

Se registrarán tres visitas prenatales para este estudio. Estas visitas se realizarán durante el primer, segundo y tercer trimestre de gestación.

La siguiente información y parámetros se evaluarán durante cada visita prenatal:

1. Información de línea de base: Antecedentes demográficos, obstétricos y familiares maternos de enfermedades cardiovasculares durante la primera visita mediante un cuestionario - una vez fuera al inicio del estudio.
2. Medidas antropométricas: La altura y el peso se determinarán según las recomendaciones de la NHANES, 2009 recomendaciones. El IMC se calculará utilizando la fórmula peso/(altura (m) x altura (m)).
3. Mediciones de la presión arterial: la presión arterial en el consultorio se medirá según lo descrito por Muntner et al., (2019) por triplicado en intervalos de tres minutos después de 10 minutos de descanso en la posición sentada. A esto le seguirá una medición ambulatoria de la presión arterial durante 24 h para determinar la presión arterial diurna/nocturna y el fenotipo de inmersión.
4. Morfometría, arquitectura y vascularización placentaria: Las arterias uterinas, la arteria umbilical y la arteria cerebral media y el índice pulsátil medio de la arteria uterina se determinarán mediante ecografía. La relación cerebroplacentaria fetal se calculará cuando sea posible.
5. Pruebas de función endotelial: el grosor de la íntima media carotídea, la velocidad de la onda del pulso y la ralentización mediada por el flujo y la evaluación de la arteria retiniana se medirán mediante ultrasonografía y Vicorder (Ellins, 2017). Se estudiará la microvasculatura retinal para determinar la función endotelial.
6. Marcadores de función endotelial: Endocan, dimetilarginina asimétrica (ADMA) y óxido nítrico (NO) se analizarán utilizando kits ELISA según las instrucciones del fabricante.
7. Marcadores de estrés oxidativo: La peroxidación lipídica, la capacidad antioxidante total y la 8-hidroxil-2-desoxiguanina (8-OHdG) se determinarán mediante kits ELISA según los protocolos del fabricante.
8. Índices del perfil de lípidos: el colesterol total, los triglicéridos, el colesterol LDL y el colesterol HDL, y el colesterol LDL oxidado se medirán según el protocolo del fabricante.
9. Resistencia a la insulina: las concentraciones de glucosa en ayunas, hemoglobina glicosilada e insulina se determinarán utilizando kits según los métodos del fabricante. Se utilizará la fórmula HOMA-IR para calcular la resistencia a la insulina a partir de la glucosa rápida y la insulina.
10. Se determinarán los índices de función renal: tasa de filtración glomerular (TFG), creatinina y albúmina y se calculará la relación albúmina/creatinina.

Paquete de Trabajo 2 (Neonatos):

Durante el parto, se recolectará sangre de cordón umbilical para la evaluación de marcadores de estrés oxidativo y función endotelial y marcadores epigenéticos en el feto. Se recogerán los siguientes datos:

1. Medidas antropométricas: Se medirá el peso, la longitud, el perímetro craneal del niño.
2. Mediciones de presión arterial: La presión arterial casual se medirá por oscilometría utilizando manguitos desechables apropiados para el tamaño del brazo. La presión arterial se medirá por triplicado con intervalos de cinco minutos al menos una hora después de la comida del bebé y cuando el bebé esté durmiendo (Samantha et al, 2015).
3. Marcadores de función endotelial: Endocan, dimetilarginina asimétrica (ADMA) y óxido nítrico (NO) se analizarán utilizando kits ELISA según las instrucciones del fabricante.
4. Marcadores de estrés oxidativo: La peroxidación lipídica, la capacidad antioxidante total y la 8-hidroxil-2-desoxiguanina (8-OHdG) se determinarán mediante kits ELISA según los protocolos del fabricante.
5. Índices del perfil de lípidos: el colesterol total, los triglicéridos, el colesterol LDL y el colesterol HDL, y el colesterol LDL oxidado se medirán según el protocolo del fabricante.
6. Resistencia a la insulina: las concentraciones de glucosa e insulina en la sangre del cordón umbilical se determinarán según los métodos del fabricante. Se utilizará la fórmula HOMA-IR para calcular la resistencia a la insulina.
7. Se determinarán índices de función renal: filtrado glomerular (TFG), creatinina y albúmina. También se determinará la proporción de albúmina a creatinina.
8. Marcadores epigenéticos: Concentraciones en orina de 5-metil-2-desoxicitidina y trimetil histona H3K9 utilizando el kit Elisa según los métodos del fabricante.

Paquete de trabajo 3 (Madres a los 3 meses de seguimiento posnatal)

Las madres serán seguidas tres meses después del parto. Durante esta visita no se tomarán muestras de sangre ni de orina de las madres. Se recolectarán muestras de orina de bebés para medir los factores de riesgo de ECV. Se recogerán los siguientes datos:

1. Medidas antropométricas: La altura y el peso se determinarán según las recomendaciones de la NHANES, 2009 recomendaciones. El IMC se calculará utilizando la fórmula peso/(altura (m) x altura (m)) tanto para la madre como para el bebé.
2. Mediciones de la presión arterial: la presión arterial en el consultorio se medirá según lo descrito por Puntner et al., (2019) por triplicado en intervalos de tres minutos después de 10 minutos de descanso en la posición sentada. A esto le seguirá una medición ambulatoria de la presión arterial durante 24 h para determinar la presión arterial diurna/nocturna y el fenotipo de inmersión - madre
3. La presión arterial se medirá en el bebé en posición supina.
4. Pruebas de función endotelial: el grosor de la íntima media carotídea, la velocidad de la onda del pulso y la ralentización mediada por el flujo y la evaluación de la arteria retiniana se medirán mediante ultrasonografía y Vicorder (Ellins, 2017). Se estudiará la microvasculatura retinal para determinar la función endotelial en la madre.
5. Pruebas de función endotelial: velocidad de la onda del pulso y ralentización mediada por el flujo utilizando el Vicorder en el bebé (Ng et al, 2018).

Paquete de Trabajo 4 (Niño):

Se recogerán datos de los niños a los tres, doce y veinticuatro meses de nacidos de la siguiente forma:

1. Medidas antropométricas: Se medirá el peso, la longitud, el perímetro craneal del niño.
2. Mediciones de presión arterial: La presión arterial casual se medirá por oscilometría utilizando manguitos desechables apropiados para el tamaño del brazo. La presión arterial se medirá por triplicado con intervalos de cinco minutos al menos una hora después de la comida del bebé y cuando el bebé esté durmiendo (Samantha et al, 2015).
3. Pruebas de función endotelial: velocidad de la onda del pulso y ralentización mediada por el flujo utilizando Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Marcadores de la función endotelial: Se recolectarán muestras de orina para Endocan, ensayos de dimetilarginina asimétrica (ADMA) y óxido nítrico (NO) usando kits ELISA según las instrucciones del fabricante.
5. Marcadores de estrés oxidativo: La peroxidación lipídica, la capacidad antioxidante total y la 8-hidroxil-2-desoxiguanina (8-OHdG) se determinarán en muestras de orina mediante kits ELISA según protocolos del fabricante.
6. Índices de función renal: Se determinará la creatinina y la albúmina en orina. También se determinará la proporción de albúmina a creatinina.
7. Marcadores epigenéticos: Concentraciones en orina de 5-metil-2-desoxicitidina y trimetil Histona H3K9 utilizando el kit de elisa según los métodos del fabricante.
8. Pruebas de función endotelial: velocidad de la onda del pulso y ralentización mediada por el flujo utilizando Vicorder (Ng et al, 2018).